encapsula IMS-2011说明书

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Encapsula NanoSciences是一家专业公司，致力于为学术和工业领域的客户和合作伙伴提供脂质体研究，开发和制造专业知识，生产脂质纳米粒子，也称为脂质体。Encapsula常规提供药物包封脂质体的定制实验室规模脂质体制剂，例如Clodrosome®（氯膦酸盐脂质体），Encapsome®（用于氯膦酸盐脂质体的纯对照脂质体），Doxosome™（多柔比星脂质体），Immunosome™（用于抗体的反应性脂质体，蛋白质）结合），Immunodox™（抗体的反应性脂质体，含有多柔比星的蛋白质结合物），Immunogene™（抗体的反应性脂质体，含有遗传物质的蛋白质结合物），Immunofluor™（抗体的反应性脂质体，包含用于追踪的荧光分子的蛋白质缀合物），Genesome TM（脂质体DNA和RNA），Fluoroliposome TM（荧光脂质体），Atpsome TM（ATP脂质体），Cellsome TM（普通脂质体作为人工细胞模型）和Cosmesome TM（用于皮肤病学的脂质体） ）对大学和工业研究实验室的客户。Encapsula NanoSciences近还推出了两种口服脂质体产品系列; 适用于宠物的NanoLife Nutra和适用于人类的NanoLife Tonics。

 

encapsula IMS-2011说明书

 

表面活性脂质体（Immunosome®）

有许多化学物质可用于将抗体和其他反应性分子缀合到脂质体表面。表面反应性脂质体可以与抗体的N-末端或C-末端缀合。它们可以与硫醇化抗体或Fab'片段上的游离硫缀合。

表面活性脂质体（Immunosome®）

Immunosome®-Folate（聚乙二醇化）

SKU＃IMS-2011

 

2毫升 600.00 美元  
5毫升 $ 1,200.00

 

描述

在过去的五十年中，已经使用各种类型的化学物质将诸如抗体，肽，蛋白质或其他反应性配体的分子缀合到脂质体的表面。通常，缀合可以通过N-末端，C-末端或可用的硫（例如 Fab'级分或硫醇化抗体）实现。并非所有化学物质具有相同的产率和缀合效率，并且通常再生生物相容性批次可能是一个挑战。

叶酸结合蛋白（FBP）是一种内源蛋白，对叶酸显示出非常高的亲和力。可以通过FBP标记抗体，并且可以通过脂质体表面上的FBP和叶酸脂质之间的非共价和高亲和力相互作用形成免疫脂质体。在该方法中，已经通过硫醚键与FBP共价连接的抗体与叶酸衍生物脂质体缀合。具有相对低的分子量（MW~40kDa）和单一结合位点可防止脂质体交联。

Immunosome®-Folate是PEG化产物。对于适用于其他类型的缀合方法的其他反应性（PEG化和非PEG化产物）Immunosome®产品，

 

配方信息

Immunosome®-Folate（聚乙二醇化）

脂质成分 浓度（mg / ml） 浓度（mM） 摩尔比百分比
总 15.86毫克/毫升 21.55 mM 100
氢化大豆PC 9.58 12.22 57
胆固醇 3.19 8.25 38
DSPE-PEG（2000） 2.7 0.96 4.5
DSPE-PEG（2000）-Folate 0.39 0.12 0.5
缓冲液和脂质体大小 规格
缓冲 磷酸盐缓冲溶液
pH值 7.4
脂质体大小 100纳米

 

共轭议定书

材料和设备

为了将您的抗体或FBP标记的蛋白与Immunosome®-Folate脂质体结合，您需要：

  1. 建议使用实验室涡旋混合器。
  2. 透析需要实验室磁力搅拌器。
  3. Float-A-Lyzer®  具有适当的MWCO，可轻松从游离和非共轭蛋白质/肽/配体中清除脂质体偶联配体。您需要确保MWCO低于1,000,000道尔顿。在1,000,000道尔顿时，透析膜上的孔径接近100 nm，因此您的脂质体可以透析出来。你不能盲目使用透析盒。在使用旋转柱或透析盒之前，请先了解该技术。如果您没有使用正确的MWCO，您可能会失去整个准备工作。对于该协议，我们建议MWCO为300,000道尔顿。

制备方法

  1. Immunosome®-Folate中的总脂质浓度为21.55 mM。脂质体中0.5％mol的脂质含有PEG-叶酸基团，并且其中仅一半暴露于脂质体的外部，其等于0.053mM的反应性可缀合脂质。对于2ml体积的脂质体，这等于1.08×10 -7 mol，对于5ml体积的脂质体，这等于2.69×10 -7mol的PEG-叶酸。 加入1:20摩尔比的用FBP标记的抗体与PEG-叶酸脂质。
  2. 我将Immunosome®-Folate与抗体-FBP在室温下孵育1小时。
  3. 通过透析去除未缀合的抗体，蛋白质，肽或配体。我们更喜欢透析以确定排除柱的大小。透析是一个慢得多的过程，但是从非偶联蛋白质/肽/配体中清除制剂后，免疫脂质体的损失小。旋转柱速度非常快，但旋转柱上的脂质体很容易丢失50％以上。我们建议使用Spectrum Labs的Float-A-Lyzer®透析盒。您需要根据蛋白质，配体，抗体或抗体片段的MW选择具有适当MWCO的盒式磁带。 注意：如果您决定使用透析盒，则需要确保MWCO低于1,000,000道尔顿。在1,000,000道尔顿时，透析膜上的孔径接近100 nm，因此您的脂质体可以透析出来。您不能盲目使用透析盒和旋转柱。它们有各种尺寸，您需要明智地选择正确的尺寸。将免疫脂质体溶液在pH7.4的1升PBS中透析8小时。用新鲜的1升PBS更换透析缓冲液，再透析8小时。完成此步骤后，即可使用已清理过的免疫脂质体。如果您没有使用正确的MWCO，您可能会失去整个准备工作。

脂质体粒子计算器

免疫体是单层脂质体，大小为100nm。脂质体的摩尔浓度为10mM。通过具有 脂质体直径（nm）和脂质浓度（μM），可以计算一个脂质体中脂质的总数和1毫升脂质体溶液中脂质体的数量。要使用计算器，

技术说明

  • 请记住，主要用于表面含有叶酸的脂质体用于靶向细胞上的叶酸受体。使用用FBP标记的抗体/蛋白质或配体制备免疫脂质体是非常适合的应用。
  • 由于在低pH下叶酸和FBP之间的亲和力降低，免疫脂质体可在暴露于内体区室的低pH环境后通过内吞作用而内化后解体。通过允许将内化脂质体分选到合适的亚细胞区室和/或促进药物分子从脂质体的细胞内释放，这种内化触发的解偶联可能有益于在细胞水平上递送脂质体药物。
  • 可以使用尺寸排阻旋转柱如Sepharose®CL-4B代替Float-A-Lyzer®透析盒。然而，在清理过程中会有非常大量的脂质体粘附在柱子上，因此我们强烈建议使用透析而不是尺寸*的珠子。
  • 如果您使用疏水的配体或肽，建议将其溶解在DMSO或DMF中，然后将缓冲液加入其中。建议溶液中不要使用超过5％体积的DMSO或DMF。DMF和DMSO均与脂质体相容，并且它们也可与水混溶。其他有机溶剂如乙醇和氯方与脂质体不相容并会导致脂质体溶解。如果您终使用DMSO或DMF，那么在完成缀合反应后，您需要从脂质体中去除DMSO和DMF。为此，您需要使用由REGENERATED CELLULOSE MEMBRANE制成的透析盒。注意：并非所有膜都与DMF和DMSO兼容。我们建议使用Slide-A-Lyzer™MINI透析装置MWCO为2K，由ThermoFisher生产的再生纤维素膜制成。除去DMSO或DMF后，您可以使用Float-A-Lyzer®透析装置进行清洁制剂的后步骤。
  • 脂质体应保持在4°C，切勿冷冻。

 

 

出现

Immunosome®-Folate是一种由纳米尺寸单层脂质体制成的白色半透明液体。通常由于脂质体的小尺寸，在小瓶的底部不会发生沉降。将脂质体包装在琥珀色小瓶中。 

订购/运输信息

  • 所有基于脂质体的制剂在隔热包装中使用隔夜运输或快递运输在4°C的蓝色冰上运输。
  • 脂质体不应该被冷冻。在脂质膜中形成的结晶冰可破坏膜，改变脂质体的大小并导致包封的药物泄漏。液体形式的脂质体应始终保存在冰箱中。
  • 从美利坚合众国境外订购的客户负责其政府进口税和海关文书工作。Encapsula NanoSciences不对美国以外国家的进口费负责。
  • 我们强烈鼓励日本，韩国，中国台湾和中国的客户通过经销商订购。如果直接通过我们订购，这些国家的严格通关规定将导致这些易腐配方的定制清关延迟。经销商可以轻松清关海关包裹。要查看经销商列表，请单击此处。
  • 从澳大利亚的大学和研究机构订购的客户应该记住，脂质体配方是由合成材料制成的，配方不需要“允许进口检疫材料”。脂质体不是生物制品。
  • 如果您希望您的学院的FedEx或DHL帐户收取运费，请在订购时提供帐号。
  • Encapsula NanoSciences无法控制因恶劣天气或清关延误造成的延误。确认订单后，您将收到FedEx或DHL跟踪号码。提前联系FedEx或DHL，确保海关的文书工作按时完成。

储存和保质期

存储

Immunosome®产品应始终在4°C​​的黑暗中储存，除非在动物给药前短时间内置于室温。不要冻结。如果悬浮液被冷冻，则包封的药物可以从脂质体中释放，从而限制其有效性。此外，脂质体的大小也会在冷冻和解冻时发生变化。

保质期

Immunosome®-Folate每天制作。装运的批次是在同一天生产的。建议在生产日期后4个月内使用产品。