货号:P7600L
品名:EnzScript™ (MMLV Reverse Transcriptase RNase H-)(MMLV逆转录酶RNase H-)
产品描述:
EnzScript™(M-MLV Reverse Transcriptase RNase H minus)是一种RNA依赖性DNA聚合酶,不具有可检测的RNase H活性。EnzScript™可用于从polyA mRNA或总RNA中产生*链cDNA,用于下游应用,如RT-PCR,cDNA克隆或RNA-Seq的文库构建。RNase H结构域中的点突变增加了酶的热稳定性,并支持比野生型M-MLV逆转录酶(1)更高的全长转录产物的cDNA产量。
规格:
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10,000 U
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浓度:
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200,000 U/mL
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纯度(SDS-PAGE)
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> 99%
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活性:
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≥ 280,000 U/mg
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SS核酸外切酶
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2000U <5.0%
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DS核酸外切酶
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2000U <1.0%
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DS内切核酸酶
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2000U = no conversion
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大肠杆菌 DNA污染
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2000U <10 copies
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RNAse污染
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2000U=没有可检测到的非特异性RNA酶
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功能性RT-PCR分析
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9.4kb cDNA转录物的合成
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蛋白质来源
携带Moloney-Murine白血病病毒逆转录酶基因的重组大肠杆菌菌株,在RNase H结构域中具有3个点突变,消除了可检测的RNase H活性。
提供:
20 mM Tris-HCl,
100 mM NaCl,
0.1 mM EDTA ,
1 mM DTT,
0.01% NP-40 Alternative,
50% glycerol,
pH 7.5 @ 25°C.
随附:
5X M-MLV Reverse Transcriptase RNAse H- Reaction Buffer (B7601) and 100mM DTT (B9060)
单位定义
1单位定义为使用poly r(A)/ oligo(dT)作为底物,在37℃下10分钟内将1 nmol dTTP掺入酸不溶物质所需的酶量。
分子量
75,938Da
试剂盒组成:
描述
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货号
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EnzScript™
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P7600
|
5X M-MLV Reverse Transcriptase RNase H- Buffer
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B7601
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100 mM DTT
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B9060
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聚合酶属性
分子量:75.9kDa
*延伸温度:42℃
RNA酶H活性:未检测到
单位浓度:200U /μl
转录物长度:12.3 kB
常见应用
EnzScript™(M-MLV Reverse Transcriptase RNase H minus)是RNA-依赖性DNA聚合酶,通常用于合成用于RT-PCR扩增,cDNA克隆或RNASeq的First-Strand cDNA。与标准M-MLV RT相比,降低的RNA酶H活性使得全长cDNA转录物产量更高(> 5kb)并且热稳定性更高。
*链反应方案
建立*链反应,如使用不含核酸酶的水,RNase抑制剂,无RNA酶的试管和带过滤器的无菌移液吸头时,应采取防止RNA酶降解模板RNA的一般预防措施。以下程序可用作制备20μlFirst-Strand cDNA反应的指导原则。
材料:
•无菌,无核酸酶水
•引物(oligo dT (15-20) 或 随机六聚体 或 基因特异性)
•dNTP混合物(dATP,dCTP,dGTP,dTTP)
•RNA模板
•RNA酶抑制剂
过程 :
1、将以下组分添加到冰上的不含RNase的微量离心管中。对于多个反应,准备一个mastermix。
产品
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量
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50μM寡聚dT(15-20)或50μM随机六聚体或10μM基因特异性引物
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1至2μl
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5mM dNTP混合物
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2μl
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RNA模板*( 1 ng至1μg总RNA 或 1至250 ng mRNA)
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Xμl
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无菌,无核酸的水
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到12ul
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2. 将微量离心管加热至65℃5分钟,并在冰上快速冷却2分钟以将引物退火至RNA模板。短暂旋管以收集冷凝物。
3. 将以下组分(每个*链反应)添加到冰上的微量离心管中:
产品
|
量
|
5X M-MLV逆转录酶RNase H-缓冲液
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4ul
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100mM DTT
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2μl
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核糖核酸酶抑制剂(可选)或无核酸酶水
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1μl
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200 U EnzScript™
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1μl
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4.按照以下步骤孵育每个20μl*链反应:
1)25℃2分钟(oligo dT(15-20),基因特异性引物)或25℃10分钟(随机六聚体)
2) 42℃30-60分钟
3)在70°C热杀15分钟
5.在下游应用中使用cDNA或在-20°C保存。对于RT-PCR,通常将1至2μl来自First-Strand反应的cDNA作为模板添加到PCR中。可选:在PCR之前去除RNA链,向cDNA:RNA杂交体中加入1μlRNA酶H(5U),在37℃孵育20分钟和65℃孵育10分钟(热杀灭)。RNase H治疗推荐用于扩增长扩增子(> 5 kB)。
部分产品信息:
货号
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品名
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规格
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浓度
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品牌
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N2070-10-L
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ATP Solution
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50 µmol
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10 mM
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Enzymatics
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N2050-10-L
|
10 mM dNTP Solution Mix
|
100 µmol
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10 mM
|
Enzymatics
|
N2010L
|
100 mM 75µmol dNTP Solution Set
|
75 µmol
|
100 mM
|
Enzymatics
|
N2010-A-L
|
100 mM dATP Solution
|
75 µmol
|
100 mM
|
Enzymatics
|
N2050L
|
100µmol dNTP Solution Mix
|
100 µmol
|
25 mM
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Enzymatics
|
Y9180L
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10x Uracil Cleavage System
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750 Reactions
|
N/A
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Enzymatics
|
P7670
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2x HiFi PCR Master Mix
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1 rxn
|
2x
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Enzymatics
|
Y9420L
|
5x ER/A-Tailing Enzyme Mix
|
24 reactions
|
N/A
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Enzymatics
|
Y9380L
|
E. coli Pyrophosphatase
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50 U
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100 U/mL
|
Enzymatics
|
Y9030L
|
E. coli Single-Stranded DNA Binding Protein
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1.5 mg
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2.75 mg/ml
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Enzymatics
|
Y9140-HC-L
|
End-Repair Mix (High Concentration)
|
75 Reactions
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1 Rxn/µL
|
Enzymatics
|
Y9140-LC-L
|
End-Repair Mix (Low Concentration)
|
200 Reactions
|
1 Rxn/µL
|
Enzymatics
|
Y9080L
|
Endonuclease VIII
|
10,000 U
|
10,000 U/ml
|
Enzymatics
|
P7600L
|
EnzScript™ (MMLV Reverse Transcriptase RNase H-)
|
10,000 U
|
200,000 U/mL
|
Enzymatics
|
X8010L
|
Exonuclease I
|
30,000 U
|
20,000 U/ml
|
Enzymatics
|
X8020L
|
Exonuclease III
|
50,000 U
|
100,000 U/ml
|
Enzymatics
|
P7010-HC-L
|
Klenow (3′→ 5′ exo-) (High Concentration)
|
10,000 U
|
50,000 U/ml
|
Enzymatics
|
P7010-LC-L
|
Klenow (3′→ 5′ exo-) (Low Concentration)
|
10,000 U
|
5,000 U/ml
|
Enzymatics
|
P7060L
|
Klenow Fragment
|
2,500 U
|
5,000 U/ml
|
Enzymatics
|
X8030L
|
Lambda Exonuclease
|
10,000 U
|
5,000 U/ml
|
Enzymatics
|
P7040L
|
M-MuLV Reverse Transcriptase
|
100,000 U
|
200,000 U/ml
|
Enzymatics
|
P7090L
|
Mako DNA Polymerase (3′→ 5′ exo-)
|
3,000 U
|
30,000 U/ml
|
Enzymatics
|
P7140-HC-L
|
Manta 1.0 DNA Polymerase (High Concentration)
|
100,000 U
|
400,000 U/ml
|
Enzymatics
|
P7140-LC-L
|
Manta 1.0 DNA Polymerase (Low Concentration)
|
100,000 U
|
40,000 U/ml
|
Enzymatics
|
P7610L
|
NGS Library Prep: 2X VeraSeq™ PCR Mix – 250 Reactions
|
250 Reactions
|
2X
|
Enzymatics
|
P7590L
|
Phoenix™ Hot Start Taq DNA Polymerase
|
500 U
|
5,000 U/ml
|
Enzymatics
|
P7460L
|
Poly(A) Polymerase
|
1,000 U
|
5,000 U/mL
|
Enzymatics
|
Y9260L
|
RecA
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1.5 mg
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2.0 mg/mL
|
Enzymatics
|
Y9220L
|
RNAse H
|
5,000 U
|
5,000 U/ml
|
Enzymatics
|
Y9240L
|
RNAse Inhibitor
|
20,000 U
|
40,000 U/ml
|
Enzymatics
|
L6010L
|
T3 DNA Ligase
|
900,000 U
|
3,000,000 U/ml
|
Enzymatics
|
L6030-LC-L
|
T4 DNA Ligase
|
150,000 U
|
120,000 U/ml
|
Enzymatics
|
L6030-HC-L
|
T4 DNA Ligase (Rapid)
|
240,000 U
|
600,000 U/ml
|
Enzymatics
|
P7080L
|
T4 DNA Polymerase
|
2,000 U
|
3,000 U/ml
|
Enzymatics
|
Y9130L
|
T4 Gene 32 Protein
|
1.0 mg
|
10 mg/mL
|
Enzymatics
|
Y9040L
|
T4 Polynucleotide Kinase
|
10,000 U
|
10,000 U/ml
|
Enzymatics
|
L6050L
|
T4 RNA Ligase 1
|
10,000 U
|
20,000 U/ml
|
Enzymatics
|
L6080L
|
T4 RNA Ligase 2
|
4,500 U
|
30,000 U/ml
|
Enzymatics
|
L6070L
|
T4 RNA Ligase 2 Truncated
|
500 U
|
5,000 U/ml
|
Enzymatics
|
L6020L
|
T7 DNA Ligase
|
900,000 U
|
3,000,000 U/ml
|
Enzymatics
|
P7260L
|
T7 DNA Polymerase
|
3,500 U
|
10,000 U/ml
|
Enzymatics
|
P7180L
|
T7 RNA Polymerase
|
50,000 U
|
50,000 U/ml
|
Enzymatics
|
L6060L
|
Taq DNA Ligase
|
20,000 U
|
40,000 U/ml
|
Enzymatics
|
P7110L
|
Taq DSC 2.0 DNA Polymerase
|
1,250 U
|
5,000 U/ml
|
Enzymatics
|
P7250L
|
Taq-B DNA Polymerase
|
10,000 U
|
5,000 U/ml
|
Enzymatics
|
P7620L
|
TaqIT
|
5,000 U
|
50,000 U/mL
|
Enzymatics
|
P7070L
|
Terminal deoxynucleotidyl Transferase (TdT)
|
6,000 U
|
20,000 U/ml
|
Enzymatics
|
G5020L
|
Thermolabile UDG
|
500 U
|
1,000 U/ml
|
Enzymatics
|
Y9370L
|
Thermostable Pyrophosphatase
|
1,250 U
|
2,000 U/ml
|
Enzymatics
|
G5010L
|
Uracil DNA Glycosylase
|
10,000 U
|
2,000 U/ml
|
Enzymatics
|
P7511L
|
VeraSeq™ 2.0 High-Fidelity DNA Polymerase
|
500 U
|
2,000 U/ml
|
Enzymatics
|
P7520L
|
VeraSeq™ ULtra DNA Polymerase
|
500 U
|
2,000 U/ml
|
Enzymatics
|
L6030-W-L
|
WGS Ligase
|
24 Reactions
|
N/A
|
Enzymatics
|
P7640L
|
ZipScript™ One-Step RT-qPCR Kit
|
1000 Reactions
|
N/A
|
Enzymatics
|
P7020-HC-L
|
φ29 DNA Polymerase (High Concentration)
|
2,000 U
|
100,000 U/ml
|
Enzymatics
|
P7020-LC-L
|
φ29 DNA Polymerase (Low Concentration)
|
2,000 U
|
10,000 U/ml
|
Enzymatics
|
世界*实验材料供应商 Enzymatics正式上海金畔为其中国代理, Enzymatics在一直是行业的*,一直为广大科研客户提供zui为的产品和服务,上海金畔一直秉承为中国科研客户带来的产品,的服务, Enzymatics就是为了给广大科研客户带来更加完善的产品和服务,您的满意将是我们zui大的收获
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Enzymatics公司建立于2006年,专门从事开发、制造和分销酶产品,致力于酶产品研发,为市场带来了特殊的、高品质的产品。 Enzymatics公司建立了严格完整的操作体系,通过了ISO13485:2003和9001:2000体系标准认证,并符合FDA 21 CFR.820质量系统法规中对于常规用途试剂的生产规范。同时Enzymatics的生产能力被许多FDA认证的医疗设备制造商以及的ISO认证机构TüV SüD 认可。