wako Anti Iba1, Rabbit小胶质细胞/巨噬细胞特异性抗体
先关产品：
wako Anti Iba1, Rabbit For Immunocytochemistry)
wako Anti Iba1, Rabbit 016-20001 (for Western Blotting)
Iba1: ionized calcium binding adapter molecule 1 小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体
钙离子是已知的所有细胞，包括中枢神经系统（CNS）细胞中最重要的信号调解人之一。钙离子通过与各种钙结合蛋白结合发挥信号活动，其中许多钙结合蛋白被划分成一个大的蛋白家族，EF手性蛋白家族。Iba1是一个17 kDa的EF手性蛋白，在巨噬细胞和小胶质细胞中表达，并在这些细胞的活化过程中表达升高。
本抗体以合成的的Iba1羧基末端序列为抗原，该序列是人，大鼠和小鼠Iba1蛋白质保守序列。本抗体（免疫组化用）特异性与小胶质细胞/巨噬细胞反应，免疫双重染色与单克隆抗体结合，可与GFAP单克隆抗体（(胶质纤维酸性蛋白，Glial Fibrillary Acidic Protein）联合使用对脑组织和细胞培养物进行双重染色。
特点
S特异性检测小胶质细胞与/巨噬细胞，不与神经细胞与星形胶质细胞发生交叉反应。可与人，大鼠，小鼠的Iba1反应
| Wako | 016-26721 | Anti Iba1, Monoclonal Antibody(NCNP24) | for Immunochemistry | 50ul |
| Wako | 012-26723 | Anti Iba1, Monoclonal Antibody(NCNP24) | for Immunochemistry | 10ul |
| Wako | 013-26471 | Anti Iba1, Rabbit, Red Fluorochrome(635)-conjugated | for Immunochemistry | 100ul |
| 小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(结合红色荧光素635) | ||||
| Wako | 016-26461 | Anti Iba1, Rabbit, Biotin-conjugated | for Immunochemistry | 100ul |
| 小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体（结合生物素） | ||||
| Wako | 019-19741 | Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry) | for Immunochemistry | 50μg |
| 小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(免疫组化) | ||||
| Wako | 016-20001 | Anti Iba1, Rabbit (for Western Blotting) | for Immunochemistry | 50μg |
| 小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(免疫印迹) |
应用
石蜡切片应用方法：
1. 固定
2. 用0.01M PBS缓冲液清洗二次
3. 使用含有0.3% 过氧化氢的甲醇孵育30分钟
4. 用0.01M PBS缓冲液清洗三次
5. 使用封闭液（含有1.5%的山羊血清和1%BSA的0.001M PBS缓冲液）室温孵育2小时
6. 使用含有Anti Iba1 polyclonal antibody的封闭液4℃孵育过夜
7. 用0.01M PBS缓冲液清洗三次
8. 使用含有生物素标记的抗兔IgG（1：200）的封闭液室温孵育1小时
9. 用0.01M PBS缓冲液清洗三次
10. 使用Elite ABC试剂（含有试剂A1：50，试剂B1：50的0.01M PBS溶液）
11. 用0.01M PBS缓冲液清洗三次
12. 过氧化物酶溶液（含有0.01% 过氧化氢和0.05% DAB的0.05M Tris溶液）
巨噬细胞/小胶质细胞特异性蛋白抗体Iba1的应用
免疫细胞化学⇒和光 Cat. No. 019-19741 (50μg (100μL))
说明书下载地址
http://www.siyaku.com/uh/Flh.do?file_path=/ANTI_FILES/W01/W01W0101-1974/D0010.pdf&now=1481080836480
免疫印迹⇒和光Cat. No. 016-20001 (50μg (100μL))
众所周知，钙离子是中枢神经系统细胞信号传递的重要介质。钙离子通过与各种钙结合蛋白关联激活信号，其中大多数蛋白属于EF手性蛋白家族。
Iba1属于17-kDa EF蛋白，在巨噬细胞和小胶质细胞中特异性表达，起到正向调节的作用。
和光提供的兔多抗可识别Iba1羧基末端序列的合成肽，这段Iba1蛋白序列在人、大鼠和小鼠中均存在。这些抗体可特异性的识别小胶质细胞和巨噬细胞，适用于脑组织的双重免疫染色，以及细胞培养中与GFAP单抗联合使用（GFAP单抗可特异性的识别星形胶质细胞）。
特征：特异性识别人、大鼠、小鼠的小胶质细胞及巨噬细胞，无法作用于神经元和星形胶质细胞。
大鼠原代的细胞培养的双重免疫染色和同一位置的对比图像
绿色：Iba1，小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体作用 (Wako Cat. #019-19741)
红色：星形胶质细胞，与GFAP单抗作用
（此数据由 日本神经系统科学国家研究所神经化学部提供）
Iba1抗体用于免疫细胞化学(Wako Cat. #019-19741)试验过程
石蜡切片应用
1）去石蜡
100%二甲苯 10分钟 2次
100%乙醇 5分钟 2次
80%乙醇 5分钟
70%乙醇 5分钟
一蒸馏水 5分钟 2次
2）用0.01M缓冲液冲洗两次；
3）在含0.3%过氧化氢的甲醇里孵育30分钟；
4））用0.01M缓冲液冲洗三次；
5）在室温下，放进含有1.5%山羊血清和1%牛血清蛋白的0.001MPBS的封闭液里孵育2小时；
6）在4度下，与 Anti Iba1 Antibody (0.5 μg/mL)(Wako Catalog No. 019‐19741)在封闭液中孵育过夜；
7）用0.01M PBS冲洗3次；
8）在室温下，与生物素标记的anti‐Rabbit IgG Antibody (1:200)在封闭液中孵育1小时；
9）用0.01M PBS冲洗3次；
10）在室温下，与ABC试剂（试剂A（1：50）和试剂B(1:50)与0.01MPBS混匀）孵育1小时
11）用0.01MPBS冲洗3次；
12)在过氧化物酶溶液（含0.01%过氧化氢，0.05%DAB的0.05MTris缓冲液）中孵育；
Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry) 019-19741 介绍
小胶质细胞/巨噬细胞特异性蛋白抗体(免疫组化)
鉴定小胶质细胞的标记物。众多文献引用。产品质量稳定。小胶质细胞属于神经免疫细胞，在当前神经生物学研究的热点。包括从事眼科研究，神经退行性疾病的客户会用到该产品。
文献报道可用于石蜡切片和冰冻切片的免疫组化（IHC）实验。
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品牌：Wako
CAS No.： 储存条件：-20℃ 纯度：0.5mg/ml |
详细介绍：
This product is for research use only. Do not administer it to human.
Antibodies against Macrophage/Microglia-specific Protein Iba1
Calcium ions are known to be one of the most important signal mediators in all cells including central nervous system (CNS) cells. Calcium ions exert their signaling activity through association with various calcium binding proteins, many of which are classified into a large protein family, the EF hand protein family. Iba1 is a 17-kDa EF hand protein that is specifically expressed in macrophages/ microglia and is upregulated during the activation of these cells.Wako has launched rabbit polyclonal antibodies were raised against a synthetic peptide corresponding to the Iba1 carboxy-terminal sequence, which was conserved among human, rat and mouse Iba1 protein sequences. These antibodies are specifically reactive to microglia/ macrophages, are appropriate for immuno-double staining of brain tissues and cell culture in combination with monoclonal antibody to GFAP, which specifically reacts to astrocyte.
Rabbit Anti Iba1 antibody is raised a synthetic peptide corresponding to C-terminus of Iba1.
Preparation: Purified by the antigen affinity chromatography from rabbit antisera and prepared in TBS solution. Contains no preservatives and stabilizers.
Specificity: Specific to microglia and macrophage, but not cross-reactive with neuron and astrocyte. Reactive with human, mouse and rat Iba1.
Working Concentration: Immunocytochemistry 1-2 μg/mL
Storage:Store at -20°C. After opening, aliquot contents and freeze at -20°C.
Package Size: 50 μg (100 μL)
Specificity：
Specific to microglia and macrophage, but not cross-reactive with neuron and astrocyte. Reactive with human, mouse and rat Iba1.
References:参考文献
- Imai, Y., Ibata, I., Ito, D., Ohsawa, K. and Kohsaka, S.: Biochem. Biophys. Res. Commun., 224, 855 (1996).
- Ito, D., Imai, Y., Ohsawa, K, Nakajima, K, Fukuuchi, Y. and Kohsaka, S.: Brain Res. Mol. Brain Res., 57, 1 (1998).
- Ohsawa, K., Imai, Y., Kanazawa, H., Sasaki, Y. and Kohsaka, S.: J. Cell Sci., 113, 3073 (2000).
- Sasaki, Y., Ohsawa, K., Kanazawa, H., Kohsaka, S. and Imai, Y.: Biochem. Biophys. Res. Commun., 286, 292 (2001).
- Kanazawa, H., Ohsawa, K., Sasaki, Y., Kohsaka, S. and Imai, Y.: J. Biol. Chem., 277, 20026(2002).
wako Anti Iba1, Rabbit 016-20001 (for Western Blotting)
钙离子作为信号转导通道中的第一信使，在所有细胞包括中枢神经细胞的生命活动中起重要作用。钙离子与不同的钙结合蛋白结合后进行级联反应。Iba1 是能与巨噬细胞和小胶质细胞发生特异性结合的钙结合蛋白，当这些细胞激活后，Iba1 的表达量上调，因此Iba1 通常作为鉴定小胶质细胞的标记物使用。近来研究发现，小胶质细胞除了提供营养、保护神经的作用外，还被证明可产生NO、TNF- α、IL-1 β等物质，因此将小胶质细胞定义为中枢神经系统中的巨噬细胞样吞噬细胞，具有重要的免疫细胞作用。当病原菌，病毒入侵中枢神经系统时会起免疫监视的作用。近来研究发现，该细胞可能与神经退行性疾病的发生和发展有关。本产品是可与小胶质细胞发生特异性反应的兔多抗，配合对星形胶质细胞有特异性的GFAP 单抗，可进行双染色。
抗原：合成肽（Iba1 的C 末端序列）
外观：TBS 溶液（1mg/ml）
提纯：抗原亲和提纯
特异性：对小胶质细胞、巨噬细胞特异反应。不会与神经元、星形胶质细胞发生交叉反应。
能与人、小鼠、大鼠Iba1 反应。
用法: ① Iba1 抗体，兔源（Immunocytochemistry 用）
适合Immunocytochemistry。
只需1 ～ 2 ug/ml 即可进行实验。
② Iba1 抗体，兔源（Western blotting 用）适合Western blotting。
只需0.5 ～ 1ug/ml 即可进行实验。
红色：抗GFAP 抗体（星形胶质细胞）
数据提供：日本国立精神• 神经中心神经研究所代谢研究部
