nanohelix DirectFast qRT-PCR 试剂盒说明书

DirectFast qRT-PCR 试剂盒

RealHelix™ DirectFast qRT-PCR Kit是一种基于探针的 qRT-PCR 试剂盒，设计用于从动物组织和各种临床样本（包括全血、血清和拭子收集）中直接实时扩增 RNA，无需任何 RNA 纯化过程。快速反应可以在一小时内完成qRT-PCR循环。该酶混合物是逆转录酶、抗体抑制的Taq DNA 聚合酶、RNase 抑制剂和不耐热的尿嘧啶-DNA-糖基化酶 (HL-UDG)的优化混合物。反应缓冲液包含所有必需的成分，包括优化的缓冲液成分、Mg 2+、dUTP 和dNTP. 应用的 HL-UDG/dUTP 系统消除了先前反应中 PCR 产物的残留污染。HL-UDG 在 PCR 混合物的设置和处理过程中有效地去除含有 dU 的 DNA 中的尿嘧啶残基。

图 1. 使用 RealHelix™ DirectFast qRT-PCR 试剂盒   的直接和多重实时 RT-PCR 。

按照该方案制备掺有 10 8个 SARS-CoV-2 RNA 拷贝的拭子裂解液。使用三组不同的目标特异性引物和_ _ _探针（S基因、ORF8和N基因）。探针用FAM( S基因)、HEX( ORF8 )和德克萨斯红( N基因)标记。使用 RealHelix TM DirectFast测试多重反应 实时 PCR 仪器 Bio-Rad CFX96 上的 qRT-PCR 试剂盒。

图 2. 使用 RealHelix™ DirectFast qRT-PCR Kit 从小鼠组织中进行直接和快速实时 RT-PCR 。

按照方案制备小鼠全血或肝脏的裂解物。使用小鼠 GAPDH 基因特异性引物和 FAM 标记的探针在实时 PCR 仪器 CFX96 TM (Bio-拉德）。

应用  

• 直接定量实时 RT-PCR

质量控制

RealHelix™ DirectFast qRT-PCR 试剂盒 使用实时 PCR、靶特异性引物和水解探针根据提供的方案使用全血或血清进行评估。