重组赖氨酰内肽酶RLys-C

重组赖氨酰内肽酶RLys-C

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重组赖氨酰内肽酶RLys-C重组赖氨酰内肽酶RLys-C

重组赖氨酰内肽酶RLys-C



◆概述


赖氨酰内肽酶最早从土壤细菌无色杆菌Achromobacter lyticus中分离得到,能够特异性识别与切割肽链中Lys羧基端肽键,常被用于蛋白测序及Lys-X化合物的酶催化合成。

艾美迪选用Achromobacter lyticus来源的,克服大肠杆菌重组表达技术难题进行制备。本品最适pH 9.0~9.5,等电点为pH 6.9~7.0;最适反应温度30~37℃,50℃以上稳定性下降。在适宜温度下,该酶稳定性良好,在4 mol/L尿素或0.2%SDS溶液中30℃孵育6 hr后,生物活性未发生降低。可广泛用于蛋白组学分析,蛋白、抗体类药物质量检测,多肽、蛋白类产品制备工艺中。

 


◆特性


● 高比活性,高特异性,可消化难以酶切的位点,空间构象复杂或疏水性较强的蛋白(如膜蛋白)同样适用

● 活性稳定,尿素、乙腈等变性剂耐受能力强

● 批量化生产,连续批次质量稳定,批间差小

● 高纯度,重组表达避免了可能存在的杂酶残留(e.g. Arg-C,Lys-N等)



◆来源


重组 E. coli 菌株,其克隆有来自的无色杆菌(A. lyticus蛋白酶I基因。

 


◆酶活定义


0.2 mol/L pH 9.0Tris-HCl缓冲中,温度为37±2℃的条件下, 1 min催化底物AC-Lys-PNA生成1 μmol PNA所需的酶量为一个活性单位(AU)。

 


◆纯度


将 rLys-C以DTT 还原处理后, 还原电泳显示纯度>99%


重组赖氨酰内肽酶RLys-C

◆使用方法


本品为冻干粉,使用前先使用超纯水或25 mmol/L Tris-HCl,pH 8.0~8.5溶解。



◆应用实例


RLys-C酶切重组人门冬胰岛素原(Pro-Insulin-Aspart)

底物Pro-Insulin-Aspart分子量约为7 kDa,含有3个赖氨酸(K),采用 Lys-C 酶切的理论肽段示意图如下:


重组赖氨酰内肽酶RLys-C

酶切条件酶与底物的质量比为 1:10000,在50 mM Tris-HCl,pH 8.5中37℃酶切16 小时。


重组赖氨酰内肽酶RLys-C


峰 A:酶切前肽段 Pro-Insulin-Aspart

峰 B:酶切后 B链+C肽+A链(去引导肽)

峰 C:酶切后B链+A链(去引导肽和C肽)



名称 

RT 

Area 

Area% 

质谱量 

酶切位点 

对应肽段

Pro-Insulin-Aspart
    未酶切对照 

10.45

155.045

100%

7096.94

酶切前

以IMD-RLys-C-酶切产物
(酶:底物1:10000)

11.57

201.6

100%

5724.54

B链+A链

以其他公司重组Lys-C酶产物
(酶:底物1:10000)

10.49

146.9

61.78%

7096.94

酶切前

10.62

81.5

34.29%

6006.84

① 

B链+C肽+A链

艾美迪的 RLys-C 酶切产物为切除引导肽和 C 肽的门冬胰岛素前体,酶切位点①②③均酶切完全。

而其他公司产品仅部分切开酶切位点①,切除效率仅为34.29%,酶切位点②③均未被酶切,未能得到序列正确的门冬胰岛素前体。

◆与其他公司产品对比


底物 

酶切位点对比 

艾美迪 

其他公司重组Lys-C

重组人门冬胰岛素原

(Pro-Insulin Aspart)

分子量约为7 kDa,含有3个K

①PK

++ 

+

②DK

++ 

③GK

++ 

重组人普通胰岛素原

(Pro-Insulin)

分子量约为7 kDa,含有3个K

①PK 

++ 

+

②PK 

++ 

+

②AK 

++ 

+

PJ-10S小肽
分子量约为1 kDa,含有3个K

①DK 

++ 

+


相同底物浓度的酶切条件下艾美迪的 RLys-C 的酶切效率显著高于其他品牌同类产品。以生成的肽段 YDDDDK 计算,艾美迪的RLys-C 的酶切率比其他品牌同类产品高约9倍;以生成的肽段 RGWK 计算,艾美迪的RLys-C的酶切效率比其他品牌同类产品高约8.6倍。



◆产品信息

产品编号 产品名称 规格
RLYS-C0401

RLys-C

重组赖氨酰内肽酶

20 μg
RLYS-C0403

RLys-C

重组赖氨酰内肽酶

1 mg



◆相关产品


产品编号 产品名称 规格
RME0101

    Lys-C + Trypsin

重组赖氨酰内肽酶/重组胰蛋白酶混合装

20 μg
RME0102

Lys-C + Trypsin

重组赖氨酰内肽酶/重组胰蛋白酶混合装

20 μg×5

产品编号 产品名称 规格 储存条件 其他
IRLys-C0401 immobilized RLys-C
固定化重组赖氨酰内肽酶
1.0 mL -15℃以下 1.0 mL含1.0 mg
MDRK0401 RLys-C ELISA Kit
重组赖氨酰内肽酶检测试剂盒
96孔 -15℃以下

检测范围:

1.0~4000 ng/mL


※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。


点击此处下载产品宣传页

microcollections L2000说明书

microcollections L2000说明书

L2000

N-棕榈酰-S-[2,3-双(棕榈酰氧基)-(2RS)-丙基]-(R)-半胱氨酰-(S)-丝氨酸-(S)-赖氨酰-(S)-赖氨酰-(S)-赖氨酰-(S)-赖氨酸 x 3HCl

Pam3Cys-Ser-(Lys) 4 x 3 HCl、Pam3Cys-SK4 x 3 HCl、P3CSK4 x 3 HCl

112208-00-1

1509.6 109.5/C81H156N10O13S

L16

1 mg

CH3 (CH2) 14 O CH2

脂肽是天然免疫和获得性免疫基础研究的有价值的工具。合成脂肽 Pam3Cys-SKKKK 被描述为通过

S-K-K-K-K

TLR1/TLR2 异源二聚体,涉及下游 NF-

B 活化和细胞因子释放。近,还描述了脂肽与 TLR10 的相互作用。Pam3Cys-SKKKK 是基于细菌脂蛋白 N 末端的结构,也是*的强效免疫佐剂。

TLR1/TLR2 异二聚体的晶体结构与

已解析了合成配体 R-Pam3Cys-SKKKK(RR-立体异构体,产品代码 L2048)。

脂肽以冻干、无色粉末形式提供,无任何添加剂。可在室温下运输,冻干粉应在 4 ℃ 下储存。Pam3Cys-SKKKK 可在无内毒素水中复溶(1 mg/mL 贮备液)。通过使用匀浆器或超声仪,可制备均匀溶液或乳剂。如果您使用超声波浴,请注意小瓶标签。

对于进一步稀释,可使用水、盐水、缓冲液 (pH 7.4) 或培养基。根据体外试验的灵敏度,通过 TLR1/TLR2 异源二聚体特异性刺激先天性免疫的推荐工作浓度为 10–100 nM (0.015–0.15µg/ml)。

复溶后,应将溶液等分并储存在-20 ℃ 或更低温度下。应避免重复解冻和冷冻。

Pam3Cys-SKKKK 有 3 种包装规格:1 mg、2 mg 和 5 mg。

此外,经-辐照灭菌的 Pam3Cys-SKKKK 的可用量为 1 mg(产品代码 L2000s)。

任何脂肽产品的安全处理均应采用良好的实验室技术。如果您没有经过全面培训或不了解所涉及的危害,请勿使用该化合物!

注意:请勿内服!避免接触所有暴露方式。穿戴适当的实验室服装,包括实验服、手套和护目镜。请勿使用口吸管、吸入、摄入或接触开放性伤口。*清洗与产品接触的身体任何部位。当与任何注射装置一起操作时,通过极其小心避免意外的自体接种。

本产品仅供有资质的人员用于研究目的。预期不用于人体或作为诊断试剂。EMC microcollections GmbH 对误用或操作本产品造成的任何损害不承担任何责任。

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R. Zaru 等人(2007) MAPK 激活的激酶 Rsk 控制树突状细胞中的急性 Toll 样受体信号反应,并通过两种不同的途径激活。国家免疫8,1227.

A. Mansell 等人(2006) 细胞因子信号传导抑制因子 1 通过介导 Mal 降解负性调节 Toll 样受体信号。国家免疫7,148.

H. Slevogt 等人等人(2008) CEACAM1 抑制 Toll 样受体

wako 125-05061赖氨酰肽链内切酶现货说明书

上海金畔wako 125-05061赖氨酰肽链内切酶现货说明书

wako 125-05061赖氨酰肽链内切酶 Lysyl Endopeptidase 
【产品详情】
赖氨酰肽链内切酶
品牌:WAKO 和光
级别:质谱级

英文品名:Lysyl Endopeptidase?, Mass Spectrometry Grade
货号:125-05061
规格:5×20 μg
应用:蛋白质组学。
用途:赖氨酰肽链内切酶,蛋白测序、质谱分析,多肽合成

【实验原理】
赖氨酰肽链内切酶是质谱分析前处理时常用的蛋白分解酶即赖氨酰肽链内切酶,赖氨酰肽链内切酶可以特异性切除赖氨酸基团C 末端的多肽,赖氨酰肽链内切酶可用于蛋白测序分析和Lys-X 化合物的酶合成。
若同时使用赖氨酰肽链内切酶和胰酶,可更好地切断赖氨酸基团的多肽,增加多肽的数量。赖氨酰肽链内切酶已按照使用习惯做成小包装,是方便使用赖氨酰肽链内切酶的冷冻干燥品。

【产品特点】
赖氨酰肽链内切酶Lysyl Endopeptidase 125-05061 wako
1)赖氨酰肽链内切酶用于蛋白质谱分析:高特异性、高蛋白质消化率;
2)赖氨酰肽链内切酶能增加肽段数量、提高裂解效率;
3)赖氨酰肽链内切酶独立包装,20 μg/一支

【结果】表明Lep 酶解的错误裂解率低。
Tp 酶解时加入Lep 后,错误裂解率有所降低,同时,赖氨酰肽链内切酶可以鉴定出更多的多肽。

Tp Lep Lep +Tp
裂解位点 精氨酸和赖氨酸的C 端 赖氨酸的C端 精氨酸和赖氨酸的C端
错误裂解率( 错误裂解所占比例) 多(8 %) 很少(0 %) 少(3 %)
鉴定出的多肽数量 17 19 22

赖氨酰肽链内切酶Lysyl Endopeptidase 125-05061 wako
Lep+Tp 赖氨酰肽链内切酶切后,可以在m/z=2000 时得到吸收峰,而单独的Tp 酶切在m/z=2000 时没有吸收峰。该结果表明Lep 可以提高测序覆盖度。
赖氨酰肽链内切酶Lysyl Endopeptidase 125-05061 wako

 

WAKO部分产品清单:

 

货号   品名     规格  Cas

012-01965   Alminium Oxide   500g     –

012-08643   Amino Acids Mixture Standard Solution, Type B 1mL×5A –

013-08391   Amino Acids Mixture Standard Solution, Type H 5mL      –

015-14461   Amino Acids Mixture Standard Solution, Type AN-2  5mL      –

015-25191   Anti Phosphorylated α-Synuclein, Monoclonal Antibody (pSyn#64)      50ul      –

011-14463   Amino Acids Mixture Standard Solution, Type AN-2  1mL×5A –

011-19365   2,2′-Azobis[2-(2-imidazolin-2-yl)propane]

Dihydrochloride   500g     27776-21-2

016-08641   Amino Acids Mixture Standard Solution, Type B 5mL      –

021-16201   BES-H2O2(Cell-impermeant)   1mg      –

031-17601   Collagenase Type I    100mg   9001-12-1

032-08385   Citric Acid Monohydrate   500g     5949-29-1

032-15372   Casein Phosphopeptide    25g –

Wako  125-05061 Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade 现货

016-20001   Anti Iba1, Rabbit (for Western Blotting)     50μg     –

016-23281   Anti Rat P2X4, Monoclonal Antibody     50ug     –

017-19362   2,2′-Azobis[2-(2-imidazolin-2-yl)propane] Dihydrochloride    25g 27776-21-2

018-08721   Agar, Powder     100g     9002-18-0

018-22021   Anti Mouse Ago2, Monoclonal Antibody 100μL    –

019-03435   Ammonium sulfate    500g     7783-20-2

Wako  125-05061 Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade 现货

021-17801   BES-So-AM 1mg      936356-51-3

022-07985   γ-Butyrolactone  500mL   96-48-0

025-03195   Buffer Solution Standard (Phosphate pH Standard Equimolal Solution)

pH6.86 (25 degrees C)    500mL   –

047-18863   Dexamethasone 100mg   50-02-2

049-18801   4′,6-Diamidino-2-phenylindole Dihydrochloride n-Hydrate      10mg      28718-90-3

058-07681   EasySeparator    1set      –

025-03195   Buffer Solution Standard (Phosphate pH Standard Equimolal Solution)

pH6.86 (25 degrees C)    500mL   –

019-19741   Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)    50μg     –

019-22291   Anti Olfactory Marker Protein, Goat      100μL    –

021-02195   Boric acid     500g     10043-35-3

034-06363   N-Caprylic Acid   25mL    124-07-2

034-16111   Cefotaxime Sodium Salt   1g   64485-93-4

035-04595   Creatinine    500g     60-27-5

035-17604   Collagenase Type I    1g   9001-12-1

038-23221   α-Casein, from Bovine Milk, Dephosphorylated  1mg      –

039-01335   Carboxymethyl Cellulose Sodium Salt   500g     9004-32-4

Wako  125-05061 Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade 现货

019-08393   Amino Acids Mixture Standard Solution, Type H 5Ax1mL –

019-11941   Active Carbon-impregnated Silica Gel   10g –

019-19741   Anti Iba1, Rabbit (for Immunocytochemistry)    50μg     –

025-15481   BES-Thio     1mg      –

026-16371   BF-170  1mg      –

027-01276   Benzyl Alcohol    500mL   100-51-6

028-03185   Buffer Solution Standard (Phthalate pH Standard Solution)

pH4.01 (25 degrees C)    500mL   –

028-03185   Buffer Solution Standard (Phthalate pH Standard Solution)

Wako  125-05061 Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade 现货

pH4.01 (25 degrees C)    500mL   –

028-03205   Buffer Solution Standard (Tetraborate pH Standard Solution)

pH9.18 (25 degrees C)    500mL   –

077-03155   Gelatin   500g     9000-70-8

081-00136   Heparin Sodium  10mu    9041-08-1

088-00705   L-Histidine Hydrochloride Monohydrate      500g     5934-29-2

093-06471   Insulin, Human, recombinant   50mg    –

097-06474   Insulin, Human, recombinant   1g   11061-68-0

120-04891   L-012    100mg   –

125-05061   Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade      5×20μg  –

Wako  125-05061 Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade 现货

129-02541   Lysyl Endopeptidase( R)   10AU     –     –

129-04861   LY 294002   5mg      154447-36-6

130-07871   Melibiose     5g   585-99-9

028-16211   BES-So (Cell-impermeant)      1mg      –

028-17811   BES-H2O2-Ac     1mg      –

029-16361   BF-168  1mg      –

039-23511   CultureSure? Freezing Medium    100ml    –

041-18861   Dexamethasine   1g   50-02-2

042-29445   Dibasic Sodium Phosphate Hydrate 500g     10039-32-4

043-22611   Dextran 200,000 100g     9004-54-0

064-05381   Fibroblast Growth Factor (basic)(FGFb / bFGF / FGF2),

Wako  125-05061 Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade 现货

Human, recombinant, Animal-derived-free  50ug     106096-93-9

071-02293   gamma-Globulin, from Human Serum   5g   9007-83-4

075-03075   Gellan Gum  500g     71010-52-1

131-00405   Magnesium Sulfate    500g     10034-, 99-8

136-03032   Methyl Red   25g 493-52-7

137-06085   Molecular Sieves 4A1/16  500g     70955-01-0

138-07872   Melibiose     25g 585-99-9

145-08221   Nuclease P1 500u     54576-84-0

145-08221   Nuclease P1 500u     54576-84-0

162-09115   Polyethylene Glycol 4,000 500g     25322-68-3

Wako  125-05061 Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade 现货

163-03545   Potassium Chloride    500g     7447-40-7

164-21655   N/400 Potassium Polyvinyl Sulfate Solu 500mL   26837-42-3

191-01785   Trisodium Citrate Dihydrate    500g     6132-04-3

193-02041   Glycerol 2-Phosphate Disodium Salt n-Hydrate   100g     819-83-0

195-12854   Streptavidin, from Streptomyces avidinii     5mg      9013-20-1

195-16031   StemSure (R) Freezing Medium     100ml    –

196-00015   Sucrose 500g     57-50-1

Wako  125-05061 Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade 现货

196-08675   Sodium Dodecyl Sulfate    500g     151-21-3

197-07485   Sodium Sulfate   500g     7757-82-6

199-02825   Sodium Dihydrogenphosphate Dihydrate    500g     13472-35-0

203-17561   Trichostatin A     1mg      58880-19-6

207-00055   L(+)-Tartaric Acid     500g     87-69-4

208-08385   1mol/l Triethylammonium Hydrogencarbonate Solution   500mL   15715-58-9

223-02112   VA-044  25g 27776-21-2

225-02111   VA-044  100g     27776-21-2

165-09105   Polyethylene Glycol 2,000 500g     25322-68-3

165-17035   Polyvinylpyrrolidone K 30 500g     9003-39-8

167-09045   Polyethylene Glycol 200   500g     25322-68-3

169-09125   Polyethylene Glycol 6,000 500g     25322-68-3

Wako  125-05061 Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade 现货

185-01003   Rifampicin    5g   13292-46-1

186-01114   all-trans-Retinoic Acid 50mg    302-79-4

189-01001   Rifampicin    1g   13292-46-1

190-05535   Trisodium Citrate Dihydrate    500g     6132-04-3

191-01665   Sodium Chloride  500g     7647-14-5

227-01071   Valproic Acid 5g   99-66-1

231-02011   Wetting Tension Test Mixture No.52.0  50mL    –

232-01941   Wetting Tension Test Mixture No.42.0  50mL    –

233-01971   Wetting Tension Test Mixture No.45.0  50mL    –

Wako  125-05061 Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade 现货

234-02001   Wetting Tension Test Mixture No.50.0  50mL    –

235-01931   Wetting Tension Test Mixture No.41.0  50mL    –

235-02031   Wetting Tension Test Mixture No.56.0  50mL    –

236-01961   Wetting Tension Test Mixture No.44.0  50mL    –

238-01921   Wetting Tension Test Mixture No.40.0  50mL    –

238-02021   Wetting Tension Test Mixture No.54.0  50mL    –

238-02141   Wetting Tension Test Mixture No.73.0  50mL    7732-18-5

253-00513   Y-27632 5mg      331752-47-7

257-00511   Y-27632 1mg      331752-47-7

Wako  125-05061 Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade 现货

290-34251   Presep-C DNPH   20EA     –

296-63801   LabAssay? Phospholipid   1300tests     –

298-64101   Fructooligosaccharides standard set     set  –

302-93561   Phos-tag (TM) Agarose    0.5mL    –

304-93521   Phos-tag (TM) Acrylamide AAL-107      10mg    –

304-93521   Phos-tag (TM) Acrylamide AAL-107      10mg    –

Wako  125-05061 Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade 现货

631-00651   Cellmatrix Type I -A (Collagen, Type I, 3 mg/mL, pH 3.0)     20mL    –

637-00653   Cellmatrix Type I -A (Collagen, Type I, 3 mg/mL, pH 3.0)     100mL   –

637-00653   Cellmatrix Type I -A (Collagen, Type I, 3 mg/mL, pH 3.0)     100mL   –

638-01021   Endotoxin Standad /JPSE  10000un      –

986-10001   Anti asialo GM1 (Rabbit), (014-09801)  1mL      617-45-8

294-63601   LabAssay? NEFA 750tests –

294-65801   LabAssay? Cholesterol    1000tests     –

Wako  125-05061 Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade 现货

325-88521   Lipase PS Amano SD  10g –

298-65701   LabAssay? Glucose   1000tests     –

300-93523   Phos-tag (TM) Acrylamide AAL-107      2mg      –

301-93531   Phos-tag (TM) Biotin BTL-104 10mg    –

301-99413   Phos-tagTM Biotin BTL-104 1mM Aqueous Solution[for Campaign]     0.1mL      753451-66-0

302-93522   Phos-tagTM Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution[for Campaign]      0.3mL    871839-54-2

Wako  125-05061 Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade 现货

295-50201   DNA Extractor? Kit   50tests  –

295-51301   Limulus ES-II Single Test Wako     25 tests –

295-51301   Limulus ES-II Single Test Wako     25 tests –

295-73401   Fructooligosaccharides Set      Set  –

304-93526   Phos-tag (TM) Acrylamide AAL-107 5mM Aqueous Solution   0.3ml    –

305-93551   Phos-tag? Mass Analytical Kit set  –

308-93541   Phos-tag (TM) Biotin BTL-105 10mg    –

308-93563   Phos-tag (TM) Agarose    3mL      –

308-97201   Phos-tag Biotin BTL-1111 1mM Aqueous Solution    0.1000mL    –

 

Wako  125-05061 Lysyl Endopeptidase, Mass Spectrometry Grade 现货

290-34251   Presep-C DNPH   20EA     –

290-63701   LabAssay? Triglyceride    1000tests     -2016-2-29

290-65901   LabAssay? Creatinine      500tests –

291-58601   Lab Assay ALP    900tests –

293-51601   Endotoxin Extracting Solution for LAL Test  10mL x 4     –

294-62001   DsDD cDNA Subtraction kit Wako   5tests    –