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抗CPM，单克隆抗体（WK）， 结合红色荧光染料（635） 气道祖细胞/肺泡祖细胞标记物

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抗CPM，单克隆抗体（WK）， 结合红色荧光染料（635）
气道祖细胞/肺泡祖细胞标记物

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抗CPM，单克隆抗体（WK）， 结合红色荧光染料（635） 气道祖细胞/肺泡祖细胞标记物

气道祖细胞/肺泡祖细胞标记物

抗CPM，单克隆抗体（WK）， 结合红色荧光染料（635）


羧肽酶M（简称CPM）是出现在细胞膜表面的肽链外切酶。它从肽和蛋白质催化裂解出C端精氨酸和赖氨酸残基。近年研究报道，它可作为气道祖细胞、肺泡祖细胞、肝祖细胞的标志物。此产品为红色荧光染料（635）标记处理后的抗CPM单克隆抗体（WK）。此产品专用于流式细胞术，无需二次抗体染色。

◆应用案例


将人类iPS细胞分化为肺祖细胞。细胞分散后，使用此新开发的产品进行抗体染色。

通过流式细胞仪进行分类。分选后，对细胞群进行免疫染色。


抗CPM，单克隆抗体（WK）， 结合红色荧光染料（635） 气道祖细胞/肺泡祖细胞标记物

数据提供：京都大学大学院医学研究科　后藤真平教授

结果：发现其中高表达CPM的细胞群同时高表达NKX2-1。

结果：NKX2-1是呼吸细胞的标志物。

◆产品介绍


成分：含0.05w / v％叠氮化钠的磷酸盐缓冲液

浓度（首次测量值）：0.54 mg / mL

亚型：Mouse IgG2b

稀释比例：（流式细胞仪）1:10



◆产品列表


产品编码 

产品名称 

等级 

规格 

保存温度 

018-28241

Anti CPM, Monoclonal Antibody (WK),
Red Fluorochrome(635)-conjugated
抗CPM单克隆抗体（WK）（结合红色荧光素635）

用于流式细胞术

300 μL 

2-10℃ 

相关产品

产品编码 

产品名称 

等级 

规格 

保存温度 

014-27501

Anti CPM, Monoclonal Antibody (WK)
抗CPM单克隆抗体（WK）

用于流式细胞术

100 μL 

-20 ℃ 

参考文献


1.

Yamamoto, Y., Gotoh, S., Korogi, Y., Seki, M., Konishi, S., Ikeo, S., Sone, N., Nagasaki, T., Matsumoto, H., Muro, S., Ito, I., Hirai, T., Kohno, T., Suzuki, Y. and Mishima, M.: Nat. Methods,14, 1097 (2017).

2.

Hawkins, F., Kramer, P., Jacob, A., Driver, I., Thomas, DC., McCauley, KB., Skvir, N., Crane, AM., Kurmann, AA., Hollenberg, AN., Nguyen, S., Wong, BG., Khalil, AS., Huang, SX., Guttentag, S., Rock, JR., Shannon, JM., Davis, BR. and Kotton, DN.: J. Clin. Invest., 127, 2277 (2017).

3.

Konishi, S., Gotoh, S., Tateishi, K., Yamamoto, Y., Korogi, Y., Nagasaki, T., Matsumoto, H., Muro, S., Hirai, T., Ito, I., Tsukita, S. and Mishima, M.: Stem Cell Reports, 6, 18 (2016).

4.

Kido, T., Koui, Y., Suzuki, K., Kobayashi, A., Miura, Y., Chem, EY., Tanaka, M. and Miyajima, A.: Stem Cell Reports, 5, 508 (2015).

5.

Gotoh, S., Ito, I., Nagasaki, T., Yamamoto, Y., Konishi, S., Korogi, Y., Matsumoto, H., Muro, S., Hirai, T., Funato, M., Mae, S., Toyoda, T., Sato-Otsubo, A., Ogawa, S., Osafune, K. and Mishima, M.: Stem Cell Reports, 3, 394 (2014).

biochain Z7030031用户手册和说明

发表于由

 

 

biochain Z7030031用户手册和说明

小鼠内皮祖细胞体外生长

产品编号：Z7030031

介绍

内皮祖细胞（epc）是内皮细胞系中的一种原始细胞类型。它们是骨髓来源的细胞，具有类似于胚胎血管母细胞的特性。这些祖细胞迁移到血液中，能够分化成各种成熟的血管内皮细胞类型。

epc在血管生成和血管生成中起着重要作用。近的证据表明

epc在肿瘤生长和转移中的作用。epc数目的改变与淋巴瘤、多发性骨髓瘤、lewis肺癌和肝细胞癌（hcc）有关。在各种疾病的发病机制中，包括冠状动脉疾病（cad）、缺血、肺动脉高压、脑血管疾病、急性心肌梗死、糖尿病、关节炎和伤口愈合中，epc的数量和功能也发生了变化。此外，epc对衰老和吸烟相关疾病有影响，提示epc在这些领域有潜在的应用。

 

 

epoc的规范与表征

从7-8周龄c57/bl6小鼠骨髓中分离出生物链小鼠内皮生长细胞（mepoc），并进行体外培养。我们的mepoc产品在第9-10次传代时作为冷冻保存或增殖细胞交付。该细胞被认为是晚期epc，因为它是cd 133-。每个冷冻瓶在1毫升冷冻培养基中含有大于5 x 10 5细胞。我们的mepocs具有与内皮祖细胞相同的纺锤状形态。

保管部

对于冷冻保存的细胞，在接收时立即将细胞从干冰转移到液氮中，并将细胞保存在液氮中，直到需要进行细胞培养进行实验。

航运

冷冻保存的细胞在干冰上运输；增殖细胞在室温下运输。

epoc培养说明

一、MEPOC生长培养基的制备

我们推荐使用Biochain的MEPOC生长培养基（CAT Z7030033）培养我们的MEPC。

一。在室温水浴中解冻MEPOC生长介质补充剂（CAT Z7030034）。

2.在Mepoc基本培养基（CAT Z7030035）的瓶子（500 ml）中加入整个体积（25 ml）的EPOC生长培养基补充剂，制备Mepoc生长培养基。生物链的mepoc生长培养基不含抗生素，但如果担心污染，可以在培养基中添加抗生素。

三。使用前，在37°C水浴中加热部分mepoc生长介质。

二。解冻冷冻细胞

一。在37°C水浴中加热EPOC生长培养基。

2.用70%乙醇擦拭冰冻小瓶的外部。在37°C的水浴中快速解冻冷冻细胞。

三。将细胞悬液无菌转移到15ml试管中。用1毫升生长培养基冲洗小瓶，并在15毫升试管中与细胞混合。以170克（或1400转/分）的速度离心5分钟，使细胞沉淀。除去上清液。加入5ml新鲜小鼠epc培养基，置于t25烧瓶中。

四。在37℃下，用5%的二氧化碳和95%的空气在加湿培养箱中培养细胞。每隔一天换一次。健康的培养物显示纺锤体形态，培养2-3天后细胞数量应加倍。

 

三、亚培养细胞

一。当细胞达到100%汇合时进行继代培养。

2.在通过细胞前一天更换培养基。

三。在37°C水浴中加热Dulbecco的PBS、0.05%胰蛋白酶/EDTA和MEPOC生长培养基。

四。用Dulbecco的PBS冲洗细胞。

5个。用胰蛋白酶/EDTA溶液（1.5毫升/25平方厘米）培养细胞3-5分钟，直到大约90%的细胞开始分离。轻轻地填充血管使细胞分离。

6.加入相当于胰蛋白酶/EDTA体积1/10的胎牛血清中和胰蛋白酶，轻轻摇动培养管混合。

7号。轻轻地重新悬浮细胞，并将细胞转移到15ml锥形管中。

8个。在室温下将细胞悬液在170 x g下离心5分钟。

9号。小心地去除上清液，不要干扰细胞颗粒。在生长培养基中重新悬浮细胞。

10个。将它们按1:5的比例放入新的培养皿中。

11号。在37℃下，用5%的二氧化碳和95%的空气在加湿培养箱中培养细胞。每隔一天换一次。

iv.在充满mepoc生长培养基的t25、t75、t125和t225烧瓶中提供增殖性epoc增殖性epoc。

当烧瓶到达时：

一。从烧瓶中倒出大部分培养基，并在烧瓶中留适量。

2.在37℃下，用5%的二氧化碳和95%的空气在加湿培养箱中培养细胞。第二天换成中号，以后每隔一天换一次。健康的培养基在培养2-3天后，纺锤形细胞形态和细胞数量应加倍。

 

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References

1. Asahara T, Murohara T, Sullivan A, Silver M, van der Zee R, Li T, Witzenbichler B, Schatteman G and Isner JM (1997). Isolation of putative progenitor endothelial cells for angiogenesis. Science. 275:964-967.

2. Gupta M (2007). Circulating endothelial cells and circulating endothelial cell progenitors as surrogate markers for determining response to antiangiogenic agents. Clin Colorectal Cancer 6(5):337-338.

3. Gao D, Nolan DJ, Mellick AS, Bambino K, McDonnell K, Mittal V. Endothelial progenitor cells control the angiogenic switch in mouse lung metastasis. Science. 2008 Jan 11; 319(5860):195-8.