bellbrooklabs新品上市
Transcreener®cGAMP cGAS分析
使用均质的，与HTS兼容的Transcreener cGAS分析方法靶向cGAS-STING途径
利用Transcreener cGAMP cGAS分析法发现cGAS抑制剂
Transcreener cGAMP cGAS分析法直接测量由环状GMP-AMP合酶（cGAS，C6orf150、2'3'-cGAMP合酶）产生的环状GMP-AMP （cGAMP）。通过测量cGAMP的产量，研究人员可以有效地确定 cGAS酶的活性。该测定法提供了一个强大的工具，可以筛选整个化合物库中的cGAS调节剂，以 帮助找到针对cGAS-STING途径的新疗法。
cGAS是STING途径中的重要信使
真核细胞胞质溶胶中DNA的存在是感染或细胞损伤的指示，并且在I型干扰素（IFN）诱导的驱动下引发强烈的免疫反应。cGAS是细胞质中双链DNA的非常灵敏的传感器。DNA的结合激活了该酶，从而产生了*的环状二核苷酸第二信使cGAMP，它充当STING（干扰素基因刺激剂）受体的激动剂，从而导致I型干扰素应答。
直接检测cGAMP以测量cGAS酶活性
Transcreener cGAMP FP分析-了解更多信息
Transcreener cGAMP cGAS TR-FRET分析技术手册（PDF）
应用领域
- 测量cGAS的酶活性
- 筛选cGAS抑制剂的复合文库
- 量化抑制剂效力
- 确定抑制剂-cGAS停留时间
特征
- 直接检测未标记的cGAMP
- 易于使用，同质，一步式
- 初始速度条件下的稳健分析Z'> 0.7
- 远红色荧光读数一定程度地减少了化合物干扰
- 一种安全的非放射性方法
- 可用于FP或TR-FRET读数
易于使用，混合阅读，HTS就绪分析
Transcreener cGAS分析法采用易于HTS使用，混合阅读的格式。运行您的酶反应，添加 Transcreener试剂，然后阅读板。该测定与96、384和1536孔格式兼容。
在cGAS初始速度下检测cGAMP
当使用标准曲线将原始数据转换为cGAMP时，该测定法显示线性。cGAS被双链DNA激活，并需要ATP和GTP底物来生产cGAMP。
全长人cGAS滴定
线性响应
抑制剂筛选和执行SAR
Transcreener cGAS分析法旨在以高通量格式筛选化合物库。还可以使用该测定法进行随访SAR，从而轻松确定抑制剂的效价。
1600复合先导筛
获取准确的剂量响应测量
说明了cGAS酶的DNA和底物依赖性
该测定法准确地证明了cGAS酶的特征。在GTP和ATP均存在的情况下，双链DNA激活了产生cGAMP的酶。一个45个碱基对的ISD（干扰素刺激性DNA）和一个60个碱基对的HSV（单纯疱疹病毒）DNA均可激活该酶。该测定法对cGAMP具有很高的亲和力，即使存在其他核苷酸也可以检测。
dsDNA激活cGAS酶
对ATP和GTP的依赖
出色的信号稳定性
该测定显示24小时以上的信号稳定性。这样的印版稳定性对于大型的高通量筛选至关重要，由于大量样品需要大量时间才能完成。
标准曲线包括ATP，GTP，dsDNA和cGAMP的滴定。在每个时间点读取相同的板。
cGAS分析服务
有兴趣推进您的程序，但不想内部进行分析吗？我们的科学家可以提供帮助！BellBrook的科学家将利用其丰富的生物化学和酶学专业知识与您合作，并加快您的cGAS计划。
潜在客户发现服务包括：
- 抑制剂筛选–识别或确认靶标的活性。
- 抑制剂效能分析–靶标和/或相关蛋白的剂量反应。快速IC 50结果。
- 停留时间测量–使用“跳跃稀释”酶法测定k off。
- 作用机理研究–动力学分析以定义抑制方式。
| Component | Notes |
|---|---|
| cGAMP Antibody | Antibody specific to the dinucleotide cGAMP. |
| Tracer | When displaced, changes in fluorescence can be read in an FP or TR-FRET depending on the assay format. |
| Stop & Detect Buffer B, 10X | A buffer that can be used to stop enzyme reactions for an endpoint readout. |
| ATP | ATP can be used for the enzyme reaction and standard curve. |
| GTP | GTP can be used for the enzyme reaction and standard curve. |
| cGAMP | cGAMP can be used to create a standard curve. |
| Interferon Stimulatory DNA | ISD is a 45-bp oligomer used to activate the cGAS enzyme. |
What You Will Need
| Component | Notes |
|---|---|
| cGAS Enzyme | You can purchase active cGAS enzyme directly through BellBrook Labs. |
| Enzyme Buffer | We routinely use enzyme buffer containing 20 mM TRIS (pH 7.5), 5 mM MgCl2, 0.01% Brij-35, and 1% DMSO (test compound solvent). Use the buffer that is a best fit for your enzyme conditions |
| Assay Plates | You can purchase assay plates directly through BellBrook Labs.
FP – An entirely black plate with a non-binding surface is required. We suggest Corning 384-well plates, Cat. #4514. TR-FRET – An entirely white plate with a non-binding surface is required. We suggest Corning 384-well plates Cat. #4513 |
Transcreener cGAMP cGAS Assay Kits
| Cat. No. | Product Description | Price |
|---|---|---|
| 3024-1K | Transcreener cGAMP cGAS FP Assay (1,000 Assay, 384 Well) | $798.00 |
| 3024-10K | Transcreener cGAMP cGAS FP Assay (10,000 Assay, 384 Well) | $4,615.00 |
| 3024-100K | Transcreener cGAMP cGAS FP Assay (10 X 10,000 Assay, 384 Well) | $23,075.00 |
| 3025-1K | Transcreener cGAMP cGAS TR-FRET Assay (1,000 Assay, 384 Well) | $875.00 |
| 3025-10K | Transcreener cGAMP cGAS TR-FRET Assay (10,000 Assay, 384 Well) | $4,989.00 |
| 3025-100K | Transcreener cGAMP cGAS TR-FRET Assay (10 X 10,000 Assay, 384 Well) | $24,950.00 |
cGAS Enzyme Ordering Information
* For custom or bulk orders (over 100 μg) please contact us (info@bellbrooklabs.com) for a quote.
| Cat. No. | Product Description | Price |
|---|---|---|
| 2227 | Recombinant cGAS Enzyme, Active, Human, Full-Length, 10 µg | $399.00 |
| 2228 | Recombinant cGAS Enzyme, Active, Human, Full-Length, 100 µg | $1,398.00 |
Learn More About Active Human cGAS Enzyme
cGAS Screening Bundles
* Includes enough enzyme for respective wells when used at 1.75 μg/mL (30 nM)
| Cat. No. | Product Description | Price |
|---|---|---|
| 3024-1K-B | Includes Transcreener cGAS FP Assay 1K Kit and 20 µg Human cGAS Enzyme | $1,275.00 |
| 3024-10K-B | Includes Transcreener cGAS FP Assay 10K Kit and 200 µg Human cGAS Enzyme | $6,670.00 |
| 3025-1K-B | Includes Transcreener cGAS TR-FRET Assay 1K Kit and 20 µg Human cGAS Enzyme | $1,345.00 |
| 3025-10K-B | Includes Transcreener cGAS TR-FRET Assay 10K Kit and 200 µg Human cGAS Enzyme | $6,995.00 |
Assay Plates for FP
| Cat. No. | Product Description | Price |
|---|---|---|
| 2233 | Corning 96-Well Black Assay Plates (#3686), 3-Pack (200+ Assays) | $40.00 |
| 2229 | Corning 384-Well Black Assay Plates (#4514), 3-Pack (1,000+ Assays) | $45.00 |
| 2230 | Corning 384-Well Black Assay Plates (#4514), 30-Pack (10,000+ Assays) | $400.00 |
Assay Plates for TR-FRET
| Cat. No. | Product Description | Price |
|---|---|---|
| 2234 | Corning 96-Well White Assay Plates (#3642), 3-Pack (200+ Assays) | $40.00 |
| 2231 | Corning 384-Well White Assay Plates (#4513), 3-Pack (1,000+ Assays) | $50.00 |
| 2232 | Corning 384-Well White Assay Plates (#4513), 30-Pack (10,000+ Assays) | $450.00 |