Worthington LS004186 说明书

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Worthington Biochemical公司位于美国东海岸美丽海滨小城Lakewood, 有超过60年的生产经营历史,是世界上zui主要的酶类供应商,酶产品专业厂家。同时,也提供DNa/RNa纯化等分子生物学方面的产品。

 

胶原酶产品信息

资料来源:溶组织梭菌

IUB:3.4.24.3

胶原酶原料认证 

粗胶原酶制剂含有两种不同胶原酶,巯基蛋白酶,clostripain,胰蛋白酶样酶和氨基肽酶的多种同工型。这种胶原蛋白和蛋白水解活性的组合对于分解细胞间基质是组织解离的重要部分是有效的。复合物的一个组分是水解酶,其在Pro-Y-Gly-Pro序列中Y-Gly键优先降解天然胶原中的螺旋区,其中Yzui常见为中性氨基酸。这种裂解产生易于进一步消化肽酶的产物。粗胶原酶被金属螯合剂如半胱氨酸,EDTA或邻菲咯啉而不是DFP抑制。它也被大血浆糖蛋白α2巨球蛋白抑制。酶活性需要Ca 2+。每个胶原酶的特定酶谱与获得研究细胞的组织(或用于细胞的用途)相关联,并且由于相关性,Worthington已经建立了几种类型的原胶原酶:类型1,2,3和4。

• 1型粗胶原酶具有胶原酶,酪蛋白酶,clostripain和胰蛋白酶活性的原始平衡。
• 2型含有较高的相对水平的蛋白酶活性,特别是clostripain。
• 3型含有zui低水平的次级蛋白酶。
• 4型设计为特别低的胰蛋白酶活性,以限制对膜蛋白和受体的损伤。
•纯化胶原酶,代码:CLSPA,含有极少的次要蛋白水解活性以及高胶原酶活性。

 

新! 动物来源的自由类型AFA,AFB和AFC,STZ1和STZ2胶原酶源自在*缺乏动物基组分的培养基中生长的培养物,并且被设计用于必须预防引入潜在的动物来源的病原体的生物处理应用。次级蛋白酶水平与1型和2型胶原酶相似。

•  CLSAFA 是原始的AF*别,设计为胶原酶和次级蛋白酶类似于1型和2型胶原酶。
•  CLSAFB 含有比CLSAFA更高的胶原酶和酪蛋白酶活性。
•  CLSAFC具有类似于4型胶原酶的特异性 低胰蛋白酶活性。
•  STZ1和STZ2,0.22μ过滤的STEMxyme AOF胶原酶/中性蛋白酶(Dispase®)混合物用于原代和干细胞分离。 

 

沃辛顿还提供0.22μm过滤的各种预制包装形式的过滤制剂,用于直接重建和用于细胞分离和培养过程。酶类型与不同组织的有效性之间的相关性一直很好,但不*,部分原因是可变参数的使用。然而,大多数研究人员认为粗胶原酶批次的组织分型是一项有价值的服务。Worthington酶手册中可以找到Worthington胶原酶和污染物测定的详细描述。此外,组织特异性参考和详细的分离条件可以在“ Worthington组织分离指南”中找到。

胶原酶测定是Mandl的修饰,其中胶原酶与天然胶原蛋白孵育5小时,胶原分解的程度使用Moore和Stein JBC,176,367(1948)比色茚胺法测定。释放的氨基酸表达为微摩尔亮氨酸/毫克胶原酶。

用途:粗胶原酶广泛用于酶原初级细胞分离和组织解离过程。大多数研究人员使用粗胶原酶制剂,如1,2,3和4型或色谱纯化的胶原酶(代码:CLSPA); 后者通常与二级酶如弹性蛋白酶,透明质酸酶等组合。为了获得*效果,必须将待分解的组织定制为蛋白水解活性的混合物。不同组织的类型和有效性之间的相关性已经很好,但不,并且可能部分依赖于使用和目标参数以及批次间变化。有关更多信息,请参阅胶原酶采样程序信息。沃辛顿还出版了“ 组织解离指南”,其中提供了有关用于这些应用的酶的更多信息,以及许多细胞和组织类型的具体参考。

单位定义:一个单位在37℃,pH 7.5的5小时内从胶原中释放一微摩尔的L-亮氨酸当量

 

Collagenase, Type 4
Prepared to contain lower tryptic activity levels to limit damage to membrane proteins and receptors but with normal to above normal collagenase activity. Suggested for pancreatic islet primary isolation. A dialyzed, lyophilized powder. 
Store at 2-8癈.
≥160 units per mg dry weight CLS-4 100 mg LS004186
1 gm LS004188
5 gm LS004189
Bulk LS004191