GENOVIS 2015

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 Genovis 抗体亚单位切割酶

在体内外细胞或组织实验中，全抗体中由于Fc保守片段的存在可能导致许多意想不到的结果，因此单一的特异性片段F(ab’)2或 Fab 将可能获得理想的实验结果。常规获取单一F(ab’)2 或 Fab片段的方法为木瓜蛋白酶或胃蛋白酶，但是这些方法需要严苛的降解条件或催化剂的存在，因此不仅耗时，而且产量降低，产物活性被部分破坏。

FabRICATOR ^?是目前*一种能在Ig G内特定的单一位点进行切割的蛋白酶，切割后产生F(ab’)2 及 Fc片段。FabRICATOR ^?是由人化脓性链球菌的IdeS酶重组改进而来，IdeS酶对Ig G有特异性，目前还未发现该酶有其他底物存在。改进后的FabRICATOR ^?属于半胱氨酸蛋白酶，能快速准确切割Ig G生成F(ab’)2 及 Fc片段。这种切割反应可在生理条件下进行（在目前通用的缓冲体系pH 从6.0 到8.0均可胜任），因此zui大程度上保持了抗体活性。 目前所有人类的IgG均被证实可被FabRICATOR?特异性切割，另外兔、绵羊及猴子的IgG也适用但是小鼠只有IgG3可被高效切割，而小鼠IgG2则需要提高FabRICATOR?浓度及延长切割时间

FabRICATOR ^?相比传统抗体亚单位制备法的优势：

·         快速切割省时省力30 minutes

·         无需严苛的反应条件

·         产物单一明确（Fc 及(Fab’)2片段）

·         生理条件下反应确保产物活性

FabRICATOR ?相关产品

一、   FabRICATOR (IdeS)：

快速在IgG 特意位点切割，得到 Fc 及(Fab’)2片段。

二、FabULOUS (SpeB)

作为FabRICATOR家族的补充，FabULOUS可以在抗体较高位点进行切割，便于进一步分析抗体结构。

三、IgGZERO (Endo S) 与GlycINATOR (EndoS2)

特异性水解去除抗体Fc片段上的N型糖链，增强抗体特异性与敏感性。

四、FragIT 试剂盒

    该试剂盒含有将FabRICATOR融合与琼脂糖微珠上，配备纯化柱便于高效快速地从0.5 mg to 100 mg抗体中制备与纯化 Fc 及(Fab’)2。(Fab’)2可流经纯化柱获得，而被柱子吸附的Fc也可zui后从柱子中洗脱得到，从而得到分离的 Fc 及(Fab’)2片段。(Fab’)2片段还可通过添加2-MEA (2巯基乙醇) 进一步解离为Fab片段。

 五、Anti-FabRICATOR抗体

来源于山羊的用于检测FabRICATOR 酶的Anti-FabRICATOR多克隆抗体，可用于FabRICATOR酶的Western blot与 ELISA 检测。

相关参考文献：

Deglycosylation of mAb by EndoS for Improived Molecular Imaging：Peng Gao, Kenneth L. Pinkston, Nathaniel Wilganowski, Holly Robinson, Ali Azhdarinia, Banghe Zhu, Eva M. Sevick-Muraca, Barrett R. Harvey

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FabRICATOR (IdeS protease) – Lyophilized

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