Exiqon公司介绍


Exiqon公司介绍

简要描述:丹麦Exiqon公司在microRNA表达分析领域具有*地位,于2005年获得了Ernst&Youngs生物类大奖。Exiqon公司提供miRCURY™系列产品,专门用于研究microRNA的表达,分布和功能。

详细介绍

产品咨询

丹麦Exiqon公司在microRNA表达分析领域具有地位,于2005年获得了Ernst&Youngs生物类大奖。Exiqon公司提供miRCURY™系列产品,专门用于研究microRNA的表达,分布和功能。Exiqon的microRNA芯片使用基于LNATM技术的捕获探针,与普通DNA捕获探针相比,高亲和力的LNA捕获探针能够克服普通DNA探针Tm值不*,芯片对不同microRNA杂交亲和力不同的缺点,使Exiqon的microRNA芯片表现出比同类产品更为优异的品质。

主要产品:

Tools for microRNA Research
microRNA detection by in situ hybridization (control probes)
microRNA detection by Northern blot (control probes)
microRNA knockdown (control probes)
microRNA quantitation by real-time PCR
microRNA array

Gene expression analysis Real-Time PCR
Universal ProbeLibrary

Cytogenetics
Custom LNA™ DNA detection probes
LNA™ FISH probes

mRNA in situ hybridization
Custom LNA™ mRNA detection probes (control probes)

mRNA sample preparation
LNA™ mRNA sample prep probes

LNA™ and alpha-L-LNA™ amidites

A2-quencher amidites

AQ-Link™ reagents

Custom LNA™ Oligonucleotides

Exiqon combines leading-edge scientific expertise in gene expression with our proprietary LNA™ technology. Our products, services and scientific staff enable life science researchers to make groundbreaking discoveries. Moreover, we are addressing the unmet need for a new approach to the diagnosis of cancer.

We will push the frontiers of gene expression science with technologies that enable novel discoveries and drive development of targeted cancer diagnostic tools.
公司:www.exiqon.com/

Exiqon公司推出的血清血浆microRNA qPCR检测panels

Exiqon公司推出的血清血浆microRNA qPCR检测panels
 
Exiqon公司推出的血清血浆microRNA qPCR检测panels
 
 

     ——将LNA技术应用于microRNA检测的*

New serum/plasma miRCURY LNA™ Universal RT microRNA PCR panels

 

 

All microRNAs found in serum/plasma in 96 and 384 well plates

 

 

Excellent sensitivity – Profile all microRNAs on the panels using just 20 µl serum/plasma

 

 

Proven track record – Experimentally validated on thousands of clinical samples

 

 

Learn more about our serum/plasma focus panels

 

 

 

 

Cancer miRCURY LNA™ Universal RT microRNA PCR panel

 

 

Assays for all relevant oncogenes and/or tumor suppressor microRNAs in one PCR Panel

 

 

Profile all microRNAs using less than 20 ng total RNA. Focus on the microRNAs you need

 

 

Sensitivity & specificity for accurate microRNA profiling from FFPE, biopsies & LCM samples

 

 

Read about our cancer focus panel

磁珠型microRNA分离试剂盒

磁珠型microRNA分离试剂盒

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

磁珠型microRNA分离试剂盒磁珠型microRNA分离试剂盒

FUJIFILM Wako提供能使从Ago 免疫沉淀到RNA 提取等一系列实验操作简化的“microRNA Isolation Kit”系列。使用本系列试剂盒能简便地从人和小鼠的细胞或组织中提取Ago蛋白结合的microRNA以及靶mRNA,还能从培养上清、血清、血浆中提取游离Ago蛋白结合的microRNA。所提取到的RNA可以应用于qPCR、微阵列检测、NGS等下游实验。本系列包括采用磁珠的MagCapture™ microRNA Isolation Kit,以及采用了硅胶珠法的microRNA Isolation Kit。


磁珠型microRNA分离试剂盒

MagCapture™ microRNA Isolation Kit(磁珠法)系列产品包括含抗人Ago2抗体(4G8)、抗小鼠Ago2抗体(2D4)、抗Ago1-4抗体(1G3)固相化磁珠这三种试剂盒,以及第四种——能结合任意抗体的Protein G磁珠。上述试剂盒全部采用磁珠法,可进行简易的免疫沉淀操作并获得良好的重复性。免疫沉淀后提取的RNA可进一步使用离心柱纯化,获得高纯度的RNA;若使用含有抗Ago抗体固定化磁珠的3种试剂盒,也可使用一步法更加简便地提取RNA(备注:RNA与磁珠不分离)。

◆试剂盒组成(例:Human Ago2, 10次用)


  1. Anti-Human Ago2 Magnetic Beads Solution:600 μL×1瓶

  2. Cell Lysis Solution:20 mL×1瓶

  3. Washing Solution for IP:40 mL×1瓶

  4. Elution Solution I for IP:500 μL×1瓶

  5. Elution Solution II for IP:500 μL×1瓶

  6. Binding Solution for Spin Column:2 mL×1瓶

  7. Binding Enhancer for Spin Column:100 μL×1瓶

  8. Washing Solution I for Spin Column:3 mL×1瓶

  9. Washing Solution II for Spin Column:4 mL×1瓶

10. Elution Solution for Spin Column:1 mL×1瓶

11. Spin Column/Collection Tube:10瓶

◆操作示意图


磁珠型microRNA分离试剂盒

◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit,Human Ago2 使用例子(人)


提取人细胞株中的microRNA


通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(银染),检测使用本品(MagCapture™ microRNA Isolation Kit,Human Ago2)从人K562细胞(1×107 cells)中提取的microRNA(图1)。结果显示,本系列试剂盒可提取得到高纯度的microRNA。通过qPCR对miR-92a进行定量,比较使用本品和硅胶珠型产品(microRNA Isolation Kit,Human Ago2)提取的microRNA量(图2)。本系列试剂盒的离心柱法具有几乎与硅胶珠法相同的microRNA提取能力,而且一步法的microRNA提取能力比硅胶珠法更好。


磁珠型microRNA分离试剂盒


图1. 对从人K562细胞中提取的microRNA的进行银染检测


磁珠型microRNA分离试剂盒


图2. 比较从人K562细胞中提取的microRNA量

提取人血浆中的游离Ago2蛋白结合microRNA


以qPCR对miR-92a进行定量,比较使用磁珠型MagCapture™ microRNA Isolation Kit,Human Ago2和硅胶珠型产品从200 μL健康人混合血浆中提取的microRNA量。结果发现,本试剂盒中的离心柱法具有几乎与硅胶珠型产品相同的microRNA提取能力,而且一步法的microRNA提取量比硅胶珠型高(图3)。


磁珠型microRNA分离试剂盒


图3. 比较从人血浆中提取的microRNA量

提取microRNA的靶标mRNA

向miR-122低表达的肝癌细胞株HepG2细胞(5×105 cells)导入人工合成的miR-122或调控的荧光素酶siRNA(Luc siRNA),提取了分别用磁珠型MagCapture™ microRNA Isolation Kit,Human Ago2和硅胶珠型产品制备的Ago2 IP RNA,以及用ISOGEN® 制备的total RNA。运用qPCR法比较各种RNA中含有的miR-122量(图4)与其靶标mRNA(Aldo A mRNA是miR-122靶标之一,以GAPDH内参作校正)量(图5)。与硅胶珠型产品一样,本品提取的RNA中富集了miR-122和Aldo A mRNA,因此,可以利用本品提取microRNA的靶标mRNA。另一方面,用ISOGEN® 制备的total RNA中的Aldo A mRNA会随着miR-122的增加而分解并减少。


磁珠型microRNA分离试剂盒


图4. miR-122提取量的比较

磁珠型microRNA分离试剂盒


图5. 靶标mRNA提取量的比较




◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2 使用例子(小鼠)


从小鼠细胞株中提取microRNA

通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(银染),检测用本试剂盒(MagCapture™ microRNA Isolation Kit,Mouse Ago2)从小鼠P388D1细胞(2×107 cells)中提取的microRNA(图1)。结果显示,本品能提取出高纯度的microRNA。另外,以qPCR法对miR-92a进行定量,比较使用硅胶珠型产品(microRNA Isolation Kit,Mouse Ago2)提取到的microRNA量(图2)。结果发现,本品的离心柱法具有与硅胶珠型产品几乎同样的microRNA提取能力,而一步法的microRNA提取能力比硅胶珠型产品更好。


磁珠型microRNA分离试剂盒


图1. 对从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA的进行银染检测

磁珠型microRNA分离试剂盒


图2. 比较从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA量




从大鼠血浆中提取游离Ago2蛋白结合microRNA

通过qPCR对miR-92a进行定量,比较使用本品以及硅胶珠型产品从200μL大鼠血浆中提取到的microRNA量。本品的离心柱法具有与硅胶珠型产品几乎同样的microRNA提取能力,而一步法的microRNA提取能力比硅胶珠型产品更好(图3)。


磁珠型microRNA分离试剂盒

图3. 比较从大鼠血浆中提取的microRNA量

◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Ago 1–4 使用例子(人)


提取Ago1–4结合microRNA


用各种Ago1、Ago2、Ago3、Ago4特异性抗体进行微阵列检测分析免疫沉淀后HeLa中的各个RNA组分,结果显示,Ago2中捕获了大量miR-22和miR-16,而Ago1、Ago3、Ago4中则捕获了大量的miR-1260b和miR-4286(表1)。


信号强度

信号比

名称

Ago1 IP

Ago2 IP

Ago3 IP

Ago4 IP

Ago2/Ago1

Ago2/Ago3

Ago2/Ago4

hsa-miR-22

3521.4

21696.5

3771.2

292.4

6.16

5.75

74.2

hsa-miR-16

6886.3

28527.2

5013.4

582.5

4.14

5.69

48.97

hsa-miR-1260b

2060.3

540.9

1270.6

1977.9

0.26

0.43

0.27

hsa-miR-4286

678.8

202.4

2019.2

471.2

0.3

0.1

0.43


表1. 微阵列检测分析结果


上述分析结果验证了我们可以利用MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Ago1-4,从Ago1、Ago3、Ago4中提取硅胶珠型产品难以提取的大量microRNA。

使用本品和硅胶珠型产品,提取HeLa细胞(1×107 cells)中的microRNA,以miR-92a作为内部标准,通过qPCR检测miR-22、miR-1、miR-1260b、miR-4286的提取量。结果发现,Ago1、Ago3、Ago4中miR-1260b、miR-4286的提取量比硅胶珠型产品更高(图1)。因此,本品不仅能提取Ago2中的microRNA,还能从Ago1、Ago3、Ago4中提取硅胶珠型产品难以提取的大量microRNA。


磁珠型microRNA分离试剂盒

图1. 比较从HeLa细胞中提取的各种microRNA量




提取人和小鼠细胞株中的microRNA

以qPCR对miR-92a进行定量,比较用本品和硅胶珠型产品(microRNA Isolation Kit, Human Ago2或Mouse Ago2)从人K562细胞(1×107 cells)及小鼠P388D1细胞(2×107 cells)中提取的microRNA量。结果显示,本品可提取和硅胶珠型产品相同甚至更多的microRNA(图2,3)。


磁珠型microRNA分离试剂盒

图2. 比较从人K562细胞中提取的microRNA量



磁珠型microRNA分离试剂盒

图3. 比较从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA量




提取人和大鼠血浆中的游离Ago结合microRNA


以qPCR对miR-92a进行定量,比较用本品和第一代产品(microRNA Isolation Kit, Human Ago2或Mouse Ago2)从200 μL人以及大鼠血浆中提取的microRNA量。结果显示,本品可提取和硅胶珠型产品相同甚至更多的microRNA(图4,5)。


磁珠型microRNA分离试剂盒

图4. 比较从人血浆中提取的microRNA量



磁珠型microRNA分离试剂盒

图5. 比较从大鼠血浆中提取的microRNA量




提取各种动物细胞株中的microRNA


以qPCR对miR-92a进行定量,检测用MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2、Mouse Ago2、Ago1-4从2×106 cells的K562细胞(人)、COS-7细胞(猴)、MDCK细胞(狗)、P388D1细胞(小鼠)、SCC-131细胞(大鼠)中提取的免疫沉淀组分中的microRNA量,和用ISOGEN® 从各种细胞中提取的total RNA组分中的microRNA量。通过比较各种免疫沉淀所得到的RNA组分中的miR-92a量和total RNA组分中的miR-92a量的相对值,表明本品适合提取上述全部细胞中的microRNA(图6)。


磁珠型microRNA分离试剂盒

图6. 比较从各种动物细胞中提取的microRNA量

◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Protein G使用例子

提取人和小鼠细胞株中的microRNA(与硅胶珠型产品的比较)

以qPCR法对miR-92a进行定量,比较用本品(MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Protein G)和抗Ago1抗体(2A7)、抗人Ago2抗体(4G8)、抗人Ago3抗体(1C12)从人K562细胞(1×107 cells)提取的microRNA量,和用硅胶珠型产品(microRNA Isolation Kit, Human/Mouse Ago1、Human Ago2、Human Ago3)提取的micro RNA量(图1,2,3,)。另外,以qPCR对miR-92a进行定量,比较用本品和抗小鼠Ago2抗体(2D4)从小鼠P388D1细胞(2×107 cells)中提取的microRNA量,和用硅胶珠型产品(microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2)提取的microRNA量(图4)。结果发现,本品与任意抗Ago抗体结合使用,能比硅胶珠型产品提取到更多的microRNA。


磁珠型microRNA分离试剂盒


图1. 比较结合了抗Ago1抗体时的microRNA提取量

磁珠型microRNA分离试剂盒

图2. 比较固定抗人Ago2抗体时的microRNA提取量



磁珠型microRNA分离试剂盒

图3. 比较固定抗人Ago3抗体时的microRNA提取量



磁珠型microRNA分离试剂盒

图4. 比较固定抗小鼠Ago2抗体时microRNA的提取量




提取人与小鼠细胞株中各种Ago蛋白结合microRNA


通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和qPCR,对用本品和抗Ago1抗体(2A7)、抗人Ago2抗体(4G8)、抗人Ago3抗体(1C12)、抗Ago4抗体(2G7)从人K562细胞(1×107 cells)中提取的miR-92a表达量进行检测(图5)。另外,通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和qPCR(miR-92a量),检测用本品和抗Ago1抗体(2A7)、抗小鼠Ago2抗体(2D4)、抗小鼠Ago3抗体(S09)、抗Ago4抗体(2G7)从小鼠P388D1细胞(2×107 cells)中提取的microRNA量(图6)。结果表明,本品与任意的抗Ago抗体组合使用,能提取与各种Ago结合的microRNA


磁珠型microRNA分离试剂盒

图5. 从人K562细胞中提取的microRNA量的比较与银染检测

磁珠型microRNA分离试剂盒

图6. 从小鼠P388D1细胞中提取的microRNA量的比较与银染检测

◆产品列表


产品编号

产品名称

使用

抗体

克隆号

对应

物种

对应样本

提取RNA

IP   B/F
分离法

RNA
提取法

295-74001

MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2
MagCapture™ microRNA

分离试剂盒,人Ago2

4G8

人、猴、狗

细胞/

组织
血清/

血浆

microRNA
靶标mRNA

磁力

分离

离心

柱法

一步法

297-74201

MagCapture™ microRNA Isolation Kit,Mouse Ago2
MagCapture™ microRNA

分离试剂盒,小鼠Ago2

2D4

小鼠、大鼠、狗

293-74801

MagCapture™ microRNA Isolation Kit,Ago 1-4
MagCapture™ microRNA

分离试剂盒,Ago1-4

1G3

人、猴、狗、小鼠、大鼠

microRNA

299-74401

MagCapture™ microRNA Isolation Kit,Protein G
MagCapture™ microRNA

分离试剂盒,蛋白G

随意

选择

根据使用的抗体而定

细胞/

组织

根据使用的抗体而定

一步法

※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。



产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
295-74001 MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2
MagCapture™microRNA分离试剂盒,人Ago2
10 tests for Genetic Research
297-74201 MagCapture™ microRNA Isolation Kit,Mouse Ago2
MagCapture™microRNA分离试剂盒,小鼠Ago2
10 tests for Genetic Research
293-74801 MagCapture™ microRNA Isolation Kit,Ago 1-4
MagCapture™ microRNA分离试剂盒,Ago1-4
10 tests for Genetic Research
299-74401 MagCapture™ microRNA Isolation Kit,Protein G
MagCapture™microRNA分离试剂盒,蛋白G
20 tests for Genetic Research

硅胶珠型microRNA分离试剂盒

硅胶珠型microRNA分离试剂盒

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

硅胶珠型microRNA分离试剂盒硅胶珠型microRNA分离试剂盒

FUJIFILM Wako提供能使从Ago 免疫沉淀到RNA 提取等一系列实验操作简化的“microRNA Isolation Kit”系列。使用本系列试剂盒能简便地从人和小鼠的细胞或组织中提取Ago蛋白结合的microRNA以及靶mRNA,还能从培养上清、血清、血浆中提取游离Ago蛋白结合的microRNA。所提取到的RNA可以应用于qPCR、微阵列检测、NGS等下游实验。本系列包括采用磁珠的MagCapture™ microRNA Isolation Kit,以及采用了硅胶珠法的microRNA Isolation Kit。


硅胶珠型microRNA分离试剂盒

microRNA Isolation Kit抗Ago抗体固定珠子具有非特异吸附性低的特征,它采用二氧化硅基聚合物珠粒,以离心为基础进行免疫沉淀操作。在从免疫沉淀后的硅胶珠中提取RNA的步骤时,采用苯酚/氯仿提取(P/C法)及乙醇沉淀来提取RNA。FUJIFILM Wako推出含有固定了抗Ago1抗体(2A7)、抗人Ago2抗体(4G8)、抗小鼠Ago2抗体(2D4)、抗人Ago3抗体(1C12)的硅胶珠的4种试剂盒。

 

◆试剂盒组成(以Human Ago2为例,10次用)


1. Anti-Human Ago2 Antibody Beads Solution:500 μL×1瓶

2. Cell Lysis Solution:50 mL×1瓶

3. Elution Solution:500 μL×1瓶

4. Ethachinmate:30 μL×1瓶

5. 3 mol/L Sodium Acetate:400 μL×1瓶


◆操作示意图


硅胶珠型microRNA分离试剂盒

◆试剂盒使用实例


用microRNA Isolation Kit, Human Ago2通过Urea-PAGE分离从三种5×106 cells的人培养细胞株(HeLa、HepG2、HEK293),和小鼠培养细胞株(P388D1)中提取的microRNA组分,再进行银染(311-03961、CLEAR STAINAg、20 tests)检测。结果表明能从人培养细胞中特异性提取microRNA(图1)。以同样的银染试剂,检测用microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2从5×106 cells的人培养细胞(HeLa)和啮齿动物培养细胞株(P388D1、CHO、PC-12)中提取的microRNA组分。结果表明,能从三种啮齿动物培养细胞株中特异性提取microRNA而不能从人细胞株中提取(图2)。

硅胶珠型microRNA分离试剂盒

图1.通过用Human Ago2提取的microRNA的进行银染检测

硅胶珠型microRNA分离试剂盒

图2. 对Mouse Ago2提取的microRNA的进行银染检测

◆产品列表

产品编号

产品名称

使用抗体克隆号

对应

物种

对应样本

提取RNA

IPB/F

分离法

RNA

提取法

291-70201

microRNA Isolation Kit, Human/Mouse Ago1
microRNA纯化试剂盒,人/鼠Ago1  

2A7

人、小鼠

细胞/组织

microRNA
靶标mRNA
   

离心

P/C 法
(苯酚/氯仿法)
   

292-66701

microRNA Isolation Kit, Human Ago2

microRNA纯化试剂盒,人Ago2

4G8

人、猴、狗

292-67301

microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2
    microRNA纯化试剂盒,小鼠Ago2

2D4

小鼠、
大鼠

297-70301

microRNA Isolation Kit, Human Ago3
microRNA纯化试剂盒,人Ago3

1C12


※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。

产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
291-70201 microRNA Isolation Kit, Human/Mouse Ago1 
 microRNA纯化试剂盒,人/鼠Ago1
10 tests for Genetic Research
292-66701 microRNA Isolation Kit, Human Ago2 
 microRNA纯化试剂盒,人Ago2 
10 tests for Genetic Research
292-67301 microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2 
 microRNA纯化试剂盒,小鼠Ago2 
10 tests for Genetic Research
297-70301 microRNA Isolation Kit, Human Ago3 
 microRNA纯化试剂盒,人Ago3
10 tests for Genetic Research

miRNA研究专题

miRNA研究专题

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

miRNA研究专题miRNA研究专题



  FUJIFILM Wako提供miRNA从分离、克隆到靶基因功能研究的一系列试剂盒。

  列表中的产品仅仅用于实验室研究,不能作为药物、食物或人的使用。



◆简便高效的microRNA分离试剂盒——microRNA Isolation Kit

 

 产品编号:291-70201


  microRNA Isolation Kit 可同时分离出miRNA和及其靶基因mRNA,操作简单。分离得到的 Ago IP RNA fraction,可用于miRNA和靶基因mRNA的克隆、定量和表达谱分析。


miRNA研究专题



高效的miRNA克隆——microRNA Cloning Kit Wako

   

产品编号:290-66501


● 高效率克隆microRNA

● 可克隆具有二级结构的microRNA

● 重复性好。



miRNA靶基因mRNA的克隆—— Target mRNA Cloning Kit Wako

  

产品编号:298-68001


  miRbase中miRNA的数目已经达到10883,但是miRNA已知的靶序列mRNA却很少, 而miRNA的靶序列研究也是其功能研究一个重要部分,由于miRNA与其靶mRNA存在不完全配对,对计算机预测造成困难。

  miRNA、靶mRNA和Ago蛋白会以复合物RISC形式存在,本试剂盒通过从细胞中分离得到的RISC复合物中,直接有效的克隆特定miRNA的靶序列mRNA,可作为miRNA靶序列的新发现与筛选的有力工具。


特点


● 用于扩增微量 mRNA

● 可直接从Ago IP RNA片段中克隆mRNA,用于microRNA 靶基因的研究


靶序列mRNA的cDNA克隆实验路线图


miRNA研究专题

◆PCR反应的纯化试剂盒——PCR  Purification Kit Wako


产品编号:298-67901


  不需要使用凝胶试剂盒回收纯化,可通过PCR  Purification Kit Wako直接去除PCR扩增后DNA反应液中含有的引物、引物二聚体、dNTP、酶类如DNA聚合酶和限制内切酶等物质,操作简单,纯化后DNA溶液可用于限制酶处理、Southern杂交、标记,克隆,测序,体外转录等实验。


miRNA试剂盒(Wako)的应用(miR-122 targeted mRNA的研究)


实验总路线图


miRNA研究专题


① 扩增到cDNA电泳检测


miRNA研究专题

结果显示:可以从Ago IP RNA片段中成功的扩增到cDNA.

② 扩增后的cDNA的克隆

  

miR-122的潜在靶序列的cDNA克隆 ,然后通过在线软件如TargetScan 4.2对获得序列是否是靶序列进行评分。


miRNA研究专题

  

  ※ 1. CSP:Context Score Percentile

         靶序列mRNA的合理参数值

  ※ 2.对照细胞

        转染了GL3(荧光素酶)siRNA的HepG2细胞



③ 靶序列 mRNA 的鉴定( qRT-PCR)

  

mRNA的定量(CSP※1 of Clone ≧ 80)

其中ALDOA mRNA已经证实是miR-122的靶基因,此外,通过此方法发现了很多新的miR-122潜在的靶序列。


miRNA研究专题

miRNA研究专题 miRNA研究专题

Target mRNA Cloning Kit

A useful approach to total analysis of RISC-associated RNA

miRNA研究专题 miRNA研究专题
298-67901 298-68001

参考文献


1.   Hayashida, Y., et al . A useful approach to total analysis of RISC-associated RNA., BMC Research Notes , 2, 169(2009)

产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
298-68001 Target mRNA Cloning Kit Wako 10 次
291-70201 microRNA Isolation Kit, Human/Mouse Ago1 10 次
292-66701 microRNA Isolation Kit, Human Ago2 10 次
292-67301 microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2 10 次
297-70301 microRNA Isolation Kit, Human Ago3 10 次
298-67901 PCR Purifi cation Kit Wako 30 次
290-66501 microRNA Cloning Kit Wako 8 次

MagCapture™ microRNA分离试剂盒系列 MagCapture™ microRNA Isolation Kit 系列

MagCapture™ microRNA分离试剂盒系列
MagCapture™ microRNA Isolation Kit 系列

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

MagCapture™ microRNA分离试剂盒系列                              MagCapture™ microRNA Isolation Kit 系列MagCapture™ microRNA 分离试剂盒系列


  本公司提供可实现从 Ago 免疫沉淀到RNA纯化一系列更简便操作的「microRNA Isolation Kit」系列产品。通过使用该系列产品,可便利地从人或小鼠的细胞、组织中回收 Ago 蛋白质结合 microRNA 以及目标 mRNA。另外,从培养上清、血清、血浆中也可回收游离状态的 Ago 蛋白质结合 microRNA。回收后的 RNA 可用于定量PCR、微阵列芯片(Microarray)、新一代序列分析等各种应用。该系列产品扩充至有采用了磁珠的 MagCapture™ microRNA Isolation Kit 和采用硅珠的,共8种试剂盒。

MagCapture™ microRNA分离试剂盒系列                              MagCapture™ microRNA Isolation Kit 系列



◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit(磁珠型)


  该系列有抗人 Ago2 抗体(4G8)、抗鼠 Ago2 抗体(2D4)、抗 Ago1-4 抗体(1G3)包被磁珠的三种试剂盒以及含有可固定任意抗体的 Protein G 磁珠试剂盒,共计4款产品。这些试剂盒都采用磁珠,可更方便地进行重复性良好的免疫沉淀操作。在免疫沉淀后的纯化 RNA 步骤中,采用能获得高纯度 RNA 的离心柱法;此外,也可以采用含有抗 Ago 抗体包被磁珠的3种试剂盒的更简便的一步法。


试剂盒内容(例:Human Ago2, 10次用)

● Anti-Human Ago2 Magnetic Beads Solution——600 μL×1支

● Cell Lysis Solution——20 mL×1支

● Washing Solution for IP——40 mL×1支

● Elution Solution I for IP—— 500 μL×1支

● Elution Solution II for IP——500 μL×1

● Binding Solution for Spin Column——2 mL×1支

● Binding Enhancer for Spin Column——100 μL×1支

● Washing Solution I for Spin Column——3 mL×1支

● Washing Solution II for Spin Column—— 4 mL×1支

● Elution Solution for Spin Column——1 mL×1支

● Spin Column/Collection Tube——10支


◆概述图


MagCapture™ microRNA分离试剂盒系列                              MagCapture™ microRNA Isolation Kit 系列

 

产品名称

使用抗体克隆号

适应物种

对应样本

回收RNA

IP B/F 分离

RNA提纯

MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2

4G8

人、猴、狗

细胞/ 组织/血清/ 血浆

microRNA 和目标mRNA

磁力分离

离心柱法、

一步法

MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2

2D4

小鼠、大鼠、狗

MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Ago   1-4

1G3

人、猴、狗,
  小鼠、大鼠

microRNA

MagCapture™ microRNA Isolation Kit,   Protein G

随意

参照抗体

细胞/组织

参照抗体

离心柱法

 


◆MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2 实验案例(人)


从人细胞系中回收 microRNA


  用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法(银染色)确认通过本产品(MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2)从人K562细胞(1×107 cells)中获得的 microRNA(图1)。结果表明,使用本产品可获得高纯度的 microRNA。此外,通过定量 PCR 法(miR-92a 量),与使用原产品 microRNA Isolation Kit,Human Ago2 所获得的 microRNA 量相比较可知(图2),本产品的离心柱法显示与原产品几乎一样的 microRNA 回收性能;另外,在一步法中显示出了比原产品更优秀的 microRNA 回收性能。

 

MagCapture™ microRNA分离试剂盒系列                              MagCapture™ microRNA Isolation Kit 系列 MagCapture™ microRNA分离试剂盒系列                              MagCapture™ microRNA Isolation Kit 系列
图1. 银染色检测从人K562细胞纯化的 microRNA 图2. 人K562细胞中纯化 microRNA 回收量的比较

LaneM:标记

Lane1:合成RNA寡聚核苷酸(23base)1ng

Lane2:本品(Spin Column法)

Lane3:本品(One Step法)

 

从人血浆中回收结合游离 Ago 蛋白质的 microRNA


  通过定量 PCR 法比较使用本产品和原产品从 200 μL 正常人混合血浆中获取的microRNA 量。结果显示,本产品的离心柱法与原产品具有几乎一样的microRNA回收性能;另外,在一步法中microRNA 回收量比原产品多。(见图3)


MagCapture™ microRNA分离试剂盒系列                              MagCapture™ microRNA Isolation Kit 系列

图3.人血浆中纯化 microRNA 回收量的比较

microRNA 的目标mRNA回收


  向 miR-122 低表达的肝癌细胞株 HepG2 细胞(5×105 cells)中导入人工合成的 miR-122 和调节用荧光素酶 siRNA(Luc siRNA),使用本产品和原产品获得配制的 Ago2 IP RNA 以及用 ISOGEN® 配制的 total RNA。通过定量PCR法比较各RNA种所含 miR-122 的量(图4)和其目标mRNA(目标基因中 Aldo A mRNA 的量用 GAPDH mRNA 的量补充)。(图5)。结果表明,与原产品一样,通过本产品获得的目标 mRNA中,Aldo A mRNA 和 miR-122一同被浓缩,由此可知使用本产品可以获得 microRNA 的目标 mRNA。另一方面,使用 ISOGEN® 获得的 total RNA 中,Aldo A mRNA 随着 miR-122 的增加而逐渐分解减少。


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图4.miR-122回收量的比较


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图5.目标mRNA回收量的比较

MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2 实验案例(小鼠)


从小鼠细胞中回收microRNA


  用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(银染色)确认通过使用本产品(MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2)从小鼠P388D1细胞(2×107 cells)中获得的 microRNA。(图1)结果表明,使用本产品可获得高纯度的microRNA。此外,通过定量PCR法(miR-92a量),与使用原产品(microRNA Isolation Kit, Human Ago2)所获得的microRNA量相比较可知(图2),本产品的离心柱法显示与原产品几乎一样的microRNA回收性能;另外,在一步法中显示出了比原产品更优秀的microRNA回收性能。

 

MagCapture™ microRNA分离试剂盒系列                              MagCapture™ microRNA Isolation Kit 系列

MagCapture™ microRNA分离试剂盒系列                              MagCapture™ microRNA Isolation Kit 系列

图1.银染色检测从小鼠P388D1细胞纯化的microRNA

LaneM:标记

Lane1:合成RNA寡聚核苷酸(23base)1ng

Lane2:本品(Spin Column法)

Lane3:本品(One Step法)

图2.小鼠P388D1细胞纯化microRNA回收量的比较

从大鼠血浆中回收游离Ago2蛋白质结合microRNA


  通过定量PCR法(miR-92a量)比较使用本产品和原产品从 200 μL大鼠血浆中获取的microRNA量。结果表明,本产品的离心柱法与原产品具有几乎一样的microRNA回收性能;另外,在一步法中microRNA回收量比原产品大。(图3)


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图3.人血浆中纯化microRNA回收量的比较

MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Ago 1-4 实验案例(人)


回收Ago1-4结合microRNA


  分别使用 Ago1, Ago2, Ago3, Ago4特异性抗体对HeLa细胞中各RNA片段免疫沉淀处理后,进行微阵列芯片(3D-Gene® ,东丽)分析。结果表明miR-22和miR-16多数被Ago2抗体吸收。另一方面,miR-1260b, miR-4286多数被Ago1, Ago3, Ago4吸收。(表1)

  基于此解析结果,验证使用本产品(MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Ago1-4),是否可回收原产品(microRNA Isolation Kit, Human Ago2)中被Ago1, Ago3, Ago4吸收较为困难的microRNA。

 

表1. 微阵列芯片分析结果

信号强度

信号比

Name

Ago1   IP

Ago2   IP

Ago3   IP

Ago4   IP

Ago2/Ago1

Ago2/Ago3

Ago2/Ago4

hsa-miR-22

3521.4

21696.5

3771.2

292.4

6.16

5.75

74.20

hsa-miR-16

6886.3

28527.2

5013.4

582.5

4.14

5.69

48.97

hsa-miR-1260b

2060.3

540.9

1270.6

1977.9

0.26

0.43

0.27

hsa-miR-4286

678.8

202.4

2019.2

471.2

0.30

0.10

0.43

 

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图1.从HeLa细胞中回收的各microRNA量的比较

 

从人和小鼠细胞株中回收microRNA


  通过定量PCR法(miR-92a量)比较使用本产品和原产品从人K562细胞(1×107 cells)和小鼠P388D1细胞(2×107 cells)中获取的microRNA量。结果表明,在同等条件下,使用本产品可获得更多的microRNA。(图2、图3)

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 图2.人K562细胞中纯化microRNA回收量的比较                   图3.小鼠P388D1细胞中纯化microRNA回收量的比较

 

从人和大鼠血浆中回收游离Ago结合microRNA


  通过定量PCR法(miR-92a量)比较使用本产品和原产品(microRNAIsolation Kit, Human Ago2或Mouse Ago2)从人和大鼠血浆中中获取的microRNA量。结果表明,在同等条件下,使用本产品可获得更多的microRNA。(图4、图5)

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     图4.人血浆中纯化microRNA回收量的比较                  图5.大鼠血浆中纯化microRNA回收量的比较

 

从各种动物细胞株中回收microRNA


  通过定量PCR法(miR-92a量)测量使用MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2、Mouse Ago2、Ago1-4从2×106 cells的K562细胞(人)、COS-7细胞(猴)、MDCK细胞(狗)、P388D1细胞(小鼠)、SCC-131细胞(大鼠)中获取的免疫沉淀RNA片段中microRNA量和使用ISOGEN®  从各种细胞中获取的total RNA片段中microRNA量。比较各免疫沉淀RNA片段中所含miR-92a 量和totalRNA片段中所含miR-92a量的相对值可知,本产品可在全部的细胞种类中获取microRNA。(图6)


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图6.从各种细胞中获取的microRNA量的比较

 


MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Protein G 实验案例


从人和小鼠细胞株中回收microRNA(与原产品的比较)


  通过定量PCR法(miR-92a量)比较在使用本产品(MagCapture™ microRNA Isolation Kit, ProteinG)和抗Ago1抗体(2A7)、抗人Ago2抗体(4G8)、抗人Ago3抗体(1C12)从人K562细胞(1×10cells)中获得的microRNA量以及使用原产品(microRNA Isolation Kit, Human/Mouse Ago1、Human Ago2、Human Ago3)获得的microRNA量(图1,2,3)。此外,通过定量PCR法(miR-92a量)比较在使用本产品和抗小鼠Ago2抗体(2D4)从小鼠P388D1细胞(2×107 cells)中获得的microRNA量以及使用原产品(microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2)获得的microRNA量(图4)。结果表明,本产品和任意抗Ago抗体组合使用,获得的microRNA量要比原产品多。


从人和小鼠细胞株中回收各种Ago蛋白质结合microRNA


  通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和定量PCR法(miR-92a量)研究在使用本产品和抗Ago1抗体(2A7)、抗人Ago3抗体(1C12)、抗Ago4抗体(2G7)从人K562細胞(1×107cells)中获得的microRNA量(图5)。此外,通过变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和定量PCR法(miR-92a量)研究在使用本产品和抗Ago1抗体(2A7)、抗小鼠Ago2抗体(2D4)、抗小鼠Ago3抗体(S09)、抗Ago4抗体(2G7)从小鼠P388D1细胞中获得的microRNA量(图6)。结果表明,本产品和任意抗Ago抗体组合使用,可获得各种Ago蛋白结合microRNA。

 

MagCapture™ microRNA分离试剂盒系列                              MagCapture™ microRNA Isolation Kit 系列

MagCapture™ microRNA分离试剂盒系列                              MagCapture™ microRNA Isolation Kit 系列

图1. 抗Ago3抗体固定时microRNA回收量的比较

本产品:使用抗Ago1抗体(2A7)

原产品:microRNA Isolation Kit, Human、Mouse Ago1

(291-70201)

图2. 人Ago2抗体固定时microRNA回收量的比较

本产品:使用抗人Ago2抗体(4G8)

原产品:microRNA Isolation Kit, Human Ago2

(292-66701)

MagCapture™ microRNA分离试剂盒系列                              MagCapture™ microRNA Isolation Kit 系列

MagCapture™ microRNA分离试剂盒系列                              MagCapture™ microRNA Isolation Kit 系列

图3. 人Ago3抗体固定时microRNA回收量的比较

本产品:使用抗人Ago3抗体(1C12)

原产品:microRNA Isolation Kit, Human Ago3

(297-70301)

图4. 小鼠Ago2抗体固定时microRNA回收量的比较

本产品:使用抗小鼠Ago2抗体(2D4)

原产品:microRNA Isolation Kit, Human、Mouse Ago2

(292-67301)

 

MagCapture™ microRNA分离试剂盒系列                              MagCapture™ microRNA Isolation Kit 系列

图5. 从人K562细胞中纯化的microRNA回收量的比较和银染色检验


MagCapture™ microRNA分离试剂盒系列                              MagCapture™ microRNA Isolation Kit 系列

图6. 从小鼠P388D1细胞中纯化的microRNA回收量的比较和银染色检验 


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MagCapture™ microRNA分离试剂盒系列                              MagCapture™ microRNA Isolation Kit 系列

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产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
293-74801 MagCapture™microRNA分离试剂盒,Ago1-4
 MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Ago1-4
10次
299-74401 MagCapture™microRNA分离试剂盒,蛋白G
 MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Protein G
20次
295-74001 MagCapture™microRNA分离试剂盒,人Ago2
 MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Human Ago2
10次
297-74201 MagCapture™microRNA分离试剂盒,小鼠Ago2
 MagCapture™ microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2
10次

血清•血浆(Serum•Plasma)microRNA提取试剂盒 microRNA Extractor(R) SP Kit

血清•血浆(Serum•Plasma)microRNA提取试剂盒
microRNA Extractor(R) SP Kit

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

血清·血浆(Serum·Plasma)microRNA提取试剂盒血清•血浆(Serum•Plasma)microRNA提取试剂盒                              microRNA Extractor(R) SP Kit

microRNA Extractor(R) SP Kit

 


本产品主要用于提取人(或者实验动物:小鼠等)血清、血浆中microRNA。不使用苯酚和氯仿等有害物质,蛋白酶和离液剂、离心柱组合使用可简便且高效率获得血清·血浆中microRNA。适用于提取血液循环microRNA,各种疾病研究、检测活体转染实验中血液siRNA残留量样本的制备。

血清•血浆(Serum•Plasma)microRNA提取试剂盒                              microRNA Extractor(R) SP Kit

◆试剂盒组成(50次/试剂盒)


(1) Lysis Solution 19 mL×1 bottle
(2) Reducing Agent 50 μL×1 vial
(3) Protease Solution 500 μL×1 vial
(4) Enhancer 500 μL×1 vial
(5) Wash Solution
Ⅰ 12 mL×1 bottle
(6) Wash SolutionⅡ 21 mL×1 bottle
(7) Elution Solution 5 mL×1 bottle
(8) Spin Column 50 columns
(9) Collection Tube 50 tubes



需要以下试剂


1-Butanol(Code No.022-16035)
2-Propanol(Code No.168-21675)

Ethanol(Code No.054-07225)



<用前注意事项>


血浆的抗凝剂请使用EDTA或者柠檬酸。如果使用肝素的话,会影响RNA提取后的PCR检测。

 


◆实验流程


详细实验流程请看相关资料的说明书



正常人血浆microRNA提取·定量结果


内源性has-miR-16定量结果           内源性has-miR-451定量结果

血清•血浆(Serum•Plasma)microRNA提取试剂盒                              microRNA Extractor(R) SP Kit


本产品比以往方法有更高的提取效率(试剂盒·试剂的比较对象)

A公司试剂盒:有机溶剂与硅胶膜柱组合产品

B公司试剂盒:有机溶剂与硅胶膜柱组合产品

C公司试剂:AGPC法产品。

 


正常人血浆·血清microRNA提取·定量结果


内源性has-miR-16 定量结果

血清•血浆(Serum•Plasma)microRNA提取试剂盒                              microRNA Extractor(R) SP Kit


本产品的血浆、血清提取率比其他产品高

左图:正常人血浆(抗凝剂:EDTA)右图:正常人血清

定量检测:TaqMan® MicroRNA Assays(Life Technologies公司

上图显示在血浆·血清提取效率方面,本试剂盒比A公司产品更高。另外,血浆比血清含有更多microRNA。

 


大鼠血浆·血清microRNA提取·定量结果


内源性rno-miR-16 提取▪定量结果

血清•血浆(Serum•Plasma)microRNA提取试剂盒                              microRNA Extractor(R) SP Kit

● 提取对象:实验动物亦可

● 血浆的抗凝剂:EDTA。

● 定量检测:TaqMan® MicroRNA Assays(Life Technologies公

      司)。

● 已确认在实验动物(大鼠)的血浆以及血清的提取效率方面,使用

      本试剂盒比A公司试剂盒高。

回收效率的可重复性评估


                                                        正常人血浆滴加cel-miR-238定量回收结果


血清•血浆(Serum•Plasma)microRNA提取试剂盒                              microRNA Extractor(R) SP Kit

  



● 确认可重复性高

● 定量检测:TaqMan® MicroRNA Assays(Life Technologies公

      司)。

● 左图是添104~108拷贝数的cel-miR-238至正常人血浆(抗凝剂:柠檬

      酸钠)的回收率。

● 在添加104拷贝数/test的低浓度下能够稳定地回收microRNA,回收

      率在60%-80%。与基因组DNA和total RNA相比获取较困难的低分子

      RNA也具有高回收率。

● 注意:将Protocol记录的洗脱液添加量从50 μL提升到100 μL,回收率

      增加5~20%。

相关资料


血清•血浆(Serum•Plasma)microRNA提取试剂盒                              microRNA Extractor(R) SP Kit

说明书

产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
295-71701 microRNA Extractor(R) SP Kit
血清•血浆microRNA提取试剂盒
50次
291-70201 microRNA Isolation Kit, Human/Mouse Ago1 
microRNA纯化试剂盒,人/鼠Ago1
10次
292-66701 microRNA Isolation Kit, Human Ago2 
microRNA纯化试剂盒,人Ago2
10次
292-67301 microRNA Isolation Kit, Mouse Ago2 
microRNA纯化试剂盒,小鼠Ago2
10次
297-70301 microRNA Isolation Kit, Human Ago3 
microRNA纯化试剂盒,人Ago3
10次

microRNA 增强试剂盒 microRNA Booster Kit

microRNA 增强试剂盒
microRNA Booster Kit

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

microRNA 增强试剂盒microRNA 增强试剂盒                              microRNA Booster Kit

microRNA Booster Kit

产品概况

  Stemgent® microRNA Booster 试剂盒增强和简化了 mRNA 的重编程,可用正常或者病人特定类型细胞制备有效的 iPS 细胞系。 microRNA Booster 试剂盒包括 microRNA 重编程混合物和 B18R 重组蛋白。

  microRNA 增强型 mRNA 重编程方法改进了第一代 mRNA 重编程试剂盒,递送更快速的重编程动力学,流水线操作,提供了难以进行重编程类型细胞的重编程效率。 microRNA-增强型方法是 Stemgentm® RNA Reprogramming Kit 和 microRNA Booster Kit、Stemfect™ RNA Transfection Kit 配套使用,至少8天内获得原代 iPS 细胞克隆。该新方法改进了动力学,减少了每次转染 mRNA 的剂量,与基于饲养层细胞 mRNA 重编程方法相比,每个孔减少大约 35%~45% 的 mRNA 量。



◆优势

Stemgent® mRNA 重编程方法

Stemgent® microRNA 增强型 mRNA 重编程方法

重编程效率

>1%

>1%

快速重编程动力学

体细胞 → iPS 细胞

3周

2周

插入突变风险

病毒清除筛选

DNA 载体保留和/或者整合的筛选

与运用病毒相关的生物污染问题

# 每个试剂盒的孔数 of wells per kit(6孔板)

4

9-10(35%-45% /孔节省用量)

重编程底物

成纤维细胞饲养层

细胞外基质

难以重编程和重塑的细胞类型

简单,友好的操作流程 (过夜转染)

◆案例应用


microRNA 增强试剂盒                              microRNA Booster Kit

Figure 1:MicroRNA 增强型 mRNA 重编程实验时间轴。 Stemgent® microRNA 增强型 mRNA 重编程实验步骤已经经过优化,确保在2周时间内制备人 iPS 细胞并可以传代。

microRNA 增强试剂盒                              microRNA Booster Kit

Figure 2:mRNA 重编程实验时间轴。TStemgent RNA 重编程实验流程优化确保在3周内制备人 iPS 细胞并可以传代。

microRNA 增强试剂盒                              microRNA Booster Kit

Figure 3使用 Stemgent-Asterand microRNA 增强型重编程系统制备人 iPS 细胞的时空图片。相差显微镜图片显示第1天细胞的形态。用 Stemgent-Asterand microRNA 增强型重编程系统制备人 iPS 细胞的时空图片。相差显微镜图片显示第1天细胞的形态。

microRNA 增强试剂盒                              microRNA Booster Kit

Figure 4:使用 Stemgent-Asterand microRNA 增强型重编程系统制备人 iPS 细胞的时空图片。相差显微镜图片显示第3天细胞的形态。

microRNA 增强试剂盒                              microRNA Booster Kit

Figure 5:使用 Stemgent-Asterand microRNA 增强型重编程系统制备人 iPS 细胞的时空图片。相差显微镜图片显示第5天细胞的形态。

microRNA 增强试剂盒                              microRNA Booster Kit

Figure 6:使用 Stemgent-Asterand microRNA 增强型重编程系统制备人 iPS 细胞的时空图片。相差显微镜图片显示第7天细胞的形态。

microRNA 增强试剂盒                              microRNA Booster Kit

Figure 7:使用 Stemgent-Asterand microRNA 增强型重编程系统制备人 iPS 细胞的时空图片。相差显微镜图片显示第9天细胞的形态。

microRNA 增强试剂盒                              microRNA Booster Kit

Figure 8:使用 Stemgent-Asterand microRNA 增强型重编程系统制备人 iPS 细胞的时空图片。相差显微镜图片显示第 12 天细胞的形态。

microRNA 增强试剂盒                              microRNA Booster Kit

Figure 9:使用 Stemgent-Asterand microRNA 增强型重编程系统制备人 iPS 细胞的时空图片。第 12 天,用 TRA-1-81(多能性标记物)荧光染色 iPS 细胞。

◆相关产品


货号

名称

规格

00-0073

microRNA Booster Kit

microRNA增强试剂盒

1 kit

00-0071

 Stemgent® mRNA Reprogramming Kit

 mRNA 重编程试剂盒

1 kit

00-0075

Stemgent® StemRN™ SR Reprogramming Kit

StemRNATM-SR重编程试剂盒

1 kit

注:本品已停产,升级版本已推出:Stemgent® StemRNA™ 3rd Generation Reprogramming Kit(又名 StemRNA-NM Reprogramming Kit,产品编号:00-0076)。

试剂盒成分

 2 瓶 – microRNA Reprogramming 混合物Ⅰ(20 μM)(货号 05-0036),35 μL

● B18R 重组蛋白,不含载体(货号. 03-0017),50 μg

 

保存和保质期 Storage and Stability

● 将 microRNA 重编程混合物和 B18R 蛋白保存在 -70℃以下。

● 按照指示的保存,收到货后至少可以保存3个月。

 

质量控制

 Stemgent® microRNA Booster 试剂盒用人新生的包皮成纤维细胞成功进行基于 RNA 重编程。所有试剂盒组分都灭过菌,检测不含支原体。


推荐使用

● Stemgent® microRNA Booster Kit 用于 microRNA-增强型 mRNA 重编程

● 参考制备 NuFF-条件性 Pluriton 培养基用于制备条件性重编程培养基。

● 参考操作手册: Stemgent® mRNA 重编程系统,关注实验细节和材料处理。

Specification Sheets

 00-0073 Product Specification Sheet

Safety Data Sheets

03-0017 Safety Data Sheet

00-0073 Safety Data Sheet

05-0036 Safety Data Sheet

Protocols

   microRNA Enhanced mRNA Reprogramming

Application Notes

     MicroRNA Application Note

Product Sheets

      Product Sheet_RNA Reprogramming

 

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        TRA-1-81 Antibody (DyLight™ 488), Mouse anti-Human (09-0069)

        Nanog Antibody (Affinity Purified), Rabbit anti-Mouse/Human (09-0020)

  Oct4 Antibody (Affinity Purified), Rabbit anti-Mouse/Human (09-0023)

        SSEA-4 Antibody (Purified), Mouse anti-Human (09-0006)

        TRA-1-60 Antibody (Purified), Mouse anti-Human (09-0010)

        TRA-1-81 Antibody (Purified), Mouse anti-Human (09-0011)

        mRNA Reprogramming Factors Set: hOKSML (00-0067)

 

Additional Publications

7q11.23 dosage-dependent dysregulation in human pluripotent stem cells affects transcriptional programs in disease-relevant lineages

Josowitz R, Lu J, Falce C, D’Souza SL, Wu M, Cohen N, Dubois NC; Zhao Y; Sobie EA; Fishman GI; Gelb BD. Identification and purification of human induced pluripotent stem cell-derived atrial-like cardiomyocytes based on sarcolipin expression. PLoS ONE 9(7): e101316 (2014)

 Briggs SF; Dominguez AA; Chavez SL; Reijo Pera RA. "XIST in human preimplantation embryos and iPSCs." Stem Cells 33:1771 (2015)

 

产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
00-0073 microRNA Booster Kit
microRNA增强试剂盒
1 kit