creativemolecules DSS-H12/D12 说明书

DSS-H12/D12

= H-DSS-H12 X = D-DSS-D12产品信息DSS-H12/D12二琥珀酰亚胺基亚丁酸酯12 x 1 mg的1:1摩尔比混合物（DSS-H12和DSS-D12

目录号：编号：creativemolecules 001S

分子式：C16H20N2O8/C16D12H8N2O8

分子量：368/380特征：同位素编码。
膜渗透性。
用于死端交联的240/252铵离子。
DSS-H12/D12是一种膜渗透性、同双功能、同位素编码的交联剂二琥珀酰亚胺基丁二酸酯。试剂的轻(H12)和重(D12)形式的区别在于重形式的12个氘原子，而不是轻形式的12个氢原子，否则在化学上是相同的。同位素编码能够在质谱中明确检测交联产物。
DSS-H12/D12的反应产物将在质谱中表现为强度相等的双峰，对应于试剂的轻(H12)和重(D12)形式，以12.07573 Da除以电荷状态（+ 1为12.07，+ 2为6.04，+ 3为4.03等）。
在pH 7-9缓冲液中，N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)酯主要与伯氨基(-NH2)反应，形成稳定的酰胺键。因此，交联反应应避免使用含胺的缓冲液（Tris、甘氨酸、铵盐等）。
DSS不溶于水，应在有机溶剂（如DMSO或DMF）中制备贮备液，然后加入水性反应混合物中。为制备50 mM DSS-H12/D12储备液，向含有1 mg试剂的预称重管中加入53 μL DMSO。

使用以下公式计算肽交联质量：[M12 + H]+ =[M1 + H]+ +[M2 + H]+ + 137.06025[M1OH + H]+ =[M1 + H]+ + 156.07864[M1i + H]+ =[M1 + H]+ + + 138.06808[M1NH2 + H]+ =[M1 + H]+ + + 155.09462，其中M1、M2-游离肽质量；M12-肽间交联质量；M1OH-死端交联质量；M1i–肽内交联的质量；M1NH2–死端酰胺的质量（如果用铵盐淬灭反应）。
MS-Bridge）桥元素组成：C8 H10 O2；–OH死角的修饰元素组成：C8 H12 O3；–NH2死角的修饰元素组成：C8 H13 O2 N。
FLAG(DYKDDDDK)肽测试反应的典型MALDI质谱图如图1所示。试剂的轻(H12)形式的反应产物的质量为：1013–无FLAG肽；1151–肽内交联；1169–死端交联；2163–肽间交联。
MSMS光谱中对应于试剂赖氨酸铵离子修饰的240/252双峰信号表明存在–OH死端交联（参考文献1）。1、2）、（图2）。