胶原酶-组织消化好帮手

胶原酶,英文名collagenase,是组织消化中常用的酶。上海金畔提供Worthington的胶原酶。

Worthington Biochemical是一家始于1947年,位于美国新泽西州的生产高纯度酶类及相关生化药剂的世界*公司,公司致力于为客户提供zui的产品及服务。Worthington供应的生物药剂主要纯化于牛胰腺、植物、发酵产物及其他自然资源,公司专长的蛋白提取与纯化技术保证了其所提供酶类拥有与其提取来源物中同等的生物活性,从而保证了研究结果的可靠性和稳定性。目前Worthington提供的产品覆盖细胞分离消化酶、DNA酶、RNA酶等几乎所有生命科学研究领域

1 胶原酶的定义

胶原酶(collagenase)又名胶原蛋白水解酶,是从溶组织梭状细胞芽孢杆菌提取制备的,主要水解结缔组织中胶原蛋白成分。它能在生理PH和温度条件下特异性地水解天然胶原蛋白的三维螺旋结构,而不损伤其它蛋白质和组织。

2 产品信息

2.1 来源 Clostridium histolyticum(溶组织梭菌)

2.2 分类

商业化的胶原酶产品一般是梭状芽孢杆菌裂解液的粗提物,是巯基蛋白酶、梭菌蛋白酶、类胰蛋白酶以及氨基肽酶等蛋白水解酶混合物,能降解胶原蛋白和其他蛋白,及多糖等胞外大分子物质,适用于多种组织的消化应用。每种胶原酶的特定酶谱与获得用于研究的细胞的组织相关(或与细胞置于其中的用途相关),并且作为相关性的结果Worthington建立了1,2,3,4,5类型的粗制胶原酶体系,可以根据所要分离消化的特定组织选择合适的胶原酶类型。

  • 胶原酶1型:有着初始平衡的胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶的活性。推荐用于脂肪、肾上腺和肝脏的细胞分离。
  • 胶原酶2型:含有更高的梭菌蛋白酶活性。推荐用于心脏、骨骼、肌肉、甲状腺、软骨和肝脏的细胞分离。
  • 胶原酶3型:次级蛋白酶的含量低但是含有胰蛋白酶活性。推荐用于原代乳腺细胞分离。
  • 胶原酶4型:含有低水平的胰蛋白酶活性以限制膜蛋白和受体的损伤,但是含有正常水平的上述胶原酶的活性成分。推荐用于胰岛原代细胞分离。
  • 胶原酶5型:部分纯化,含有较高的胶原酶和酪蛋白酶活性。

  Worthington对于上述类型的胶原酶,同样可以提供经0.22um滤膜过滤处理的,以预包装形式直接重建的,用于细胞分离和培养过程。另可提供无动物源性胶原酶(用*没有动物成分的培养基培养的,并且专门为必须防止潜在的动物源病体介入的生物工艺应用设计的)。

2.3 酶活定义

一个单位的胶原酶相当于在pH 7.5和37℃条件下,5小时内从胶原蛋白上释放1微摩尔L-亮氨酸所需的胶原酶的量。

2.4 使用方法

通常使用浓度:0.05 % ~0.5 % (w/v) 在Hank’s, Earle’s 或者其他平衡盐溶液中。

 

2.5 存储温度 2-8℃

3 产品指标&列表

3.1 粗制胶原酶

产品名称 胶原酶CDU/mgdw 酪蛋白酶u/mgdw 梭菌蛋白酶u/mgdw 胰蛋白酶u/mgdw 目录号
100mg 1g 5g bulk
胶原酶1型 ≥125 ≥200 ≤4.0 ≤0.5 LS004194 LS004196 LS004197 LS004200
胶原酶2型 ≥125 ≥200 ≥3.5 ≥0.1 LS004174 LS004176 LS004177 LS004179
胶原酶3型 ≥100 ≥50 ≤3.0 ≤0.3 LS004180 LS004182 LS004183 LS004185
胶原酶4型 ≥160 ≥100 ≤3.0 ≤0.1 LS004186 LS004188 LS004189 LS004191
胶原酶5型 ≥450 ≥450 ≤3.0 ≤0.3 LS005280 LS005282 LS005283 LS005284

3.2 0.22um滤膜过滤处理

产品名称 胶原酶CDU/mgdw 酪蛋白酶u/mgdw 梭菌蛋白酶u/mgdw 胰蛋白酶u/mgdw 目录号
50mg 5*50mg 1g
胶原酶1型,过滤的 ≥125 ≥200 ≤4.0 ≤0.5 LS004214 LS004216 LS004217
胶原酶2型,过滤的 ≥125 ≥200 ≥3.5 ≥0.1 LS004202 LS004204 LS004205
胶原酶3型,过滤的 ≥100 ≥50 ≤3.0 ≤0.3 LS004206 LS004208
胶原酶4型,过滤的 ≥160 ≥100 ≤3.0 ≤0.1 LS004210 LS004212 LS004209
胶原酶5型,过滤的 ≥450 ≥450 ≤3.0 ≤0.3 LS005286 LS005287 LS005288

 

3.3 无动物源性

产品名称 胶原酶CDU/mgdw 酪蛋白酶u/mgdw 梭菌蛋白酶u/mgdw 胰蛋白酶u/mgdw 目录号
100mg 1g 5g bulk
胶原酶A ≥150 ≥150 ≤8.0 ≥0.1 LS004152 LS004154 LS004156 LS004158
胶原酶B ≥300 ≥300 ≤5.0 ≤0.5 LS004145 LS004147 LS004148 LS004150
胶原酶C ≥200 ≥150 ≤3.0 ≤0.1 LS004138 LS004140 LS004141 LS004143

无动物源性,过滤的

产品名称 胶原酶CDU/mgdw 酪蛋白酶u/mgdw 梭菌蛋白酶u/mgdw 胰蛋白酶u/mgdw 目录号
50mg 5*50mg
胶原酶A,过滤的 ≥150 ≥150 ≤8.0 ≥0.1 LS004118 LS004119
胶原酶B,过滤的 ≥300 ≥300 ≤5.0 ≤0.5 LS004124 LS004125
胶原酶C,过滤的 ≥200 ≥150 ≤3.0 ≤0.1 LS004130 LS004131

胶原酶现货来啦~快来抢购吧!

胶原酶现货信息如下:

货号 品名 规格 品牌
LS004179 Collagenase, Type 2 (CLS-2) 1000g*1 Worthington
LS004176 Collagenase, Type 2 (CLS-2)2型胶原酶 1 gm worthington
LS004196 Collagenase, Type 1 (CLS-1), 1g worthington

LS004179大量现货,胶原酶大量现货  

Wako 031-17601 胶原酶 I型 Collagenase Type I

Wako 031-17601 胶原酶 I型 Collagenase Type I
【产品名称】Collagenase Type I
Wako  031-17601  Collagenase Type I 9001-12-1   和光纯药
【制造商】Wako Pure Chemical Industries, Ltd.
【销售商代码】031-17601
【规格】100mg
【CAS.NO】9001-12-1
【保存条件】Keep at RT.
Wako  031-17601  Collagenase Type I 9001-12-1   和光纯药 现货
【外观】Brown, crystalline powder – powder
【注意事项】This product is for research use only. Do not administer it to human.
Source: Clostridium histolyticum
Solubility: The 1 mg is dissolved in 1 mL of water.
This is an enzyme that specifically hydrolyzes collagen as a substrate
and the activities of collagenase, caseinase, clostripain and trypsin are contained in good balance. It is mainly used for isolation of cells from epithelial tissue, lung and adipose tissue.
ES·iPS Catalog 2013
产品描述
胶原酶(Collagenase)是一种蛋白酶,一种肽链内切酶,能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列(该序列高频率出现在胶原中,很少发现于其他蛋白中)并切割该序列中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽,但胶原酶是唯一一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶,这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。
本品是一种酶粗提物,不仅含有胶原酶(更准确的称法为梭菌蛋白酶A(clostridiopeptidase A)),能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白,多糖和脂质,使得本品非常适用于组织消化。
目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异,分为四种类型:胶原酶I型,II型,III型和IV型,在应用上有所偏向:1)胶原酶I(Type I Collagenase):含有比较均匀的各种酶活力(包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性)。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备;2)胶原酶II(Type II Collagenase):含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备;3)胶原酶III(Type III Collagenase):含有较低的蛋白酶活性,常用于乳腺细胞的制备;4)胶原酶IV(Type IV Collagenase):含有低胰酶活性,通常用于胰岛细胞的制备,或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。
本品为I型胶原酶,可用于上皮、肝、肺、脂肪和肾上腺等组织和细胞的解离。
酶活力单位定义
在37℃,pH7.5 的条件下,5h内水解胶原产生相当于1µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。
运输和保存方法
室温运输。4℃避光保存,2年有效。储存液-20℃避光冻存。
注意事项
为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法

  1. 胶原酶储存液的配制

向每管100mg的胶原酶中加入100µL的含Ca2+、Mg2+的HBSS(Hank’s平衡盐溶液,含Ca2+、Mg2+),轻轻旋涡震荡使其充分溶解,制备成1g/ml(即1000×)的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22μm的滤膜过滤除菌,分装成小份量,然后于-20℃避光冻存。
使用前于冰上解冻,避免反复冻融。其用于组织和细胞分散的常用浓度为:0.5-2.5mg/ml,用于软骨消化的常用浓度为1-2mg/ml,需要根据特定的实验条件或者参考相应的文献资料确定所需的最佳工作浓度。
2.组织的分离
1)使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4mm大小的组织块;
2)利用含Ca2+、Mg2+的HBSS洗涤组织块数次;
3)加入足量的含Ca2+、Mg2+的HBSS,使其浸没组织块,并加入胶原酶至需要工作浓度;
4)于37℃孵育4-18h。消化时使用水平摇床以及用3mM的CaCl2补充消化可以提高消化效率。
5) 已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得,收集备用。未完全解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育;
6)利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;
7)细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。
8)于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。
3. 器官灌注
1)向37℃预热的含Ca2+、Mg2+的HBSS中加入胶原酶,另添加3mM的CaCl2有助于提高分离效率;
2)按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液;
3)将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛,从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来,未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育;
4)利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;
5)细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。
6)于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。
 
 
货号   品名     规格  Cas
Wako  031-17601  Collagenase Type I 9001-12-1   和光纯药 现货
012-01965   Alminium Oxide   500g     –
012-03305   Ammonium Dihydrogenphosphate  500g     7722-76-1
012-08643   Amino Acids Mixture Standard Solution, Type B 1mL×5A –
013-08391   Amino Acids Mixture Standard Solution, Type H 5mL      –
015-14461   Amino Acids Mixture Standard Solution, Type AN-2  5mL      –
015-25191   Anti Phosphorylated α-Synuclein, Monoclonal Antibody (pSyn#64)      50ul      –
Wako  031-17601  Collagenase Type I 9001-12-1   和光纯药 现货
011-14463   Amino Acids Mixture Standard Solution, Type AN-2  1mL×5A –
011-19365   2,2′-Azobis[2-(2-imidazolin-2-yl)propane]
Dihydrochloride   500g     27776-21-2
016-08641   Amino Acids Mixture Standard Solution, Type B 5mL      –
016-20001   Anti Iba1, Rabbit (for Western Blotting)     50μg     –
016-23281   Anti Rat P2X4, Monoclonal Antibody     50ug     –
017-19362   2,2′-Azobis[2-(2-imidazolin-2-yl)propane] Dihydrochloride    25g 27776-21-2
018-08721   Agar, Powder     100g     9002-18-0
Wako  031-17601  Collagenase Type I 9001-12-1   和光纯药 现货
018-22021   Anti Mouse Ago2, Monoclonal Antibody 100μL    –
019-03435   Ammonium sulfate    500g     7783-20-2
019-19741   Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)    50μg     –
019-22291   Anti Olfactory Marker Protein, Goat      100μL    –
021-02195   Boric acid     500g     10043-35-3
021-16201   BES-H2O2(Cell-impermeant)   1mg      –
031-17601   Collagenase Type I    100mg   9001-12-1
032-08385   Citric Acid Monohydrate   500g     5949-29-1
032-15372   Casein Phosphopeptide    25g –
034-06363   N-Caprylic Acid   25mL    124-07-2
Wako  031-17601  Collagenase Type I 9001-12-1   和光纯药 现货
034-16111   Cefotaxime Sodium Salt   1g   64485-93-4
035-04595   Creatinine    500g     60-27-5
035-17604   Collagenase Type I    1g   9001-12-1
038-23221   α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated  1mg      –
039-01335   Carboxymethyl Cellulose Sodium Salt   500g     9004-32-4
021-17801   BES-So-AM 1mg      936356-51-3
022-07985   γ-Butyrolactone  500mL   96-48-0
025-03195   Buffer Solution Standard (Phosphate pH Standard Equimolal Solution)
pH6.86 (25 degrees C)    500mL   –
Wako  031-17601  Collagenase Type I 9001-12-1   和光纯药 现货
047-18863   Dexamethasone 100mg   50-02-2
049-18801   4′,6-Diamidino-2-phenylindole Dihydrochloride n-Hydrate      10mg      28718-90-3
058-07681   EasySeparator    1set      –
025-03195   Buffer Solution Standard (Phosphate pH Standard Equimolal Solution)
pH6.86 (25 degrees C)    500mL   –
019-08393   Amino Acids Mixture Standard Solution, Type H 5Ax1mL –
019-11941   Active Carbon-impregnated Silica Gel   10g –
019-19741   Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)    50μg     –
025-15481   BES-Thio     1mg      –
026-16371   BF-170  1mg      –
Wako  031-17601  Collagenase Type I 9001-12-1   和光纯药 现货
027-01276   Benzyl Alcohol    500mL   100-51-6
028-03185   Buffer Solution Standard (Phthalate pH Standard Solution)
pH4.01 (25 degrees C)    500mL   –
028-03185   Buffer Solution Standard (Phthalate pH Standard Solution)
pH4.01 (25 degrees C)    500mL   –
028-03205   Buffer Solution Standard (Tetraborate pH Standard Solution)
pH9.18 (25 degrees C)    500mL   –
077-03155   Gelatin   500g     9000-70-8
081-00136   Heparin Sodium  10mu    9041-08-1
Wako  031-17601  Collagenase Type I 9001-12-1   和光纯药 现货
088-00705   L-Histidine Hydrochloride Monohydrate      500g     5934-29-2
093-06471   Insulin, Human, recombinant   50mg    –
097-06474   Insulin, Human, recombinant   1g   11061-68-0
120-04891   L-012    100mg   –
125-05061   Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade      5×20μg  –
125-05061   Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade      5×20μg  –
125-05061   Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade      5×20μg  –
129-02541   Lysyl Endopeptidase( R)   10AU     –
129-02541   Lysyl Endopeptidase( R)   10AU     –
129-02541   Lysyl Endopeptidase( R)   10AU     –
129-04861   LY 294002   5mg      154447-36-6
130-07871   Melibiose     5g   585-99-9
Wako  031-17601  Collagenase Type I 9001-12-1   和光纯药 现货
028-16211   BES-So (Cell-impermeant)      1mg      –
028-17811   BES-H2O2-Ac     1mg      –
029-16361   BF-168  1mg      –
039-23511   CultureSure? Freezing Medium    100ml    –
041-18861   Dexamethasine   1g   50-02-2
042-29445   Dibasic Sodium Phosphate Hydrate 500g     10039-32-4
043-22611   Dextran 200,000 100g     9004-54-0
064-05381   Fibroblast Growth Factor (basic)(FGFb / bFGF / FGF2),
Human, recombinant, Animal-derived-free  50ug     106096-93-9
071-02293   gamma-Globulin, from Human Serum   5g   9007-83-4
075-03075   Gellan Gum  500g     71010-52-1
Wako  031-17601  Collagenase Type I 9001-12-1   和光纯药 现货
131-00405   Magnesium Sulfate    500g     10034-, 99-8
136-03032   Methyl Red   25g 493-52-7
137-06085   Molecular Sieves 4A1/16  500g     70955-01-0
138-07872   Melibiose     25g 585-99-9
145-08221   Nuclease P1 500u     54576-84-0
145-08221   Nuclease P1 500u     54576-84-0
162-09115   Polyethylene Glycol 4,000 500g     25322-68-3
163-03545   Potassium Chloride    500g     7447-40-7
164-21655   N/400 Potassium Polyvinyl Sulfate Solu 500mL   26837-42-3
191-01785   Trisodium Citrate Dihydrate    500g     6132-04-3
193-02041   Glycerol 2-Phosphate Disodium Salt n-Hydrate   100g     819-83-0
195-12854   Streptavidin, from Streptomyces avidinii     5mg      9013-20-1
195-16031   StemSure (R) Freezing Medium     100ml    –
Wako  031-17601  Collagenase Type I 9001-12-1   和光纯药 现货
196-00015   Sucrose 500g     57-50-1
196-08675   Sodium Dodecyl Sulfate    500g     151-21-3
197-07485   Sodium Sulfate   500g     7757-82-6
199-02825   Sodium Dihydrogenphosphate Dihydrate    500g     13472-35-0
203-17561   Trichostatin A     1mg      58880-19-6
207-00055   L(+)-Tartaric Acid     500g     87-69-4
208-08385   1mol/l Triethylammonium Hydrogencarbonate Solution   500mL   15715-58-9
223-02112   VA-044  25g 27776-21-2
225-02111   VA-044  100g     27776-21-2
165-09105   Polyethylene Glycol 2,000 500g     25322-68-3
165-17035   Polyvinylpyrrolidone K 30 500g     9003-39-8
167-09045   Polyethylene Glycol 200   500g     25322-68-3
169-04245   Potassium Dihydrogen Phosphate  500g     7778-77-0
Wako  031-17601  Collagenase Type I 9001-12-1   和光纯药 现货
169-09125   Polyethylene Glycol 6,000 500g     25322-68-3
185-01003   Rifampicin    5g   13292-46-1
186-01114   all-trans-Retinoic Acid 50mg    302-79-4
189-01001   Rifampicin    1g   13292-46-1
190-05535   Trisodium Citrate Dihydrate    500g     6132-04-3
191-01665   Sodium Chloride  500g     7647-14-5
227-01071   Valproic Acid 5g   99-66-1
231-02011   Wetting Tension Test Mixture No.52.0  50mL    –
232-01941   Wetting Tension Test Mixture No.42.0  50mL    –
233-01971   Wetting Tension Test Mixture No.45.0  50mL    –
234-02001   Wetting Tension Test Mixture No.50.0  50mL    –
235-01931   Wetting Tension Test Mixture No.41.0  50mL    –
Wako  031-17601  Collagenase Type I 9001-12-1   和光纯药 现货
235-02031   Wetting Tension Test Mixture No.56.0  50mL    –
236-01961   Wetting Tension Test Mixture No.44.0  50mL    –
238-01921   Wetting Tension Test Mixture No.40.0  50mL    –
238-02021   Wetting Tension Test Mixture No.54.0  50mL    –
238-02141   Wetting Tension Test Mixture No.73.0  50mL    7732-18-5
253-00513   Y-27632 5mg      331752-47-7
257-00511   Y-27632 1mg      331752-47-7
290-34251   Presep-C DNPH   20EA     –
296-63801   LabAssay? Phospholipid   1300tests     –
Wako  031-17601  Collagenase Type I 9001-12-1   和光纯药 现货
298-64101   Fructooligosaccharides standard set     set  –
302-93561   Phos-tag (TM) Agarose    0.5mL    –
304-93521   Phos-tag (TM) Acrylamide AAL-107      10mg    –
304-93521   Phos-tag (TM) Acrylamide AAL-107      10mg    –
290-34251   Presep-C DNPH   20EA     –
290-63701   LabAssay? Triglyceride    1000tests     -2016-2-29
290-65901   LabAssay? Creatinine      500tests –
291-58601   Lab Assay ALP    900tests –
293-51601   Endotoxin Extracting Solution for LAL Test  10mL x 4     –
294-62001   DsDD cDNA Subtraction kit Wako   5tests    –
294-63601   LabAssay? NEFA 750tests –
294-65801   LabAssay? Cholesterol    1000tests     –
295-50201   DNA Extractor? Kit   50tests  –
295-51301   Limulus ES-II Single Test Wako     25 tests –
Wako  031-17601  Collagenase Type I 9001-12-1   和光纯药 现货
295-51301   Limulus ES-II Single Test Wako     25 tests –
295-73401   Fructooligosaccharides Set      Set  –
304-93526   Phos-tag (TM) Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution   0.3ml    –
305-93551   Phos-tag? Mass Analytical Kit set  –
308-93541   Phos-tag (TM) Biotin BTL-105 10mg    –
308-93563   Phos-tag (TM) Agarose    3mL      –
308-97201   Phos-tag Biotin BTL-1111 1mM Aqueous Solution    0.1000mL    –
325-88521   Lipase PS Amano SD  10g –
298-65701   LabAssay? Glucose   1000tests     –
300-93523   Phos-tag (TM) Acrylamide AAL-107      2mg      –
301-93531   Phos-tag (TM) Biotin BTL-104 10mg    –
301-99413   Phos-tagTM Biotin BTL-104 1mM Aqueous Solution[for Campaign]     0.1mL      753451-66-0
302-93522   Phos-tagTM Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution[for Campaign]      0.3mL    871839-54-2
631-00651   Cellmatrix Type I -A (Collagen, Type I, 3 mg/mL, pH 3.0)     20mL    –
Wako  031-17601  Collagenase Type I 9001-12-1   和光纯药 现货
637-00653   Cellmatrix Type I -A (Collagen, Type I, 3 mg/mL, pH 3.0)     100mL   –
637-00653   Cellmatrix Type I -A (Collagen, Type I, 3 mg/mL, pH 3.0)     100mL   –
638-01021   Endotoxin Standad /JPSE  10000un      –
986-10001   Anti asialo GM1 (Rabbit), (014-09801)  1mL      617-45-8

Collagenase V胶原酶V型说明书

Collagenase V胶原酶V型说明书

 

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价格

LS005280-100mg

100mg

630.00

LS005282-1g

1g

3,500.00

LS005283-5g

5g

14,900.00

 

产品描述

胶原酶(Collagenase)是一种蛋白酶,一种肽链内切酶,能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列(该序列高频率出现在胶原中,很少发现于其他蛋白中)并切割该序列中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽,但胶原酶是一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶,这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

本品来源于溶组织梭菌(Clostridium histolyticum),是一种酶粗提物,不仅含有胶原酶(更准确的称法为梭菌蛋白酶A(clostridiopeptidase A)),能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白,多糖和脂质,使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异,分为四种类型:胶原酶I型,II型,III型和IV型,在应用上有所偏向:

1)胶原酶I(Type I Collagenase):含有比较均匀的各种酶活力(包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性)。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备;

2)胶原酶II(Type II Collagenase):含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备;

3)胶原酶III(Type III Collagenase):含有较低的蛋白酶活性,常用于乳腺细胞的制备;

4)胶原酶IV(Type IV Collagenase):含有低胰酶活性,通常用于胰岛细胞的制备,或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为V型胶原酶,≥125 CDU/mg solid(CDU = collagen digestion units),具有更高的胶原酶活性和酪蛋白酶活性,更低的胰酶水平以降低对细胞膜蛋白的损伤,适用于胰腺小岛细胞和结缔组织细胞的分离。

酶活力单位定义

      在37℃,pH7.5 的条件下,5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输及保存条件

室温运输。4℃避光保存,2年有效。储存液-20℃避光冻存。

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

向每管100 mg的胶原酶中加入100 µL的含Ca2+、Mg2+的HBSS(Hank’s平衡盐溶液,含Ca2+、Mg2+),轻轻旋涡震荡使其充分溶解,制备成1g/mL(即1000×)的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22 μm的滤膜过滤除菌,分装成小份量,然后于-20 °C避光冻存。

使用前于冰上解冻,避免反复冻融。其用于组织和细胞分散的常用浓度为:0.5-2.5 mg/mL,用于软骨消化的常用浓度为1-2 mg/mL,需要根据特定的实验条件或者参考相应的文献资料确定所需的最佳工作浓度。

2.组织的分离

1. 使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块;

2. 利用含Ca2+、Mg2+的HBSS洗涤组织块数次;

3. 加入足量的含Ca2+、Mg2+的HBSS,使其浸没组织块,并加入胶原酶至需要工作浓度;

4. 于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl2补充消化可以提高消化效率。

5. 已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得,收集备用。未解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育;

6. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

7. 细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3. 器官灌注

1. 向37℃预热的含Ca2+、Mg2+的HBSS中加入胶原酶,另添加3 mM的CaCl2有助于提高分离效率;

2. 按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液;

3. 将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛,从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来,未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育;

4. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

5. 细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

注意事项

    1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    2. 本产品主要用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

Collagenase I 胶原酶I型说明书

Collagenase I 胶原酶I型说明书

 

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价格

LS004194-100mg

100mg

520.00

LS004196-1g

1g

3,000.00

LS004197-5g

5g

13,500.00

 

胶原酶(Collagenase)是一种蛋白酶,一种肽链内切酶,能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列(该序列高频率出现在胶原中,很少发现于其他蛋白中)并切割该序列中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽,但胶原酶是一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶,这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

本品来源于溶组织梭菌(Clostridium histolyticum),是一种酶粗提物,不仅含有胶原酶(更准确的称法为梭菌蛋白酶A(clostridiopeptidase A)),能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白,多糖和脂质,使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异,分为四种类型:胶原酶I型,II型,III型和IV型,在应用上有所偏向:

1)胶原酶I(Type I Collagenase):含有比较均匀的各种酶活力(包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性)。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备;

2)胶原酶II(Type II Collagenase):含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备;

3)胶原酶III(Type III Collagenase):含有较低的蛋白酶活性,常用于乳腺细胞的制备;

4)胶原酶IV(Type IV Collagenase):含有低胰酶活性,通常用于胰岛细胞的制备,或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为I型胶原酶,≥125 U/mg solid,可用于上皮、肝、肺、脂肪和肾上腺等组织和细胞的解离。

酶活力单位定义

37℃,pH7.5 的条件下,5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输及保存条件

      室温运输。4℃避光保存,2年有效。储存液-20℃避光冻存。

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

向每管100 mg的胶原酶中加入100 µL的含Ca2+、Mg2+的HBSS(Hank’s平衡盐溶液,含Ca2+、Mg2+),轻轻旋涡震荡使其充分溶解,制备成1g/mL(即1000×)的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22 μm的滤膜过滤除菌,分装成小份量,然后于-20 °C避光冻存。

使用前于冰上解冻,避免反复冻融。其用于组织和细胞分散的常用浓度为:0.5-2.5 mg/mL,用于软骨消化的常用浓度为1-2 mg/mL,需要根据特定的实验条件或者参考相应的文献资料确定所需的最佳工作浓度。

2.组织的分离

1. 使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块;

2. 利用含Ca2+、Mg2+的HBSS洗涤组织块数次;

3. 加入足量的含Ca2+、Mg2+的HBSS,使其浸没组织块,并加入胶原酶至需要工作浓度;

4. 于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl2补充消化可以提高消化效率。

5. 已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得,收集备用。未解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育;

6. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

7. 细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3. 器官灌注

1. 向37℃预热的含Ca2+、Mg2+的HBSS中加入胶原酶,另添加3 mM的CaCl2有助于提高分离效率;

2. 按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液;

3. 将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛,从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来,未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育;

4. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

5. 细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

注意事项

 1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

  2. 本产品主要用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

Collagenase IV胶原酶IV型说明书

Collagenase IV胶原酶IV型说明书

 

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LS004186-100mg

100mg

520.00

LS004188-1g

1g

3,000.00

LS004189-5g

5g

13,500.00

产品描述

胶原酶(Collagenase)是一种蛋白酶,一种肽链内切酶,能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列(该序列高频率出现在胶原中,很少发现于其他蛋白中)并切割该序列中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽,但胶原酶是一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶,这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

本品来源于溶组织梭菌(Clostridium histolyticum),是一种酶粗提物,不仅含有胶原酶(更准确的称法为梭菌蛋白酶A(clostridiopeptidase A)),能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白,多糖和脂质,使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异,分为四种类型:胶原酶I型,II型,III型和IV型,在应用上有所偏向:

1)胶原酶I(Type I Collagenase):含有比较均匀的各种酶活力(包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性)。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备;

2)胶原酶II(Type II Collagenase):含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备;

3)胶原酶III(Type III Collagenase):含有较低的蛋白酶活性,常用于乳腺细胞的制备;

4)胶原酶IV(Type IV Collagenase):含有低胰酶活性,通常用于胰岛细胞的制备,或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为IV型胶原酶,≥125 CDU/mg solid(CDU = collagen digestion units),特别适用于胰岛组织的消化。

酶活力单位定义

37℃,pH7.5 的条件下,5h内水解胶原产生相当于1µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输及保存条件

室温运输。4℃避光保存,2年有效。储存液-20℃避光冻存。

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

向每管100 mg的胶原酶中加入100 µL的含Ca2+、Mg2+的HBSS(Hank’s平衡盐溶液,含Ca2+、Mg2+),轻轻旋涡震荡使其充分溶解,制备成1g/mL(即1000×)的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22 μm的滤膜过滤除菌,分装成小份量,然后于-20 °C避光冻存。

使用前于冰上解冻,避免反复冻融。其用于组织和细胞分散的常用浓度为:0.5-2.5 mg/mL,用于软骨消化的常用浓度为1-2 mg/mL,需要根据特定的实验条件或者参考相应的文献资料确定所需的最佳工作浓度。

2.组织的分离

1. 使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块;

2. 利用含Ca2+、Mg2+的HBSS洗涤组织块数次;

3. 加入足量的含Ca2+、Mg2+的HBSS,使其浸没组织块,并加入胶原酶至需要工作浓度;

4. 于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl2补充消化可以提高消化效率。

5. 已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得,收集备用。未解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育;

6. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

7. 细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3. 器官灌注

1. 向37℃预热的含Ca2+、Mg2+的HBSS中加入胶原酶,另添加3 mM的CaCl2有助于提高分离效率;

2. 按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液;

3. 将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛,从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来,未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育;

4. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

5. 细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

注意事项

       1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 本产品主要用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

Collagenase III 胶原酶III型说明书

Collagenase III 胶原酶III型说明书

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LS004180-100mg

100mg

520

LS004182-1g

1g

3000

LS004183-5g

5g

13500

 

 

产品描述

胶原酶(Collagenase)是一种蛋白酶,一种肽链内切酶,能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列(该序列高频率出现在胶原中,很少发现于其他蛋白中)并切割该序列中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽,但胶原酶是一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶,这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

本品来源于溶组织梭菌(Clostridium histolyticum),是一种酶粗提物,不仅含有胶原酶(更准确的称法为梭菌蛋白酶A(clostridiopeptidase A)),能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白,多糖和脂质,使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异,分为四种类型:胶原酶I型,II型,III型和IV型,在应用上有所偏向:

1)胶原酶I(Type I Collagenase):含有比较均匀的各种酶活力(包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性)。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备;

2)胶原酶II(Type II Collagenase):含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备;

3)胶原酶III(Type III Collagenase):含有较低的蛋白酶活性,常用于乳腺细胞的制备;

4)胶原酶IV(Type IV Collagenase):含有低胰酶活性,通常用于胰岛细胞的制备,或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为III型胶原酶,≥100 U/mg solid,常用于乳腺细胞和胎儿细胞的制备。

酶活力单位定义

37℃,pH7.5 的条件下,5h内水解胶原产生相当于1µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输及保存条件

室温运输。4℃避光保存,2年有效。储存液-20℃避光冻存。

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

向每管100 mg的胶原酶中加入100 µL的含Ca2+、Mg2+的HBSS(Hank’s平衡盐溶液,含Ca2+、Mg2+),轻轻旋涡震荡使其充分溶解,制备成1g/mL(即1000×)的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22 μm的滤膜过滤除菌,分装成小份量,然后于-20 °C避光冻存。

使用前于冰上解冻,避免反复冻融。其用于组织和细胞分散的常用浓度为:0.5-2.5 mg/mL,用于软骨消化的常用浓度为1-2 mg/mL,需要根据特定的实验条件或者参考相应的文献资料确定所需的最佳工作浓度。

2.组织的分离

1. 使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块;

2. 利用含Ca2+、Mg2+的HBSS洗涤组织块数次;

3. 加入足量的含Ca2+、Mg2+的HBSS,使其浸没组织块,并加入胶原酶至需要工作浓度;

4. 于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl2补充消化可以提高消化效率。

5. 已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得,收集备用。未解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育;

6. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

7. 细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3. 器官灌注

1. 向37℃预热的含Ca2+、Mg2+的HBSS中加入胶原酶,另添加3 mM的CaCl2有助于提高分离效率;

2. 按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液;

3. 将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛,从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来,未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育;

4. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

5. 细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

注意事项

    1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    2. 本产品主要用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途

Collagenase II 胶原酶II型说明书

Collagenase II 胶原酶II型说明书

 


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LS004174-100mg

100mg

520

LS004176-1g

1g

3000

LS004177-5g

5g

13500

LS004177-15g

15g

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产品描述

胶原酶(Collagenase)是一种蛋白酶,一种肽链内切酶,能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列(该序列高频率出现在胶原中,很少发现于其他蛋白中)并切割该序列中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽,但胶原酶是一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶,这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

本品来源于溶组织梭菌(Clostridium histolyticum),是一种酶粗提物,不仅含有胶原酶(更准确的称法为梭菌蛋白酶Aclostridiopeptidase A)),能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白,多糖和脂质,使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异,分为四种类型:胶原酶I型,II型,III型和IV型,在应用上有所偏向:

1)胶原酶IType I Collagenase):含有比较均匀的各种酶活力(包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性)。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备;

2)胶原酶IIType II Collagenase):含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备;

3)胶原酶IIIType III Collagenase):含有较低的蛋白酶活性,常用于乳腺细胞的制备;

4)胶原酶IVType IV Collagenase):含有低胰酶活性,通常用于胰岛细胞的制备,或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为II型胶原酶,≥125 U/mg solid,可用于心、甲状腺、唾液腺、肝、骨、软骨等组织和细胞的解离。

酶活力单位定义

37℃,pH7.5 的条件下,5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输及保存条件

室温运输。4℃避光保存,2年有效。储存液-20℃避光冻存。

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

向每管100 mg的胶原酶中加入100 µL的含Ca2+Mg2+HBSSHanks平衡盐溶液,含Ca2+Mg2+),轻轻旋涡震荡使其充分溶解,制备成1g/mL(即1000×)的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22 μm的滤膜过滤除菌,分装成小份量,然后于-20 °C避光冻存。

使用前于冰上解冻,避免反复冻融。其用于组织和细胞分散的常用浓度为:0.5-2.5 mg/mL,用于软骨消化的常用浓度为1-2 mg/mL,需要根据特定的实验条件或者参考相应的文献资料确定所需的最佳工作浓度。

2.组织的分离

1. 使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块;

2. 利用含Ca2+Mg2+HBSS洗涤组织块数次;

3. 加入足量的含Ca2+Mg2+HBSS,使其浸没组织块,并加入胶原酶至需要工作浓度;

4. 37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mMCaCl2补充消化可以提高消化效率。

5. 已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得,收集备用。未全部解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育;

6. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

7. 细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3 器官灌注

1. 37℃预热的含Ca2+Mg2+HBSS中加入胶原酶,另添加3 mMCaCl2有助于提高分离效率;

2. 按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液;

3. 将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛,从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来,未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育;

4. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

5. 细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

注意事项

        1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2. 本产品主要用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。

Collagenase I 胶原酶I型 说明书

Collagenase I 胶原酶I型 说明书

产品货号

货号

规格

价格

LS004194-100mg

100mg

¥520.00

LS004196-1g

1g

¥3,000.00

LS004197-5g

5g

¥13,500.00

 

产品描述

胶原酶(Collagenase)是一种蛋白酶,一种肽链内切酶,能够特异性的识别Pro-X-Gly-Pro序列(该序列高频率出现在胶原中,很少发现于其他蛋白中)并切割该序列中性氨基酸(X)和甘氨酸(Gly)之间的肽键。许多蛋白酶都能水解单链且变性的胶原多肽,但胶原酶是wei一一种可以降解具有三股超螺旋结构的天然胶原纤维的蛋白酶,这种胶原纤维广泛存在结缔组织内。

本品来源于溶组织梭菌(Clostridium histolyticum),是一种酶粗提物,不仅含有胶原酶(更准确的称法为梭菌蛋白酶A(clostridiopeptidase A)),能够降解天然胶原和网状纤维。还含有其他的一些蛋白酶、多糖酶、脂酶等,分别能够有效水解结缔组织和上皮组织细胞外基质内的其他蛋白,多糖和脂质,使得本品非常适用于组织消化。

目前商业化提供的细菌胶原酶主要根据胶原酶活性的差异,分为四种类型:胶原酶I型,II型,III型和IV型,在应用上有所偏向:

1)胶原酶I(Type I Collagenase):含有比较均匀的各种酶活力(包括胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶、胰蛋白酶活性)。通常用作上皮细胞、肝、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的制备;

2)胶原酶II(Type II Collagenase):含有更高的梭菌蛋白酶活性,通常用于心脏、骨、肌肉、胸腺和软骨等组织来源细胞的制备;

3)胶原酶III(Type III Collagenase):含有较低的蛋白酶活性,常用于乳腺细胞的制备;

4)胶原酶IV(Type IV Collagenase):含有低胰酶活性,通常用于胰岛细胞的制备,或者需要维持受体完整性的细胞制备实验。

本品为I型胶原酶,≥125 U/mg solid,可用于上皮、肝、肺、脂肪和肾上腺等组织和细胞的解离。

酶活力单位定义

在37℃,pH7.5 的条件下,5 h内水解胶原产生相当于1 µM L-亮氨酸的酶量定义为1个酶活力单位。

运输及保存条件

      室温运输。4℃避光保存,2年有效。储存液-20℃避光冻存。

使用方法

1. 胶原酶储存液的配制

向每管100 mg的胶原酶中加入100 µL的含Ca2+、Mg2+的HBSS(Hank’s平衡盐溶液,含Ca2+、Mg2+),轻轻旋涡震荡使其充分溶解,制备成1g/mL(即1000×)的储存液。然后用低蛋白结合性的0.22 μm的滤膜过滤除菌,分装成小份量,然后于-20 °C避光冻存。

使用前于冰上解冻,避免反复冻融。其用于组织和细胞分散的常用浓度为:0.5-2.5 mg/mL,用于软骨消化的常用浓度为1-2 mg/mL,需要根据特定的实验条件或者参考相应的文献资料确定所需的最佳工作浓度。

2.组织的分离

1. 使用无菌手术刀或剪刀将组织切成3-4 mm大小的组织块;

2. 利用含Ca2+、Mg2+的HBSS洗涤组织块数次;

3. 加入足量的含Ca2+、Mg2+的HBSS,使其浸没组织块,并加入胶原酶至需要工作浓度;

4. 于37℃孵育4-18 h。消化时使用水平摇床以及用3 mM的CaCl2补充消化可以提高消化效率。

5. 已分散开的细胞可使用不锈钢或尼龙网筛筛得,收集备用。未wan全解离的组织另外添加适量的新鲜胶原酶工作液于37℃继续孵育;

6. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

7. 细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

8. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

3. 器官灌注

1. 向37℃预热的含Ca2+、Mg2+的HBSS中加入胶原酶,另添加3 mM的CaCl2有助于提高分离效率;

2. 按照已优化的速率对相应的器官灌注胶原酶工作液;

3. 将上述过程中回收的灌注液流经不锈钢或尼龙网筛,从而将已解离的细胞或小片段组织块与较大团块分离开来,未充分解离的组织需利用新鲜胶原酶工作液于37℃进一步孵育;

4. 利用不含胶原酶的HBSS洗涤收集的细胞数次;

5. 细胞培养液重悬上述细胞,利用自动细胞计数器或其他方法计算活细胞密度。

6. 于细胞培养皿上利用合适细胞培养基接种细胞。

注意事项

 1. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

  2. 本产品主要用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。