标签归档：冻存液

无血清细胞冻存液的制备方式和使用步骤

发表于由
　　无血清细胞冻存液是一种用于保存细胞的特殊液体，通常在细胞培养和实验室研究中使用。相比传统的含血清细胞冻存液，不含动物血清成分，可以减少细胞培养中的变异性和干扰，有助于提高实验结果的准确性和可重复性。配方通常包括基本培养基、冻存剂和其他辅助成分。基本培养基提供细胞所需的营养物质和生长因子，冻存剂则有助于细胞在冷冻过程中维持完整性和生存性。其他辅助成分可能包括抗氧化剂、保护剂等，以保护细胞免受冷冻过程中的氧化损伤和细胞死亡。
 

 

　　无血清细胞冻存液的制备和使用步骤如下：
　　1.准备冻存液的配方和所需器具。
　　2.将基本培养基加热至37摄氏度，使其达到体温。
　　3.将冻存剂加入基本培养基中，充分溶解。
　　4.将冻存液过滤消毒，确保无菌。
　　5.将细胞悬液与冻存液混合均匀，制成冻存样品。
　　6.将冻存样品分装至冻存管或冻存盒中。
　　7.将冻存样品放入-80摄氏度或液氮罐中冷冻保存。
　　无血清细胞冻存液的优点包括：
　　1.减少细胞培养中的变异性和干扰，提高实验结果的准确性。
　　2.避免使用动物血清，减少实验中可能存在的生物风险。
　　3.有助于细胞的长期保存和传代，方便实验室研究和应用。

无血清细胞冻存液的制备步骤及重要性体现

发表于由
　　无血清细胞冻存液是一种用于保存生物样品中细胞的冷冻保存液，其中不含血清成分。通过合理选择配方和制备过程，可以有效保护细胞的完整性和活力，在细胞研究和临床应用中发挥重要作用。
　　
　　制备无血清细胞冻存液的步骤如下：
　　
　　1.准备所需材料和试剂，并进行无菌操作，以防止污染。
　　
　　2.在无菌条件下称取适量的细胞培养基基础液，并将其倒入一个无菌容器中。
　　
　　3.加入适量的抗生素/抗菌药物，按照使用说明或实验室标准浓度进行配比。
　　
　　4.添加胺基酸和营养物质，使其浓度符合培养所需。
　　
　　5.加入相应浓度的冻存保护剂，一般为DMSO或甘油，注意搅拌均匀。
　　
　　6.添加适量的补充物质，如缓冲剂或pH调节剂，以确保液体的稳定性和适宜的pH值。
　　
　　7.混合液体并充分搅拌，确保各成分均匀混合。
　　
　　8.过滤冻存液以去除悬浮颗粒和杂质，保证最终制备的液体无菌。
　　
　　无血清细胞冻存液在细胞研究和临床应用中具有重要的意义：
　　
　　1.冻存细胞：常用于冷冻保存细胞，以便将其长期保存并在需要时恢复使用。冻存的细胞可以用于后续的实验研究、细胞培养和组织工程等领域。
　　
　　2.细胞移植：可以保护细胞在移植过程中的完整性和活力，提高细胞移植的成功率。这对于干细胞治疗、组织工程和再生医学等领域具有重要意义。
　　
　　3.质量控制：配方可以根据实验需要进行调整和优化，以确保细胞的冻存质量和活力。不同类型的细胞可能对配方有所差异，因此针对特定的细胞类型，可以通过调整配方来获得最佳的冻存结果。

Bambanker无血清细胞冻存液说明书

发表于由

 

Bambanker无血清细胞冻存液说明书
即用型无血清细胞冻存液
Bambanker Serum-Free Cell Freezing Medium
产品编号: BB01

 

冷冻保存哺乳动物细胞在生物学研究中非常有价值和普遍。为了防止技术原因(培养操作)使细胞污染或物理原因(培养箱故障)使长期培养功亏-篑。 此外,长期多次的培养和传代，导致细胞在遗传学性状上的老化和分化都是促使在接收或生成新细胞系后首要考虑的策略就是冻存细胞。低温冻存对于维持一些特殊细胞株的遗传特性极为重要。 细胞深低温保存的基本原理是:在-70°C以下时,细胞内的酶活性均己停止，即代谢处于停止状态,故可以长期保存。细胞低温保存的关键,在于通过0°C到-20C阶段的处理过程。在此温度范围内,冰晶呈针状，极易招致细胞的严重损伤。
如何减少或者避免冰晶形成，如同存细菌时用的甘油，DMSO (二 甲基亚砜)是-种渗透性保护剂,能够降低细胞冰点,减少冰晶的形成，减轻自由基对细胞损害，改变生物膜对电解质、药物、毒物和代谢产物的通透性。冻存液中加入后可以使溶液冰点降低,加之在缓慢冻结条件下,细胞内的水分逐渐透出，从而减少了冰晶的形成，从而避免细胞的损伤。这就是为什么低温冻存细胞时为什么要采用慢冻的一个重要原因。
一旦从生长培养基转移到冷冻培养基中，就要执行慢冻的过程。尽管冷冻细胞系是通常执行的程序，但是当没有合适的冷冻器具时,或者由于存在血清，额外洗涤或操作不当时，就会出现问题。当然,这个问题是在细胞复苏(快融)后才发现的。发现复苏后的细胞大部分或者全部都是死细胞,甚至还有不容易发现的整个冻存过程的不当导致的细胞分化。所有这些问题和担忧,都可以通过BambankerTM细胞冷冻培养基试剂家族来解决。BambankerTM的成分允许直接将细胞在-80°C或液氨中冷冻保存, 从而避免了对额外设备的求,粗也避免了耗时且复杂的梯度逐渐冷冻方案。

 

 

产品特色
●可在-80°C或- 196°C的温度下长期冻存细胞
●细胞复苏后的活率高
●即用型冷冻质-无需程序或顺序降温冷冻
●无血清-无污染风险
●可用于所有已知细胞系
●保质期长

 

 省时省事省力省细胞(Save time while saving your cells)
细胞冷培养基BambankerTM允许在-80°C (或液氮)中怜保存细胞,从而避免了对额外的设备的需求,避免了耗时且复杂的受控冷冻方案。只需(1) 离心收获细胞，(2) 抽吸走培养基，(3) 细胞重悬浮在BambankerTM中(4) 混匀转移到冷冻管中(5) 储存在-80°C下。无需程序降温或顺序降温! BambankerTM是一 种无血清的冷冻保存介质， 可以立即使用,粗可以在冰箱中保存长达两年。提供20毫升规格的包装,使BambankerTM冷冻培养基非常适合实验室的各个成员独立使用。如今,这种创新的细胞冷冻培养基BambankerTM已成为日本市场的，其特点是发表了许多篇文章,涉及非常敏感的细胞系。

血清增加了长期储存的差异(Serum adds variation to long-term storage)
所有BambankerTM产品均不含血清。含有血清的冷冻保存培养基具有回收率波动和成分不确定的缺点。冻存于含血清的培养基中的细胞的实验可重复性可能会受到批次之间血清差异的影响，因为蛋白质和其他生物分子的组成和浓度会随每批血清而变化。解冻和使用这种含血清培养基的细胞时，可能会导致问题。因为BambankerTM的每种成分都经过精确定义，因此您可以放心，在不同时间存储的细胞都将有一致的效率。
BambankerTM可防止不期望的分化(BambankerTM prevents undesired differentiation)
不期望的细胞分化也可能是冷冻细胞长期保存的一个问题。所有Bambanker试剂均旨在一定程度地减少此问题。 对于特别麻烦的细胞，Bambanker不含DMSO的配方经过特殊配制，可防止可能与含DMSO的冷冻保存试剂相关的问题。因此, 请加入越来越多的实验室的选择,使用Bambanker保护其细胞系!

 

药用级细胞冻存液（非程序）说明书

发表于由

药用级细胞冻存液（非程序）说明书

产品详情

货号

规格

价格

78EC10008-100ml

100ml

￥1800.00

78EC10008-50mL

50mL

￥1200.00

 产品描述

适用于多种细胞的冷冻保存，尤其适用于间充质干细胞的冷冻保存。

产品性质

1. 外观：澄清透明溶液。

2. 装量：应不低于标示装量。

3.  pH值：7.0～7.6（25±2℃）。

4. 渗透压：1650～2025 mOsmol/Kg

5. 无菌：应无菌生长。

6. 支原体：应符合规定。

7. 内毒素：＜0.25EU/mL。

产品特点

    无血清，无动物源组分，安全性高

    一步冻存细胞，无需程序降温

    CDE药用辅料登记号进行中 

    无菌、无支原体，低内毒素 

产品组分

含有甘氨酸，DMSO以及磷酸盐缓冲液的水溶液。

使用方法

使用方法

细胞冻存步骤

1. 常规方法收集对数期的细胞。

2. 根据冻存密度确定冻存液的用量。

3. 将所需数目的细胞悬液置于离心管中，离心去上清，收集细胞沉淀。

4. 加入适量的增强型无血清细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度约为5×10^5/ml～1×10^7/ml。轻柔混匀细胞，制成细胞混合液。

5. 将离心管中的细胞混合液分装于已标记的冻存管中，建议每管1ml 或1.5ml。

6. 将冻存管移入-80℃冰箱静置过夜，无需程序降温。

7. 将-80℃过夜的冻存管移入液氮中保存。若短期取用，可于-80℃保存，保存时间与效果因细胞类型而异。

细胞复苏步骤:

1.     室温或 37℃预温细胞培养基，其体积为冻存液体积的9倍。

2.     从液氮中取出冻存管，置于37℃水浴并不断轻摇。待剩余1粒米大小的冰块时，迅速移出水浴。

3.     吸取细胞悬液至培养基中，轻柔混匀，离心、去上清，获得细胞沉淀备用。

实验案例分析

 

 

注意事项

1. 本产品不可用于临床治疗。

2. 贮存期间应密封保存，发现内包装破损后慎用。

     3. 使用后产生的废弃物应按照使用者所在单位、实验室管理规定处理；如果产品接触过传染性细胞样本，应当遵守相应法规，不得随意丢弃.

运输及保存方法

2～8℃密封保存，有效期2年。

药用级细胞冻存液说明书

发表于由

药用级细胞冻存液说明书

产品详情

货号

规格

价格

78EC10007-100ml

100ml

￥1800.00

78EC10007-50mL

50mL

￥1200.00

产品描述

本品采用联合渗透性和非渗透性保护的方案，无动物源成分的即用型细胞冻存液，采用联合渗透性和非渗透性保护液的方案，在超低温（-80℃～-196℃）环境下为细胞提供一个安全、有效的保护环境，冻存复苏后细胞活率可达90%以上。

产品性质

外观：无色至淡黄色澄清液体

pH值：25±2℃时，7.0-7.6

渗透压：2000-2500mOsmol/kg

无菌：应无菌生长

支原体：阴性

内毒素：<0.25 EU/mL

产品特点

适用于-80℃～-196℃冷冻保存人免疫细胞，间充质干细胞、肝细胞等。

      •无血清，无动物源成分

      •即用即取

      •CDE药用辅料登记正在进行中（登记号：F20210000271）

      •无菌、无支原体、低内毒素

使用方法

使用方法

细胞冻存

1.      本品使用前应预冷至2-8℃。

2.      检查并确认细胞无真菌、细菌、支原体污染，冻存前的细胞处于增殖旺盛期最佳。

3.      收集细胞溶液离心去上清后获得细胞沉淀，细胞重悬后计数。

4.      确定细胞冻存密度和体积，准备好相应体积的冻存液，推荐细胞冻存范围为2*106-1*107/mL。

5.      加入适量冻存液重悬细胞，将细胞悬液分装至冻存管或袋中，用冻存液重悬后的细胞在室温或2-8℃不超过10min。

6.      程序降温至-80℃（建议程序降温仪，采用降温盒降温需过夜）后移入液氮长期保存。若细胞短期内使用，亦可于-80℃保存（不超过3个月）。

细胞复苏

7.      室温平衡或37℃预热培养基备用。

8.      从液氮中取出细胞冻存管，置于37℃水浴并不断轻摇，待剩余米粒大小冰块时，迅速移出水浴。

9.      吸取细胞悬液至备用的培养基中（细胞悬液与培养基比例为1：9），轻柔混匀，离心、去上清，获得细胞用于后续实验。

实验案例分析

运输及保存方法

2-8℃保存，有效期2年。

BAMBANKER即用型无血清细胞冻存液

发表于由

 

规格： 120mL（302-14681）
规格： 20mLx5(306-14684)
规格： 20ml(306-95921)

BAMBAMBANKER™

无血清细胞冻存液
 

BAMBANKER是一种无血清细胞冻存液。可在-80℃长期保存细胞（肿瘤细胞和常规细胞）。

◆产品特性

●  即用型细胞冻存液

●  无需分步降温，直接使用

●  无需稀释

●  无需程序降温盒

●  -80℃长期保存

●  无血清

 

◆无血清冻存液的优点

　　与含血清类型相比，批次间的成分组成差异小，可保持稳定的品质。

　　不含血清，因此没有因动物源的未知成分和感染物质所产生的影响与风险。

　　可对无血清驯化细胞进行冷冻，节省再驯化步骤。

 

 

◆操作流程

 

　　1）收集对数生长期的细胞（5×105-1×107个细胞）

　　2）用1mL该细胞冻存液悬浮细胞，置于冻存管中，不需预冷，直接-80℃冷冻保存，也可用液氮快速冷冻细胞

　　3）用恒温箱或者水浴锅快速复苏细胞

　　　　*冷冻细胞必须处于对数生长期

 

 

◆无菌检测**

　　内毒素：生色底物法

　　支原体：荧光抗体法

　　真菌和细菌：依据日本药典

　　（**：可索取检验证书）

 

 

 

BAMBANKER® Direct

 

　　BAMBANKER Direct是“无血清型”细胞冻存液。

 

 

◆BAMBANKER® Direct无需离心收集细胞

①不需冻存前预处理，操作简便

②不需稀释，直接使用

③无需分步降温，直接使用

④可快速、长期冻存细胞（-80℃或液氮）

⑤不含血清

 

 

◆BAMBANKER® Direct冻存步骤VS常规冻存步骤

 

　　使用本产品无需经过离心等复杂步骤，只需往培养基内添加与培养液等量的BAMBANKER Direct，再分装到冻存管，置于-80℃便可冻存细胞。
 

◆应用

 

【BAMBANKER使用例】
 

 细胞名称 保存时间 生存率
  BAMBANKER 公司A（含血清) 公司A（不含血清）
P3U1 12个月 95% 95% 70%
（小鼠骨髓瘤细胞系）
K562 12个月 73% 70% 60%
（人白血病细胞系）
人体胃黏膜上皮细胞 10个月 100% 62% 56%
human γδT cells  10个月 65% 37% 35%
（人γδT细胞）
 Daudi 12个月 100% 100% 92%
（人 B细胞系）
PC12 11个月 95% 59% 20%
（大鼠源肾上腺嗜铬细胞瘤）
human B cell line  9个月 74% 54% 35%
（人B细胞系）
OKT4 12个月 100% 100% 92%
（小鼠杂交瘤细胞）
B细胞系 10个月 56% 40% 18%
(猴）

 

【低温冻存实验证明以下细胞保存完好】
 

3T3‐L1（小鼠前脂肪细胞系） A431（人扁平上皮癌细胞系） BAEC（牛主动脉血管内皮细胞系）
Balb/3T3（小鼠成纤维细胞系） C2C12（小鼠骨骼肌细胞系）  Daudi（人 B细胞系）
ECV304（人脐静脉内皮细胞系） H295R（肾上腺皮质细胞） HEK293（人胎儿肾细胞系）
HEK293T（人胎儿肾细胞系） HeLa（人子宫颈癌细胞系） HeLa S3（人子宫颈癌细胞系）
HepG2（人肝癌细胞系） HFF（人正常成纤维细胞系） Huh7（人肝癌细胞系）
Jurkat（人白血病T细胞系） K562（人慢性骨髓性白血病细胞系） KATOIII （人胃癌上皮细胞系）
KLM‐1（人胰腺癌细胞系） MDCK（犬肾小管上皮细胞系） MEF（小鼠胚胎成纤维细胞）
NIH3T3（小鼠胎儿皮肤细胞） OKT4（小鼠杂交瘤细胞） OP9（小鼠骨髓基质细胞）
P3U1（小鼠骨髓瘤细胞系） PANC‐1（人胰腺癌细胞系） PC12（大鼠源肾上腺嗜铬细胞瘤）
RPE（人细膜上皮细胞系） SNL（小鼠胚胎成纤维细胞） TSU‐Pr1（人前列腺癌细胞系）
Vero（非洲绿猴肾细胞系） human γδT cells （人γδT细胞） human B cell line （人B细胞系）
猴B细胞系 人外周血活化淋巴细胞 永生化人肌肉细胞
小鼠脾脏活化淋巴细胞 小鼠ES细胞系 人胃上皮细胞

　ES细胞（小鼠）使用实例。

T.Hikichi,et al; Differentiation Potential of Parthenogenetic Embryonic Stem Cells Is Improved by Nuclear Transfer, Stem Cells, 2007, 25, 46-53

产品编号 产品名称 产品规格
302-14681 BAMBANKER
 BAMBANKER冻存液		 120mL
306-14684 BAMBANKER
 BAMBANKER冻存液		 20mLx5
306-95921 BAMBANKER Direct
 BAMBANKER直接冻存液		 20m

我们公司zui大优势是强大的采购，

1：基本什么都能进口，血清，抗体，耗材，还有部分限制进口的，

2：货品全，现经营过700多个品牌，基本所有生物试剂耗材都可以进口，特别是冷偏的产品那就更有优势，

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7：我们还是invitrogen,qiagen,Midland BioProducts Corporationam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知名*批发，欢迎合作。

 

BAMBANKER即用型无血清细胞冻存液

发表于由

 

规格： 120mL（302-14681）
规格： 20mLx5(306-14684)
规格： 20ml(306-95921)

BAMBAMBANKER™

无血清细胞冻存液
 

BAMBANKER是一种无血清细胞冻存液。可在-80℃长期保存细胞（肿瘤细胞和常规细胞）。

◆产品特性

●  即用型细胞冻存液

●  无需分步降温，直接使用

●  无需稀释

●  无需程序降温盒

●  -80℃长期保存

●  无血清

 

◆无血清冻存液的优点

　　与含血清类型相比，批次间的成分组成差异小，可保持稳定的品质。

　　不含血清，因此没有因动物源的未知成分和感染物质所产生的影响与风险。

　　可对无血清驯化细胞进行冷冻，节省再驯化步骤。

 

 

◆操作流程

 

　　1）收集对数生长期的细胞（5×105-1×107个细胞）

　　2）用1mL该细胞冻存液悬浮细胞，置于冻存管中，不需预冷，直接-80℃冷冻保存，也可用液氮快速冷冻细胞

　　3）用恒温箱或者水浴锅快速复苏细胞

　　　　*冷冻细胞必须处于对数生长期

 

 

◆无菌检测**

　　内毒素：生色底物法

　　支原体：荧光抗体法

　　真菌和细菌：依据日本药典

　　（**：可索取检验证书）

 

 

 

BAMBANKER® Direct

 

　　BAMBANKER Direct是“无血清型”细胞冻存液。

 

 

◆BAMBANKER® Direct无需离心收集细胞

①不需冻存前预处理，操作简便

②不需稀释，直接使用

③无需分步降温，直接使用

④可快速、长期冻存细胞（-80℃或液氮）

⑤不含血清

 

 

◆BAMBANKER® Direct冻存步骤VS常规冻存步骤

 

　　使用本产品无需经过离心等复杂步骤，只需往培养基内添加与培养液等量的BAMBANKER Direct，再分装到冻存管，置于-80℃便可冻存细胞。
 

◆应用

 

【BAMBANKER使用例】
 

 细胞名称 保存时间 生存率
  BAMBANKER 公司A（含血清) 公司A（不含血清）
P3U1 12个月 95% 95% 70%
（小鼠骨髓瘤细胞系）
K562 12个月 73% 70% 60%
（人白血病细胞系）
人体胃黏膜上皮细胞 10个月 100% 62% 56%
human γδT cells  10个月 65% 37% 35%
（人γδT细胞）
 Daudi 12个月 100% 100% 92%
（人 B细胞系）
PC12 11个月 95% 59% 20%
（大鼠源肾上腺嗜铬细胞瘤）
human B cell line  9个月 74% 54% 35%
（人B细胞系）
OKT4 12个月 100% 100% 92%
（小鼠杂交瘤细胞）
B细胞系 10个月 56% 40% 18%
(猴）

 

【低温冻存实验证明以下细胞保存完好】
 

3T3‐L1（小鼠前脂肪细胞系） A431（人扁平上皮癌细胞系） BAEC（牛主动脉血管内皮细胞系）
Balb/3T3（小鼠成纤维细胞系） C2C12（小鼠骨骼肌细胞系）  Daudi（人 B细胞系）
ECV304（人脐静脉内皮细胞系） H295R（肾上腺皮质细胞） HEK293（人胎儿肾细胞系）
HEK293T（人胎儿肾细胞系） HeLa（人子宫颈癌细胞系） HeLa S3（人子宫颈癌细胞系）
HepG2（人肝癌细胞系） HFF（人正常成纤维细胞系） Huh7（人肝癌细胞系）
Jurkat（人白血病T细胞系） K562（人慢性骨髓性白血病细胞系） KATOIII （人胃癌上皮细胞系）
KLM‐1（人胰腺癌细胞系） MDCK（犬肾小管上皮细胞系） MEF（小鼠胚胎成纤维细胞）
NIH3T3（小鼠胎儿皮肤细胞） OKT4（小鼠杂交瘤细胞） OP9（小鼠骨髓基质细胞）
P3U1（小鼠骨髓瘤细胞系） PANC‐1（人胰腺癌细胞系） PC12（大鼠源肾上腺嗜铬细胞瘤）
RPE（人细膜上皮细胞系） SNL（小鼠胚胎成纤维细胞） TSU‐Pr1（人前列腺癌细胞系）
Vero（非洲绿猴肾细胞系） human γδT cells （人γδT细胞） human B cell line （人B细胞系）
猴B细胞系 人外周血活化淋巴细胞 永生化人肌肉细胞
小鼠脾脏活化淋巴细胞 小鼠ES细胞系 人胃上皮细胞

　ES细胞（小鼠）使用实例。

T.Hikichi,et al; Differentiation Potential of Parthenogenetic Embryonic Stem Cells Is Improved by Nuclear Transfer, Stem Cells, 2007, 25, 46-53

产品编号 产品名称 产品规格
302-14681 BAMBANKER
 BAMBANKER冻存液		 120mL
306-14684 BAMBANKER
 BAMBANKER冻存液		 20mLx5
306-95921 BAMBANKER Direct
 BAMBANKER直接冻存液		 20m

 

iStock 人来源细胞冻存液

发表于由

iStock
人来源细胞冻存液

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

人来源细胞冻存液iStock 人来源细胞冻存液

iStock

iStock 人来源细胞冻存液



◆比较LYMPHOTEC目前使用的含血清冻存液与iStock的性能


iStock 人来源细胞冻存液


从 9 名知情同意的健康者血液中，分离出外周血单核细胞（PBMC），并使用OKT3抗体固相培养瓶和LYMPHOTEC本公司的淋巴细胞培养基培养4天。使用含血清冻存液和iStock，将增殖的细胞制备成1.5×107 cells/mL，采用慢速冷冻法，冷冻于-80℃。第二天，转移至液氮罐中，保存7天后解冻，比较回收率（解冻后细胞数/冷冻前细胞数×100%）。

◆iStock使用方法


iStock 人来源细胞冻存液



◆规格


适用细胞：◯人免疫细胞     ◯人间充质干细胞      ◯人iPS细胞     

保存条件：冷藏、避光、2-10℃

无菌检查：◯内毒素：显色法    ◯支原体：培养法    ◯真菌、细菌：琼脂平板表面涂抹法


操作步骤：

1. 细胞冻存   

❶将细胞移至离心管。

❷离心分离（800×g左右，3-5 min），用抽吸器去除上清。向~1.5×107个细胞中加入1 mL的 iStock，缓慢地进行移液。

❸将细胞悬液分注至冷冻管中。

❹在-80℃的低温冷冻箱进行冻存（根据细胞类型，将冷冻管转移至市售的冷冻容器进行冻存）。

❺第二天移至液氮罐中。


iStock 人来源细胞冻存液



2. 细胞解冻    

❶在37°C的温水浴中解冻冷冻管。

❷立即与约10 mL的培养液混合。

❸离心分离（800×g左右，3-5 min），用抽吸器去除上清。

❹在适量的培养液中悬浮，转移至培养容器，开始培养。


注意事项：

◯请勿用于人体。

◯本产品未获得医药用品的相关许可证明。

◯在使用前，先对使用的细胞进行确认测试。

◯对于因本产品的使用问题造成的任何事故或损坏，本公司概不负责。

◯使用上如有疑问，请联系（株）LYMPHOTEC。

点击此处下载产品宣传页


产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
385-19451 iStock 120 mL –

脑组织冻存液 即用型

发表于由

脑组织冻存液
即用型

  • 产品特性
  • 相关资料
  • Q&A
  • 参考文献

即用型脑组织冻存液 即用型

脑组织冻存液

本品是冷冻保存大鼠或小鼠胚胎脑组织用的冻存液。

只要将脑组织放入解冻后的本品中即可实现冻存。

冻存的脑组织在解冻后可通过神经细胞分散溶液（产品编号：291-78001，297-78101）和神经细胞培养基（产品编号：148-09671）进行分散和培养。

◆特点

●　能冻存解剖后的大鼠或小鼠的脑组织。

●　随时可用

◆冻存数据：大鼠海马体（胎生19日）


脑组织冻存液 即用型

总细胞数（cells/vial）

活细胞数（cells/vial）

活细胞比例（%）

活细胞数比
（假设未经过冻存的活细胞数为1）

①

未经冻保

1.74×106

1.65×106

95

1

②

脑组织冻存液（本品）

1.21×106

1.11×106

92

0.67

③

本公司的冻存液（通用动物细胞用）

（含有血清成分）

8.34×105

7.29×105

87

0.44

④

其他公司的冻存液（通用动物细胞用）

（含有血清成分）

3.40×105

2.91×105

86

0.18

与其他公司的产品相比，在使用本品保存的脑组织中，能获得多3倍以上的活细胞。

注意事项

请尽量缩短从开始解剖到一次冷冻开始的时间。（请以从进行动物麻醉到将脑组织放入冷冻保存溶液中的时间控制在1小时之内为标准。）从胚胎中取出的细胞存活率随时间的推移而下降。使用神经细胞分散液能去除死亡细胞，减少得到的细胞总数。冰上操作。

◆实验方案例子


解剖


1.　麻醉小鼠或大鼠。

2.　用70%乙醇对麻醉动物进行全身（包括胡须和尾巴）消毒。

3.　用不锈钢盘将动物送入铺好无尘纸的清洁区。

4.　从妊娠动物中取出胚胎，放入含有L-15溶液的培养皿中。预先将培养皿与L-15溶液的温度调节到4℃。将盛放胚胎的培养皿至于冰块上。

4.　※L-15溶液：含有终浓度为0.05 mg/mL硫酸庆大霉素的Leibovitz's L-15培养基

5.　将胚胎转移到培养皿的盖子上，并使用显微镜快速移除脑组织。

6.　解剖后的脑组织放入另一个装有L-15溶液的培养皿，再将培养皿放置到冰块上。

 


一次冷冻


1.　将从冰箱中取出本品和冷冻用碎冰盒放到清洁区附近。

2.　用镊子把冷冻的脑组织放入本品中，盖好试管盖（放入脑组织前要充分混合保存溶液）。

3.　将试管埋入冷冻用碎冰盒中，试管与冰块要紧密接触（试管要埋入试管盖刚好露出冰面的位置）。

4.　盖上泡沫箱，静置90分钟。

 


二次冷冻


1.　一次冷冻后，将装有组织的试管转移至防冻套管，然后立刻放入超低温冰箱（-80℃）。（防冻套管要直接放置到冰箱内的底面。）

1.　※为了将装有组织的试管的温度变化控制在最小范围，操作时动作要快速。

1.　※进行这一步操作时，需注意样品管盖切勿与保存溶液相接触。

2.　在超低温冰箱（-80℃）中静置3小时。（静置时间可延长30分钟左右。但不能少于3小时。）

2.　※期间避免反复开关冰箱门。

 


保存


1.　二次冷冻后，将装有组织的样品管置于冻存架上，然后立刻放入液氮罐中。

1.　※进行这一步操作时，需注意样品管盖切勿与管内的保存溶液相接触。

◆产品列表


产品编号

产品名称

规格

包装

029-19161

Brain Tissue Freezing Medium
脑组织冻存液

细胞培养用

1 mL×10

◆相关产品

培养基


产品编号

产品名称

规格

包装

148-09671

Neuron Culture Medium
神经细胞用培养基

细胞培养用

100 mL

神经细胞用分散液

产品编号

产品名称

规格

包装

291-78001

Neuron Dissociation Solutions
神经细胞用分散液

细胞培养用

4 set

297-78101

Neuron Dissociation Solutions S
神经细胞用分散液S

细胞培养用

10 set


已知组成培养基/补充剂


产品编号

产品名称

规格

包装

148-09615

NS Basal Medium
NS基础培养基

细胞培养用

500 mL

146-09351

NS Supplement(×50)

细胞培养用

10 mL

149-09721

NS Supplement without Insulin(×50)
NS 添加剂（不含胰岛素）（×50）

细胞培养用

10 mL

145-09723

50 mL

142-09691

NS Supplement without Vitamin A(×50)
NS 添加剂（不含维生素A）（×50）

细胞培养用

10 mL

141-09041

N2 Supplement with Transferrin(Apo)(×100)
N2神经细胞生长添加剂含转铁蛋白（Apo）（×100）

细胞培养用

5 mL

141-08941

N2 Supplement with Transferrin(Holo)(×100)
N2神经细胞生长添加剂含转铁蛋白（Holo）（×100）

细胞培养用

5 mL

073-05391

200 mmol/L L-Glutamine Solution (×100)
200 mmol/L 谷氨酸溶液（×100）

细胞培养用

100 mL


※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。