CleanCap® mRNA 含Capping结构的高活性mRNA

CleanCap® mRNA
含Capping结构的高活性mRNA

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含Capping结构的高活性mRNACleanCap® mRNA                              含Capping结构的高活性mRNA

CleanCap® mRNA

TriLink BioTechnologies开发的CleanCap® mRNA是一种包被了特定蛋白的加帽mRNA。

本系列产品有Cas9、Cre、EGFP、Luciferase、mCherry、β-gal、EPO、OVA(ovalbumin)可供选择。

TriLink公司的CleanCap® mRNA能够作为高活性的mRNA使用,通过Capping(加帽)避免生物体内发生免疫应答,改善in vivo条件下的翻译效率。

◆CleanCap® 是什么?:为mRNA添加Cap 1 结构

TriLink公司的CleanCap® mRNA可以通过在mRNA上添加Capping结构(Cap 1)来避免生物体内发生免疫应答,从而合成具有高翻译效率的mRNA。


CleanCap® mRNA                              含Capping结构的高活性mRNA

◆TriLink公司的CleanCap® mRNA特点

1. 加帽效率高达94%+,可获得更高活性的mRNA。

2. 不会激活模式识别受体,可避免免疫应答

3. 相较于Cap 0结构(ARCA法加帽),in vivo条件下的翻译效率得到了大幅改善

4. 相较于酶加帽法,所需成本大幅降低

5. 加帽修饰mRNA产品系列丰富

◆CleanCap®和ARCA(Anti-reverse capping analog)法的比较

将从以下两点比较ARCA法和CleanCap®加帽的mRNA。

● 加帽效率

● 细胞内蛋白的表达量

加帽效率的比较

分别使用CleanCap®和ARCA加帽表达Fluc的mRNA,比较两者的加帽效率。

结果显示,使用CleanCap® 获得的加帽效率比ARCA法高。

CleanCap®

ARCA

90-99%

60-80%

CleanCap® mRNA                              含Capping结构的高活性mRNA

细胞内蛋白表达水平的比较

分别使用CleanCap®和ARCA法加帽表达EGFP的mRNA后,使其在细胞内表达,并通过荧光显微镜进行观察。

比较以下5种细胞:CHO cells、Foreskin fibroblast cells、iPS derived cardiomyoctyes、Jurkat、MCF 10A

结果显示,无论在哪一种细胞中,使用CleanCap®加帽的EGFP mRNA的蛋白表达水平都更高。


ARCA EGFP mRNA

CleanCap® EGFP mRNA

   CHO Cells

   6 minute fusion Fuse-It-mRNA Kit

   1μg mRNA
   72 h post fusion

CleanCap® mRNA                              含Capping结构的高活性mRNA

CleanCap® mRNA                              含Capping结构的高活性mRNA

   Foreskin fibroblast cells,
   10 minute fusion Fuse-It-mRNA Kit
   1μg mRNA
   24 h post fusion

CleanCap® mRNA                              含Capping结构的高活性mRNA

CleanCap® mRNA                              含Capping结构的高活性mRNA

   iPS derived cardiomyoctyes,
   10 minute fusion Fuse-It-mRNA Kit
   1μg mRNA
   24 h post fusion

CleanCap® mRNA                              含Capping结构的高活性mRNA

CleanCap® mRNA                              含Capping结构的高活性mRNA

Data courtesy of Beniag  

ARCA EGFP mRNA

CleanCap® EGFP mRNA

   Jurkat: 500ng
   mRNA + 1µL
   jetMESSENGER

CleanCap® mRNA                              含Capping结构的高活性mRNA

CleanCap® mRNA                              含Capping结构的高活性mRNA

   MCF 10A: 500ng
   mRNA + 1µL
   jetMESSENGER

CleanCap® mRNA                              含Capping结构的高活性mRNA

CleanCap® mRNA                              含Capping结构的高活性mRNA

Data courtesy of Polyplus-transfection  

CleanCap®与酶加帽法的制备成本比较

计算4 mL(2 mg)和1 mL(400 μg)两种规格制备加帽mRNA时所需的成本。

结果显示,CleanCap®与酶加帽法相比,生产成本更低。

CleanCap® mRNA                              含Capping结构的高活性mRNA

◆与修饰mRNA的组合:置换尿苷

为使mRNA能够高效表达,需最大限度地去除mRNA序列中的Uridine(尿苷),并将残留的Uridine置换为Pseudo Uridine(PseudoU,假尿苷)或5-methoxy Uridine(5moU,5-甲氧基尿苷)。

TriLink公司提供多种CleanCap®与Pseudo Uridine、5-methoxy Uridine组合的mRNA产品。

CleanCap® mRNA                              含Capping结构的高活性mRNA

Thp-1 Dual Cells (InvivoGen)

准备2种表达Fluc的mRNA,正常序列(Standard Fluc)与尽可能去除尿苷的序列(U depleted Fluc),比较两者的表达水平。

此外,在没有进行尿苷置换(wt)、置换为Pseudo Uridine(PseudoU)和置换为5-methoxy Uridine(5moU)的条件下进行比较。

结果显示,在U depleted Fluc(尽可能去除尿苷的序列)和置换为5-methoxy Uridine(5moU:甲氧基尿苷)的序列中,Fluc的表达水平更高。

◆RNA定制合成服务

TriLink公司可提供RNA定制合成服务:化学合成短链RNA服务、转录合成长链RNA。定制项目包含加帽、修饰碱基、缓冲液组成、纯化方法开发等。从使用修饰碱基的向导RNA合成到大规模mRNA合成服务均可提供,可满足客户广泛的需求。

CleanCap® mRNA                              含Capping结构的高活性mRNA

mRNA定制合成(in vitro转录合成)的服务内容

目标回收量:1 mg~

修饰碱基:Pseudouridine, 5-Methoxyuridine, 5-Methylcytidine/Pseudouridine等

加帽试剂:CleanCap®

定制示例

● 只需ORF序列的mRNA合成

● UTR序列和ORF序列的mRNA合成

欢迎与我们联系,进一步了解定制服务。

◆关于TriLink BioTechnologies

CleanCap® mRNA                              含Capping结构的高活性mRNA


TriLink BioTechnologies是一家位于美国圣地亚哥的试剂、药物生产定制公司,专注于核酸、寡核苷酸、加帽类似物的生产和长链RNA合成。

CleanCap® mRNA是TriLink研发的新型共转录加帽法,与常规加帽法相比,可实现高加帽效率蛋白表达效率

TriLink生产符合ICH Q7以及ISO 9001:2015。

◆产品列表

Cas9 mRNA

产品编号

产品名称

产品规格

550-33824

CleanCap Cas9 mRNA

1 mg

552-33823

100 μg

558-33744

CleanCap Cas9 mRNA (5moU)

1 mg

550-33743

100 μg

555-33754

CleanCap Cas9 Nickase mRNA (5moU)

1 mg

551-33751

20 μg

557-33753

100 μg

Cas9 mRNA是在Broad、MIT、Harvard、Iowa、UTokyo以及Rockefeller授予的限制性许可下提供的产品。

Cre mRNA

产品编号

产品名称

产品规格

555-33793

CleanCap Cre mRNA (5moU)

1 mg

559-33791

100 μg

EGFP mRNA

产品编号

产品名称

产品规格

555-33793

CleanCap EGFP mRNA

1 mg

559-33791

100 μg

552-33703

CleanCap EGFP mRNA (5moU)

1 mg

556-33701

100 μg

mCherry mRNA

产品编号

产品名称

产品规格

556-33723

CleanCap mCherry mRNA (5moU)

1 mg

550-33721

100 μg

Luciferase mRNA

产品编号

产品名称

产品规格

555-33813

CleanCap FLuc mRNA

1 mg

559-33811

100 μg

559-33713

CleanCap FLuc mRNA (5moU)

1 mg

553-33711

100 μg

553-33733

CleanCap Renilla mRNA (5moU)

1 mg

557-33731

100 μg

β-gal mRNA

产品编号

产品名称

产品规格

559-33833

CleanCap beta gal mRNA

1 mg

553-33831

100 μg

554-33763

CleanCap beta gal mRNA (5moU)

1 mg

558-33761

100 μg

EPO mRNA

产品编号

产品名称

产品规格

559-33774

CleanCap EPO mRNA (5moU)

1 mg

551-33773

100 μg

OVA mRNA

产品编号

产品名称

产品规格

558-35503

CleanCap Ova mRNA

1 mg

552-35501

100 μg

558-33783

CleanCap Ova mRNA (5moU)

1 mg

552-33781

100 μg

◆相关产品

加帽试剂

产品编号

产品名称

产品规格

559-35511

CleanCap Reagent AG

1 μmol

553-35514

5 μmol

555-35513

10 μmol

553-35531

CleanCap Reagent (3' OMe) AG

1 μmol

557-35534

5 μmol

559-35533

10 μmol

※ 本页面产品仅供研究用,研究以外不可使用。