标签归档：聚合酶

bioron 108725说明书

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上海金畔bioron 108725说明书

1、BIORON的一步WGA试剂盒由BIORON GmbH开发和生产，是DOP（退化寡核苷酸PCR）的改进版，具有优化的引物序列和BIORON*的SD聚合酶。这种酶结合了链置换能力和高达92°C的热稳定性。由于这些特点，可以将这种酶用于两种扩增无需额外移液或及时动手的步骤。该试剂盒包含从单细胞或低拷贝模板扩增人类基因组DNA所需的一切。每个试剂盒包含一个2.5x MM（不含酶的主混合物）；10 U/µl SD聚合酶；人类基因组DNA作为阳性对照和PCR级水。
该扩增基于多重置换反应，结合专门设计的针对人类基因组DNA优化的简并引物。BIORON SD聚合酶能够在合成新链的过程中替换先前的链。结合高达92°C的温度稳定性，全基因组扩增分析中的两个常见反应步骤不需要额外的手动时间。这将污染和处理错误的风险降低。
该试剂盒用于低拷贝数基因组DNA的可重复扩增，在约2小时内产生2-10µg产品。

2、在解冻和处理阳性对照品（PC、人类基因组DNA）和样本时避免剪切力。
所需的额外材料
•PCR循环器
•适用于所用PCR循环器的低结合PCR管
•适用于PCR管的密封件或盖子
•带气溶胶屏障的一次性低结合移液管头
•可变容量单通道移液管
•安全层流箱
•符合当地要求的安全设备

3.一步WGA套件的申请
•单细胞DNA分析
•下一代测序（NGS）
•SNP基因分型
•基于qPCR和PCR的突变检测
•STR和RFLP分析
•阵列技术（比较基因组杂交）


4.储存条件和稳定性
试剂盒必须在-20°C下储存，并在有效期前保持稳定。
使用前将2.5x MM（主混合料）、阳性对照品和水解冻。将其保持在4°C，将SD聚合酶保持在-20°C，直到需要，并在冷却架中运输。
请避免2.5x MM反应缓冲液的额外冻融循环。如果需要少量反应，2.5x MM的等分就足够了。只有在遵守存储条件的情况下，本手册中规定的套件*性能保证才有效。


5.质量控制
BIORON一步WGA试剂盒的性能在批次间进行常规监测。


6.反应设置协议
开始前的重要注意事项：
该试剂盒用于扩增已经分离的人类基因组DNA。没有包括提取系统。
样本要求：
•来自1-100个细胞的基因组DNA（例如来自人类细胞的10-1000 pg DNA）
•分类染色体
•来自动物、植物或细菌的完整或片段化单链或双链DNA
来源
•最大样品体积14µl
•细胞染色产生的DNA可能会对试剂盒性能产生负面影响
•必须避免福尔马林固定样本中的DNA，以获得最佳结果

intronbio 25022说明书

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intronbio 25022说明书

i-Taq™ DNA Polymerase

i-Taq™DNA聚合酶

 

 

Cat.No

Capacity

25021

250 unit

25022

500 unit

 

产品信息

描述

高纯度i-Taq™PCR核心试剂盒，无论模板类型和反应条件如何，均可显示稳定，的DNA扩增

  • •94 KDa热稳定DNA聚合酶
  • •高纯度Taq DNA聚合酶
       – 去除大肠杆菌衍生的蛋白质和DNA，可作为PCR来源
  • •适用于从克隆DNA到人类基因组DNA的DNA
  • •缓冲液优化，以显示良聚合酶活性，无论模板类型或反应条件如何

i-Taq™DNA聚合酶是一种94kDa的热稳定DNA聚合酶，通过克隆Thermus aquaticus（菌株YT1）的聚合酶基因在大肠杆菌中表达。它去除了大肠杆菌来源的蛋白质和DNA，它可以作为PCR中的污染物，是稳定有效的DNA扩增产物。基因组DNA，cDNA等可以扩增至5Kb。PCR（聚合酶链反应）是通过特异性重复特定DNA位点的合成来扩增试管中所需DNA分子的方法。结果，可以使用非常少量的DNA合成大量的DNA。当然，它广泛用于基础生物学，医学和生物学领域。我们现在正在简单快捷地扩大其在法医，食品，环境卫生和动植物检验领域的使用范围。58体外-10 倍。扩增的DNA可用于如下的各种实验。根据实验结果，可以应用各种医学研究。在开发该方法的早期，使用大肠杆菌DNA聚合物进行PCR，因此必须在每次变性时补充变性大肠杆菌的DNA聚合酶。然而，通过在PCR中使用从Thermus aquaticus分离的热稳定DNA聚合酶，我们不必每一步都做补充酶的麻烦任务。结果，PCR成为分子生物学*的方法。PCR具有一系列三个步骤并重复30至40次。

PCR的步是DNA的变性，通过加热分离两条DNA链。每个分离的DNA用作模板，变性温度取决于DNA中G + C的量和长度。PCR的第二步是退火。在此阶段，引物与模板DNA结合，退火温度是决定反应准确性的重要因素。如果温度太高，引物将与模板DNA结合得太弱。如果温度太低，可以扩增不需要的DNA，因为引物非特异性结合。PCR的第三步是延伸步骤。在这个阶段，耐热DNA聚合酶将从模板DNA产生新的DNA。i-Taq™DNA聚合酶除高纯度酶外，通过优化缓冲液组合物以显示良聚合酶活性，无论模板类型或模板的一半，都可以获得高度可重复的结果。由于用该酶扩增的大多数产物在3端具有碱基A，因此可以将PCR产物原样克隆到T载体中。它也可以通过用DNA聚合酶如Klenow DNA聚合酶或T4 DNA聚合酶填充它而将其磷酸化成平末端而克隆到平端载体中。

 

应用

  • 01基因组DNA，cDNA扩增至5kb
  • 02T / A克隆或平端克隆

 

套件内容

 

内容 250个单位 500个单位
i-Taq™DNA聚合酶（5U / ml） 250单位×1管 500单位×1管
10×PCR缓冲液（含20 mM MgCl2） 1毫升×1管 1毫升×1管
10×MgCl 2游离PCR缓冲液 1毫升×1管 1毫升×1管
10 mM dNTPs（2.5 mM /每个） 500μl×1管 1毫升×1管
25mM MgCl 22 1毫升×1管 1毫升×1管
手册 1 ea 1 ea

技术数据

灵敏度比较数据（与其他公司比较）

i-Taq TM DNA聚合酶与公司A，B相同功能的DNA聚合酶的灵敏度比较。在该实验中，通过浓缩稀释牛gDNA并用CSF引物扩增。

泳道M，100bp DNA标记; 泳道1,1ng gDNA; 泳道2,100pg gDNA; 泳道3,10pg gDNA; 泳道4,1 gg gDNA; 泳道5,100fg gDNA; 泳道N，阴性对照

批次稳定性数据

确认了每批i-Taq TM DNA聚合酶的灵敏度活性。从连续稀释的SNU-1 cDNA和λDNA中扩增GAPDH（575bp）和1Kb片段以确认灵敏度。使用1单位的i-Taq TM DNA聚合酶扩增总共20ml反应混合物，并通过琼脂糖凝胶电泳分析5ml。

泳道M，100bp DNA标记; 1 Kb DNA标记; 泳道N，阴性对照

genaxxon M3009.0250说明书

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genaxxon M3009.0250说明书

 

SNP聚合酶是一种高选择性的DNA聚合酶变异体。它已被选定用于鉴别程度较高的检测。 例如在等位基因特异性PCRS或甲基化特异性PCRS中。许多dna聚合酶能耐受不匹配的引物-模板复合物，而snp pol dna聚合酶则能有效地鉴别Th。 OSE只在*匹配引物对的情况下产生特定的扩增。这使得SnPol DNA聚合酶在SNP检测、HLA基因分型或单个CpG分析中非常有用。 加注地点。

SNP Pol DNA聚合酶能有效地区分3‘端不匹配的引物.3‘位错配引物是识别SNPs的要求. 如果突变/错配位于引物的另一个位置，SNP POL和SNP PolTaq聚合酶将像“正常”Taq聚合酶一样工作。

该工程聚合酶也可作为SNP PolTaq DNA聚合酶版本，具有5‘-3’-核酸酶活性，因此可用于基于水解探针的检测(Taqman探针，molec)

 

商品概述

浓度：5单位/升

底物类似物：dNTP，ddNTP，荧光dNTP/ddNTP

延伸率：1 kb/min。在72°C

半衰期：20分钟。95°C，60 min。在94°C

5‘-3’外核酶活性：SNP POL聚合酶NO/SNP PolTaq聚合酶YES)

3‘-5’外核酶活性：NO

核酸酶污染：否

蛋白酶污染：否

 

 

单位定义

SNP POL/SNP Poltaq dna-Polymerase的一个单位定义为在72℃下，在72℃下，将10 nmol的dntp酶在30分钟内加入到酸不溶性组分中的酶量。 .

质量管理

PCR活性：SNP POL和SNP PolTaq DNA聚合酶PCR检测HeLa基因组DNA中的基因组SNP(Rs 72921001)。PCR产物随后在 2.5%琼脂糖凝胶。用etSNP溴化Polum染色法在匹配引物的正确扩增长度为109 bp的条件下，观察到一种特异的产物。在不匹配引物的情况下，不生成产物。 在50个周期后可见。

DNA聚合酶活性：用人工DNA模板和DNA引物监测SNP POL和SNP PolTaq DNA聚合酶活性，并将其调整为特定的DNA聚合酶活性。

 

适用，应用，运用

·SNP-等位基因特异性扩增(ASA)/等位基因特异性PCR检测

甲基化特异性PCR(MSP)

·HLA基因分型

·多重PCR

稳定（性），稳固

Genaxxon生物科学SNP POL和SNP PolTaq DNA-聚合酶在湿冰上运输，但在RT(15°C~25°C)下保持活性至少2周。

SNP POL和SNP PolTaq DNA聚合酶(包括缓冲器和试剂)应在收到-20°C时立即储存，在这些条件下储存并正确处理，这些产品可以 保持至少到有效期(见管标签)，而不显示任何性能下降。Genaxxon生物科学SNP POL和SNP Poltaq DNA聚合酶也可在2°C-8保存。 c多3个月。

genaxxon M3009.0250现货

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genaxxon M3009.0250现货

SNP Pol DNA Polymerase

产品信息“SNP Pol DNA聚合酶”

SNP-Pol DNA聚合酶用于简单、可靠和快速的等位基因特异性区分，例如CRISPR/Cas9点突变，用于检测不正确的CRISPR/Cas9产物，或验证测序结果。无论是否存在引物-模板复合体的错配，SNP-Pol DNA聚合酶都具有高度特异性。错配（点突变）必须在引物的3'末端。因此，突变等位基因可以与野生型等位基因准确区分——无需测序，因为聚合酶在不匹配的情况下根本不会扩增。

只需将引物放在假定的点突变上（重要提示：点突变必须在3'端），聚合酶就会以几乎100%的准确率检测到该区域的错配：如果与引物3'端互补的模板碱基显示出突变，而引物没有，则不会发生扩增-在短时间内100%确定！

SNP Pol DNA聚合酶

我们建议设计扩增子长度较短（约60-200bp）的引物以获得最佳结果，但也可以设计较长的扩增子长度。在较长扩增子>500 bp的情况下，可能需要添加额外的镁（+0.5-1.5mM）。

SNP Pol DNA聚合酶（M3009>或M3061>）可与非特异性荧光染料（如Genaxxon's Green DNA Dye>或SybrGreen®）一起用于实时PCR。当使用特定的PCR探针时，只能使用SNP PolTaq DNA聚合酶，因为只有这些聚合酶具有5'-3'的核酸外切酶活性。

使用我们的高质量dNTP作为Set（M3015.4100）>或Mix（M3016.1010）>或我们的DNA Ladders>和我们有利的标准琼脂糖（M3044）>，我们可以为您的PCR提供额外的产品。

SNP-Pol-DNA和SNP-PolDNA聚合酶的应用领域

-点突变的监测、验证和检测

-识别正确或错误的CRISPR/Cas9产品

-测序结果的验证/确认

-突变的量化

bioron 108702说明书

发表于由

bioron 108702说明书

bioron 108702产品描述:

它是一种新型的人工热稳定聚合酶，具有强链置换，但缺乏5-3核酸外切酶活性，它具有高达93C的热稳定性，使用SD聚合酶，可以结合等温扩增和常规PCR的可能性，等温扩增的效率可以通过初始变性步职来提高，以增加单销的可及性，SD聚合酶对高GC含量和因难职标有效，可以进行靶标尺寸高达 30 kb 的长距离 PCR，SD聚合酶可用于各种链置换反应，如LAMP或WGA，等温扩增，PCDR，文库生成和标PCR反应，BIORONs全基因组扩增试剂盒含有SD聚合酶。

SD 聚合酶也可作为 50 Ul 的高浓度变体提供，用于大规模应用，也可作为带抗体的 HotStart 变体提供。

应用:

等温扩增

链位移(LAMP_环介导扩增，WGA- 全基因组扩增，RCA-滚动环扩增，MDA- 多重位移扩增)

多氯二苯乙烯

标准聚合酶链反应

多重聚合酶链反应

长距离 PCR 高达 30 kb

实时荧光定量 PCR (仅使用插层染料)


PAP（KlenTaq-S 测序酶）说明书

发表于由

PAP（KlenTaq-S 测序酶）说明书

产品详情

货号

规格

价格

78BEA10012-250U

250U

￥870.00

78BEA10012-1250U

1250U

￥3500.00

78BEA10012-5000U

5000U

￥11300.00

78BEA10012-12500U

12500U

￥26050.00

产品详情

KlenTaq-S 测序酶是Taq DNA 聚合酶的改造版，为 Taq DNA 聚合酶的大片段，并做了基因突变。本酶具有 5’→3’聚合酶活性，无5’→3’外切酶活性和 3’→5’外切酶活性。相比普通Taq DNA 聚合酶，KlenTaq-S 测序酶具有很强的 ddNTP 的渗入能力，因此其适用于终止法 DNA 测序或焦磷酸解反应 SNP 分析。

本公司 KlenTaq-S 测序酶是重组表达，并经多步纯化制备的重组蛋白。

活性定义

活性单位指在 72℃下， 1×AM PCR Buffer 1，30 min 内将 10 nmole dNTP 掺入酸不溶性物质所需的酶量。

特点

1.尤其适合 ddNTP 等修饰核苷酸的掺入反应

2.相比全长 Taq DNA 聚合酶，本酶比活性有所降低

适用范围

ddNTP 终止法DNA 测序（一代测序）

焦磷酸解反应延伸法 SNP 分析

质量控制

经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。

酶贮存缓冲液

20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5% Nonidet P40, 0.5%Tween20, and 50% glycerol.

应用举例

以下反应举例为 50 μl 标准 PCR 体系，仅供参考。实际 PCR 条件应根据模板、引物、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。

1） 按下表配制反应体系

组份

体积/μl

终浓度

10×AM PCR Buffer 1

5

1×

dNTPs（2.0 mM）

5

0.2 mM

引物 F（10 μM）

1.5

0.3 μM

引物R（10 μM）

1.5

0.3 μM

Template

Varable*

/

KlenTaq-S测序酶（5U/μl）

0.5

2.5U

ddH2O

Varable

/

总体积

50

/

*模板DNA用量参数(50 μl反应体系):

人基因组DNA100-1000 ng ; 微生物基因组DNA 10-100ng；PCR产物 1 ng-10 ng； Plasmid DNA 5-30 ng ; cDNA from RT reaction 1-5 μl 。

2） 按如下条件进行反应，

95℃

2-5 min

95℃

15 sec

25-35 Cycles

55~72℃

20 sec

72℃

1kb/min

72℃

5 min

3） 琼脂糖凝胶电泳检测PCR 产物，或按实验目的进行后续操作。

注意事项

1.PCR 条件和野生型 Taq DNA 聚合酶类似，对特定 DNA 的测序反应可能需要优化。

2.本酶扩增能力较野生型 Taq DNA 聚合酶有所降低，PCR 产量有所降低，不建议用于常规 PCR。

3.不可用于 Taqman 探针法 q-PCR。

浓度

5U/uL

运输与保存

-20℃可保存 2 年，避免反复冻融

热启动直扩型Taq DNA聚合酶(dNTP)说明书

发表于由

热启动直扩型Taq DNA聚合酶(dNTP)说明书

产品详情

货号

规格

价格

78DC10014-250U

250U

￥300.00

78DC10014-250U×5

250U×5

￥1200.00

78DC10014-1250U×4

1250U×4

￥3900.00

78DC10014-2500U×5

2500U×5

￥9000.00

产品详情

本酶为Taq-D DNA聚合酶（KlenTaq1）的热启动型，需95度加热5分钟或98度加热2分钟而激活。Taq-D DNA聚合酶是大肠杆菌重组表达的嗜热细菌Thermus aquaticus来源的外切酶缺失型Taq DNA聚合酶（删除了5’ 外切酶结构域）。该酶具有5’→3’聚合酶活性，无5’→3’外切酶活性和3’→5’外切酶活性。扩增产物具有3'-dA尾巴。不可用于Taqman探针法q-PCR。本酶经基因工程改造，尤其适合于溶解曲线法单核苷酸多态性（SNP）分型。扩增片段的长度可达3 kb。延伸速度为1.0 kb/min（72℃）。

特点

·  本酶为热启动聚合酶，可提高扩增的特异性，减少非特异性扩增和引物二聚体；

·  热稳定性好：95℃下半衰期超过40 min；

·  模板DNA耐受范围广；

·  PCR产物具有3’-dA尾巴，可直接用于T/A克隆；

·  可以掺入dUTP、dITP、荧光标记核苷酸。

·  相比普通Taq DNA 聚合酶，本酶更加适合未处理的血液、组织、唾液等样本的PCR；

浓度

2.5U/μl

活性定义

以大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在72℃、30 min内，将10 nmole脱氧核糖核苷酸掺入到酸不溶物中所需的酶量，定义为一个活性单位（U）。

酶贮存缓冲液

20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5% Nonidet P40, 0.5% Tween 20, and 50% glycerol。

 

 

 

产品包装规格及组成

Component

78DC10013-250u

78DC10013-250U×5

78DC10013-1250U×4

78DC10013-2500U×5

HS Taq-D DNA polymerase（KlenTaq1 dNTP)

250U

250U×5

1250U×4

2500U×5

10×Taq-D Buffer

0.5 ml×1

0.5 ml×5

1.0 ml×10

1.0 ml×25

2 mM dNTPs

0.5 ml×1

0.5 ml×5

1.0 ml×10

1.0 ml×25

运输与保存

-20℃保存 冰袋运输

适用范围

·       溶解曲线法单核苷酸多态性（SNP）分型

·       DNA荧光标记

·       血液、组织样本等直扩PCR

应用举例

以下反应举例为50 μl标准PCR体系， 仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。

组份

体积/μl

终浓度

10×Taq-D Buffer

5

1×

dNTPs（2.0 mM）

5

0.2 mM

引物F（10 μM）

1.5

0.3 μM

引物R（10 μM）

1.5

0.3 μM

Template

Varable*

/

HS Taq-D（2.5U/μl）

1.0

2.5U

ddH2O

Varable

/

总体积

50

/

      *DNA template可参照如下标准（50 μl PCR体系）：

人类基因组DNA 

0.1 μg-1 μg

λDNA 

0.5 ng-5 ng

质粒DNA 

0.01 ng-1 ng

大肠杆菌DNA

10 ng-100 ng

   PCR反应条件

95℃

5 min

95℃

15 sec

55~72℃

20 sec 

30 Cycles

72℃ 

1 min/kb

72℃

5 min

注意事项

·       本酶为热启动聚合酶，需95度加热5分钟或98度加热2分钟而激活；因此有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增和引物二聚体，得到良好的PCR结果。

·       Taq-D DNA聚合酶具有脱氧核苷酸转移酶活性，因此在PCR产物3’末端通常会加上1个多余的腺嘌呤。

· 碱基出错率是指在每个碱基合成过程中所掺入的错误核苷酸数目。Taq-D DNA聚合酶的碱基错误率为1×10-5。

· 对非热启动酶而言，建议在冰上配置PCR 反应液后，再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增，得到良好的PCR结果。

· 如进行PCR扩增后，除目的条带外，还伴随其他杂带，建议适当减少体系中的酶用量，以增加PCR扩增反应的特异性

· 本公司Buffer经大量PCR反应实例优化而成，然而对某些PCR反应存在一个镁离子浓度。若需要优化镁离子浓度，请购买本公司不含镁离子的buffer和MgCl2/MgSO4。

 

      本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。

质量控制

相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶污染。PCR方法检测无宿主残余DNA，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。

室温放置一周，扩增活性无明显改变；但强烈建议不要在室温下长期放置，用毕放回-20度。

ampliqon Taq DNA聚合酶主混合物红色简介

发表于由

ampliqon Taq DNA聚合酶主混合物红色简介

Taq DNA聚合酶Master Mix RED是Taq DNA PCR Master Mix的一种非常流行的替代品，具有相同的优点。惰性红色染料和稳定剂是额外的功能，可以直接加载到琼脂糖凝胶上进行分析。

特征

一体式2x主混音器，方便使用

省时反应设置

直接加载到琼脂糖上

移液管易于可视化

红色跟踪染料

提高再现性

产品产量高

最大处理5 kb

说明

Taq DNA聚合酶主混合物RED是一种即用即用的1.1倍或2倍主混合物。Taq DNA聚合酶Master Mix RED有两种最终MgCl2浓度：1.5 mM和2.0 mM。Taq DNA DNA聚合酶Master Mix RED由Ampliqon Taq DNA多聚酶、NH4+缓冲系统、dNTP和氯化镁组成。

红色追踪染料的前端在0.5-1.5%琼脂糖凝胶上以300-1000 bp运行。

红色跟踪染料和稳定剂不会干扰PCR。如果需要，可以通过旋转柱纯化或其他方法从PCR产物中去除红色染料。此外，使用Taq DNA聚合酶Master Mix RED DNA生成的PCR产物可以在用旋转柱或PureIT ExoZAP PCR CleanUp处理后直接用于测序。

直接凝胶加载

扩增结束后，PCR产物可直接加载到琼脂糖和SDS DNA凝胶上。红色染料提供了移液和凝胶加载的简单可视化。红色染料前沿在0.5-1.5%琼脂糖凝胶上以300-1000 bp运行。

TAQ DNA聚合酶2x主混合红与两个竞争对手的比较

将Taq DNA聚合酶主混合物RED与来自两个竞争对手的Taq DNA PCR主混合物进行比较。评估了四个不同长度的DNA靶标PAH（203bp）、Q8（727bp）、CFTR（613bp）和BAIP（788）。Ampliqon Taq DNA聚合酶Master Mix RED在本研究中表现相同或更好。每次放大都是根据供应商手册进行的。

红色染料没有PCR干扰

红色染料不会干扰PCR性能。两种不同的DNA靶点；PAH（203 bp）和BAIP（788 bp）使用Taq DNA聚合酶2x Master Mix RED进行重复扩增，并在琼脂糖凝胶上进行可视化。

ampliqon代理

直扩型Taq DNA聚合酶(dNTP)说明书

发表于由

直扩型Taq DNA聚合酶(dNTP)说明书

产品详情

货号

规格

价格

78DC10012-500U

500U

￥180.00

78DC10012-500U×5

500U×5

￥720.00

78DC10012-2500U×4

2500U×4

￥2340.00

78DC10012-2500U×10

2500U×10

￥5400.00

产品详情

Taq-D DNA聚合酶（KlenTaq），是大肠杆菌重组表达的嗜热细菌Thermus aquaticus来源的外切酶缺失型Taq DNA聚合酶（删除了5’ 外切酶结构域）。该酶具有5’→3’聚合酶活性，无5’→3’外切酶活性和3’→5’外切酶活性。扩增产物具有3'-dA尾巴。不可用于Taqman探针法q-PCR。本酶经基因工程改造，尤其适合于溶解曲线法单核苷酸多态性（SNP）分型。扩增片段的长度可达3 kb。延伸速度为1.0 kb/ min（72℃）。

特点

· 无外切酶活性，适合于溶解曲线法单核苷酸多态性（SNP）分型；

· 热稳定性好：95℃下半衰期超过40 min；

· 可以掺入dUTP、dITP、荧光标记核苷酸；

· 相比普通Taq DNA 聚合酶，本酶更加适合未处理的血液、组织、唾液等样本的PCR。

浓度

2.5U/μl

活性定义

以大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在72℃、30 min内，将10 nmol脱氧核糖核苷酸掺入到酸不溶物中所需的酶量，定义为一个活性单位（U）。

酶贮存缓冲液

20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5% Nonidet P40, 0.5% Tween 20, and 50% glycerol。

产品包装规格及组成

Component

78DC10012–500u

78DC10012–2500u

78DC10012–10000u

78DC10011–25000U

Taq-D DNA聚合酶

（KlenTaq）

500U

500U×5

2500U×4

2500U×10

10×Taq-D Buffer

1.0 ml×1

1.0 ml×5

5.0 ml×4

5.0 ml×10

2 mM dNTPs

1.0 ml×1

1.0 ml×5

5.0 ml×4

5.0 ml×10

 

运输与保存

-20℃保存 冰袋运输

适用范围

· 溶解曲线法基因分型/SNP测定；

· 菌落PCR；

· TA克隆PCR产物添加3’-dA；

· DNA荧光标记；

· 血液、组织样本等直扩PCR。

应用举例

以下反应举例为50 μl标准PCR体系， 仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。

组份

体积/μl

终浓度

10×Taq-D Buffer

5

1×

dNTPs（2.0 mM）

5

0.2 mM

引物F（10 μM）

1.5

0.3 μM

引物R（10 μM）

1.5

0.3 μM

Template

Varable*

/

Taq-D（2.5U/μl）

1.0

2.5U

ddH2O

Varable

/

总体积

50

/

 

*DNA template可参照如下标准（50 μl PCR体系）：

l 人类基因组DNA 

0.1 μg-1 μg

l λDNA 

0.5 ng-5 ng

l 质粒DNA 

0.01 ng-1 ng

l 大肠杆菌DNA

10 ng-100 ng

PCR反应条件

95℃

5 min

95℃

15 sec

55~72℃

20 sec 

30 Cycles

72℃ 

1-2 kb/min

72℃

5 min

注意事项

· 不可用于Taqman探针法q-PCR。

· 碱基出错率是指在每个碱基合成过程中所掺入的错误核苷酸数目。Taq-D DNA聚合酶的碱基错误率为1×10-5。

· 建议在冰上配置PCR 反应液后，再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增，得到良好的PCR结果。

· 如进行PCR扩增后，除目的条带外，还伴随其他杂带，建议适当减少体系中的酶用量，以增加PCR扩增反应的特异性。

· 本公司Buffer经大量PCR反应实例优化而成，然而对某些PCR反应存在一个镁离子浓度。若需要优化镁离子浓度，请购买本公司不含镁离子的buffer和MgCl2/MgSO4。

·  本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。

质量控制

相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶污染。PCR方法检测无宿主残余DNA，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。

室温放置一周，扩增活性无明显改变；但强烈建议不要在室温下长期放置，用毕放回-20度。

 

直扩型Taq DNA聚合酶说明书

发表于由

直扩型Taq DNA聚合酶说明书

产品详情

货号

规格

价格

78DC10011-500U

500U

￥200.00

78DC10011-500U×5

500U×5

￥800.00

78DC10011-2500U×4

2500U×4

￥2550.00

78DC10011-2500U×10

2500U×10

￥5900.00

产品详情

Taq-D DNA聚合酶（KlenTaq），是大肠杆菌重组表达的嗜热细菌Thermus aquaticus来源的外切酶缺失型Taq DNA聚合酶（删除了5’ 外切酶结构域）。该酶具有5’→3’聚合酶活性，无5’→3’外切酶活性和3’→5’外切酶活性。扩增产物具有3'-dA尾巴。不可用于Taqman探针法q-PCR。本酶经基因工程改造，尤其适合于溶解曲线法单核苷酸多态性（SNP）分型。扩增片段的长度可达3 kb。延伸速度为1.0 kb/ min（72℃）。

特点

· 无外切酶活性，适合于溶解曲线法单核苷酸多态性（SNP）分型；

· 热稳定性好：95℃下半衰期超过40 min；

· 可以掺入dUTP、dITP、荧光标记核苷酸；

· 相比普通Taq DNA 聚合酶，本酶更加适合未处理的血液、组织、唾液等样本的PCR。

浓度

2.5U/μl

活性定义

以大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在72℃、30 min内，将10 nmol脱氧核糖核苷酸掺入到酸不溶物中所需的酶量，定义为一个活性单位（U）。

酶贮存缓冲液

20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5% Nonidet P40, 0.5% Tween 20, and 50% glycerol。

产品包装规格及组成

Component

78DC10011–500u

 

 

78DC10011–2500u

 

78DC10011–10000u

 

78DC10011–25000U

Taq-D DNA聚合酶

（KlenTaq）

500U

500U×5

2500U×4

2500U×10

10×Taq-D Buffer

1.0 ml×1

1.0 ml×5

5.0 ml×4

5.0 ml×10

运输与保存

-20℃保存 冰袋运输

适用范围

· 溶解曲线法基因分型/SNP测定；

· 菌落PCR；

· TA克隆PCR产物添加3’-dA；

· DNA荧光标记；

· 血液、组织样本等直扩PCR。

应用举例

以下反应举例为50 μl标准PCR体系， 仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。

组份

体积/μl

终浓度

10×Taq-D Buffer

5

1×

dNTPs（2.0 mM）

5

0.2 mM

引物F（10 μM）

1.5

0.3 μM

引物R（10 μM）

1.5

0.3 μM

Template

Varable*

/

Taq-D（2.5U/μl）

1.0

2.5U

ddH2O

Varable

/

总体积

50

/

 

*DNA template可参照如下标准（50 μl PCR体系）：

l 人类基因组DNA 

0.1 μg-1 μg

l λDNA 

0.5 ng-5 ng

l 质粒DNA 

0.01 ng-1 ng

l 大肠杆菌DNA

10 ng-100 ng

PCR反应条件

95℃

5 min

95℃

15 sec

55~72℃

20 sec 

30 Cycles

72℃ 

1-2 kb/min

72℃

5 min

注意事项

· 不可用于Taqman探针法q-PCR。

· 碱基出错率是指在每个碱基合成过程中所掺入的错误核苷酸数目。Taq-D DNA聚合酶的碱基错误率为1×10-5。

· 建议在冰上配置PCR 反应液后，再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增，得到良好的PCR结果。

· 如进行PCR扩增后，除目的条带外，还伴随其他杂带，建议适当减少体系中的酶用量，以增加PCR扩增反应的特异性。

· 本公司Buffer经大量PCR反应实例优化而成，然而对某些PCR反应存在一个镁离子浓度。若需要优化镁离子浓度，请购买本公司不含镁离子的buffer和MgCl2/MgSO4。

·  本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。

质量控制

相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶污染。PCR方法检测无宿主残余DNA，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。

室温放置一周，扩增活性无明显改变；但强烈建议不要在室温下长期放置，用毕放回-20度。