配制 SDS-PAGE 凝胶・缓冲剂试剂

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◆ 1 mol/L(±)-二硫苏糖醇(DTT)溶液


  1 mol/L (±)-二硫苏糖醇的水溶液。用于保护蛋白质的 SH 基及切断二硫化物的结合。已经过 0.2 μm 过滤器过滤。

  开启后请尽快使用。

  用作 SDS-PAGE 的还原剂时,请将本产品的最终浓度调至 100 mmol/L添加到样品缓冲液。

配制 SDS-PAGE 凝胶・缓冲剂试剂

1 mL 包装

◆ 0.5 mol/L TCEP 溶液、中性


  本产品为已调至中性的 0.5 mol/L TCEP 水溶液(TCEP),不含硫醇的还原剂。

  已使用氢氧化钠调节pH值,已经过 0.2 μm 过滤器过滤。

  开启后请尽快使用。

  用作 SDS-PAGE 的还原剂时,请将本产品的最终浓度调至 50 mmol/L添加到样品缓冲液。

  ※TCEP : Tris(2-carboxyethyl)phosphine Hydrochloride

配制 SDS-PAGE 凝胶・缓冲剂试剂

1 mL 包装

蛋白质电泳相关化合物



产品编号

产品名称

规格

包装

甲叉双丙烯酰胺溶液

018-25625

30w/v% Acrylamide/Bis Mixed Solution (37.5:1)

0w/v%甲叉双丙烯酰胺溶液(37.5:1)

用于电泳

500 mL

015-25635

30w/v% Acrylamide/Bis Mixed Solution (29:1)

30w/v%甲叉双丙烯酰胺溶液(29:1)

500 mL

012-25645

30w/v% Acrylamide/Bis Mixed Solution (19:1)

30w/v%甲叉双丙烯酰胺溶液(29:1)

500 mL

019-25655

40w/v% Acrylamide/Bis Mixed Solution (37.5:1)

40w/v%甲叉双丙烯酰胺溶液(37.5:1)

500 mL

016-25665

40w/v% Acrylamide/Bis Mixed Solution (29:1)

40w/v%甲叉双丙烯酰胺溶液(29:1)

500 mL

013-25675

40w/v% Acrylamide/Bis Mixed Solution (19:1)

40w/v%甲叉双丙烯酰胺溶液(19:1)

500 mL

丙烯酰胺

017-08012

019-08011

011-08015


Acrylamide

烯酰胺

≧99.0%


用于电泳

25 g

100 g

500 g

012-24702

014-24701

016-24705

010-24703


Acrylamide

丙烯酰胺

≧99.0%,Protease, Nuclease-free


蛋白质组学

25 g

100 g

500 g

1 kg

交联剂(双丙烯酰胺)

138-06032

130-06031

N,N'-Methylenebis(acrylamide)

N,N-亚甲基双丙烯酰胺

≧99.0%


用于电泳

25 g

100 g

SDS

197-07142

199-07141

191-07145


Sodium Dodecyl Sulfate

十二烷基硫酸钠[SDS]

≧95.0%(capillary GC), ≧98.0%(Titration)


生物化学用

25 g

100 g

500 g

聚合促进剂(APS)

012-08023

016-08021

Ammonium Peroxodisulfate

硫酸[APS]

≧99%

用于电泳

10 g

100 g

019-15922

10w/v% Ammonium Peroxodisulfate Solution

10w/v%过硫酸铵溶液

[10w/v% APS]

用于电泳

25 mL

聚合引发剂(TEMED)

205-06313

N,N,N',N'-Tetramethylethylenediamine

N,N,N',N'-四甲基乙二胺[TEMED]

≧99.0%

用于电泳

25 mL

208-17452

200-17451

N,N,N',N'-Tetramethylethylenediamine

N,N,N',N'四甲基乙二胺[TEMED]

≧98.0%, Protease, Nuclease-free

蛋白质组学

25 mL

100 mL

Tirs

202-07881

204-07885

206-07884

2-Amino-2-hydroxymethyl-1,3-propanediol

2-2-氨基-2-羟甲基-1,3-丙二醇[Tris]

≧99.0%

生物化学用

100 g

500 g

2.5 kg

Tris-HCl

010-17451

012-17455

016-17453

2-Amino-2-Hydroxymethyl-1,3-propanediol Hydrochloride

2-氨基-2-羟甲基-1,3-丙二醇盐盐[Tris-HCl]

≧99.0

生物化学用

100 g

500 g

1 kg

还原剂

137-06862

133-06864

139-06861

2-Mercaptoethanol

2-巯基乙醇

≧98.5

生物化学用

25 g

100 g

2 mL×5

041-08971

047-08973

045-08974

041-08976

049-08972


(+/-)-Dithiothreitol

(+/-) – 二硫苏糖醇[DTT]

≧97.0%

预防SH组氧化

100 mg

1 g

5 g

10 g

25 g

207-09232

201-09235

3-Mercapto-1,2-propanediol

3--1,2-丙二醇

≧98.0

和光特级

25 mL

500 mL

209-19861

205-19863

203-19864

TCEP Hydrochloride

TCEP

≧98.0%

生物化学用

1 g

10 g

50 g

其他

079-00614

075-00616

075-00611

Glycerol

甘油

≧99.0%

试剂特级

100 mL

500 mL

3 L

021-02911

029-02912

Bromophenol Blue

试剂特级

1 g

25 g

043-16785

047-16783

045-16784


Distilled Water

蒸馏水


500 mL

2 L

2 L×6

产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
044-33871 1 mol/l (+/-)-Dithiothreitol(DTT) Solution
1 mol/l (±)-二硫苏糖醇(DTT)溶液
1 mL
040-33873 1 mol/l (+/-)-Dithiothreitol(DTT) Solution
1 mol/l (±)-二硫苏糖醇(DTT)溶液
1 mL×10
207-20151 0.5 mol/l TCEP Solution, Neutral pH
0.5 mol/l TCEP溶液, 中性
1 mL
203-20153 0.5 mol/l TCEP Solution, Neutral pH
0.5 mol/l TCEP溶液, 中性
1 mL×10

缓冲液如何配制

1包被缓冲液,

(1)碳酸盐缓冲液(PH9.6 +0.2  0.05M) 《激素酶免疫测定技术》石老师编著

           Na2CO31.59g

NaHCO3        2.93g

加蒸馏水至1000ml。

(2)tris缓冲液(0.05mol/L)50ml 0.1mol/L

(Tris)溶液与x ml 0.1mol/L 盐酸混匀后,加水稀释至100ml        《酶免疫测定技术》杨立国等编著

各种pH值的Tris缓冲液的配制

所需pH值(25℃)

0.1mol/L HCl的体积

7.1

45.7

7.2

44.7

7.3

43.4

7.4

42.0

7.5

40.3

7.6

38.5

7.7

36.6

7.8

34.5

7.9

32.0

8.0

29.2

8. 1

26.2

8.2

22.9

8.3

19.9

8.4

17.2

8.5

14.7

8.6

12.4

8.7

10.3

8.8

8.5

8.9

7.0

某一特定pH值的0.05mol/L Tris缓冲液的配制:将50ml 0.1mol/L Tris碱溶液与上表所示相应体积(单位:ml)的0.1ml/L HCl混合,加水将体积调至100ml

0.1mol/L盐酸的配置:

买来的浓盐酸是 12 mol/L的,以配制1L 0.1mol/L的盐酸为例:

先用量筒量取8.3 mL的浓盐酸倒入容量瓶,然后将溶液加蒸馏水稀释至体积为1 L,此时的溶液就是0.1mol/L的盐酸。

 

0.1mol/Ltris的配置:0.1 mol/L溶液为12.114 g/L

则 配制600mlTris缓冲液的方法:

三羟甲基氨基甲烷: 3.6g

浓盐酸:           2.09ml

 

3)0.02mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)

磷酸二氢钾        0.2g

磷酸氢二钠        2.90g

氯化钠            8g

加去离子水定容到1000ml。

2洗涤缓冲液(pH7.4   0.15mol/L)   《激素酶免疫测定技术》石老师编著

0.05%Tween-20       0.5ml

加在PBS缓冲液1000ml中。

PBS缓冲液:

KH2PO4            0.2g

Na2HPO4·12H2O    2.9g

NaCl               8.0g

KCl               0.2g

加蒸馏水至1000ml。

3测定缓冲液(Ph7.0  含0.87﹪NaCl 和0.1﹪BSA的0.1M磷酸缓冲液)用于标准孕酮,孕酮酶标物及奶样的稀释。   《激素酶免疫测定技术》石老师编著

        Na2HPO4·12H2O    21.85g

NaH2PO4·2H2O      6.08g

NaCl               8.70g

BSA               1.00g

溶于1000mL蒸馏水中

4封闭缓冲液

牛血清白蛋白(BSA)   2%    2g

      (或5%脱脂奶粉)加洗涤缓冲液100 ml。

 

 

0.05mol/L碳酸盐缓冲液(pH9.6)+2.0%BSA

2.0gBSA加配好的0.05mol/L碳酸盐缓冲液溶解定量至100ml

5底物缓冲液(pH5.4)磷酸盐-柠檬酸缓冲液

0.2M  Na2HPO4(无水28.4g/L,带12结晶水71.7g/L) 取25.7ml

0.1M  柠檬酸(无水19.2g/L,带1结晶水21.01g/L)   取24.3ml

加蒸馏水至100ml。

 

柠檬酸(C6H8O7·H2O)    0.47g

Na2HPO4·12H2O               2.00g

6(1) TMB(四甲基联苯胺)显色液(蓝色)

A液(3,3’,5,5’-四甲基联苯胺,TMB):称取TMB20mg溶于10ml无水乙醇中,*溶解后,加双蒸水至100ml。

B液(0.1mol/L柠檬酸-0.2mol/L磷酸氢二钠缓冲液,pH5.0-5.4):称取Na2HPO4·12H2O14.34g,柠檬酸1.87g溶于180ml双蒸水,加0.75%过氧化氢尿素1.28ml,定容至200ml,调pH至5.0-5.4。

将A液和B液按1:l混合后即成TMB-过氧化氢尿素应用液

TMB(2mg/ml水)          0.05ml

底物缓冲液            0.95ml

30%  H2O2           0.001ml

总体积1ml。

(2)OPD(邻苯二胺)显色液(黄棕色)(现配避光)

OPD(干粉)             0.004g

底物缓冲液                10ml

30%  H2O2                    0.015ml

总体积10ml。

(3)TMBS底物液(用于显色)  《激素酶免疫测定技术》石老师编著

10mg四甲基联苯胺硫酸盐(TMBS)的二甲基亚砜溶液,用底物缓冲液配成0.2mg/ml的TMBS底物液。用前加H2O2溶液30﹪左右。

终止液  2mol/LH2SO4   用于终止反应

 在178.3ml水中,逐滴加入浓硫酸(18M,约98%)21.7ml,边加边摇。(浓H2SO4:蒸馏水=1:9)