Protein G是一种分离自G Streptococci的细胞壁蛋白，它可通过其Fc片段结合哺乳动物IgG。
重组protein G含有高亲和结合位点，减少了非特异性吸附。
Protein G和Protein A有不同的lgG结合特性，相比Protein A， Protein G对牛、羊、马等多克隆抗体有更强的结合力，
它还可以结合不能与Protein A很好结合的大鼠lgG、人lgG3和小鼠lgG1，具体结合能力见表2。
Protein A和Protein G对不同抗体的结合能力
|
种属 |
亚型 |
Protein A 结合力 |
Protein G 结合力 |
|
Human |
IgA |
varible |
— |
|
IgD |
— |
— |
|
|
IgE |
— |
— |
|
|
IgG1 |
++++ |
++++ |
|
|
IgG2 |
++++ |
++++ |
|
|
IgG3 |
— |
++++ |
|
|
IgG4 |
++++ |
++++ |
|
|
IgGM |
varible |
— |
|
|
Avian egg yolk |
IgY |
— |
— |
|
Cow |
|
++ |
++++ |
|
Dog |
|
++ |
+ |
|
Goat |
|
— |
++ |
|
Guinea pig |
IgG1 |
++++ |
++ |
|
IgG2 |
++++ |
++ |
|
|
Hamster |
|
+ |
++ |
|
Horse |
|
++ |
++++ |
|
Koala |
|
— |
+ |
|
Liama |
|
— |
+ |
|
Monkey(rhesus) |
|
++++ |
++++ |
|
Mouse |
IgG1 |
+ |
++++ |
|
IgG2a |
++++ |
++++ |
|
|
IgG2b |
+++ |
+++ |
|
|
IgG3 |
++ |
+++ |
|
|
IgM |
variable |
— |
|
|
Pig |
|
+++ |
+++ |
|
Rabbit |
no distinction |
++++ |
+++ |
|
Rat |
IgG1 |
— |
+ |
|
IgG2a |
— |
++++ |
|
|
IgG2b |
— |
++ |
|
|
IgG3 |
+ |
++ |
|
|
Sheep |
|
+/- |
++ |
++++=结合能力强; ++=结合能力中等; —=结合能力弱或没有结合
问题及解决方案
|
问题 |
原因分析 |
推荐解决方案 |
|
柱子反压过高 |
筛板被堵塞 |
清洗或更换筛板 |
|
填料被堵塞 |
按照第3部分进行树脂清洗 |
|
|
裂解液中含有微小的固体颗粒，建议上柱前使用滤膜 (0.22或0.45μm) 过滤，或者离心去除。 |
||
|
样品流速过低 |
样品或缓冲液中有气泡 |
去除样品或柱子中的气泡 |
|
样品和缓冲液进行脱气 |
||
|
洗脱组分中没有目的蛋白 |
样品中抗体浓度太低 |
使用其抗原做配体的介质 |
|
抗体被降解 |
适当的提高洗脱pH； 将样品脱盐或透析到合适的Buffer中 |
|
|
样品与Protein G结合能力较弱 |
更换介质，如rProtein A Beads进行纯化 |
|
|
回收率逐渐减低 |
上样量太多 |
减少上样量 |
|
柱子太脏，载量降低 |
按照第3部分进行树脂CIP清洗 |
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KANEKA2019年产品价格表
| 货号 | 品名 | 规格 | 价格 | 品牌 |
| KPG01-B025 | KANEKA KanCapᵀᴹ G Bulk resin NEW | 25 mL | 25500 | kaneka |
| KPG01-C001 | KANEKA KanCapᵀᴹ G Pre – packed column NEW | 1 mL | 2958 | kaneka |
| KPG01-C005 | KANEKA KanCapᵀᴹ G Pre – packed column NEW | 5 mL | 10744 | kaneka |
| KPL01-B025 | KANEKA KanCapᵀᴹ L Bulk resin NEW | 25 mL | 15912 | kaneka |
| KPL01-C001 | KANEKA KanCapᵀᴹ L Pre – packed column NEW | 1 mL | 2958 | kaneka |
| KPL01-C005 | KANEKA KanCapᵀᴹ L Pre – packed column NEW | 5 mL | 10744 | kaneka |
| KPL01-S200 | KANEKA KanCapᵀᴹ L Robocolumn (available soon) | 200 µL | 6120 | kaneka |
| KPL01-S600 | KANEKA KanCapᵀᴹ L Robocolumn (available soon) | 600 µL | 13260 | kaneka |
| KPA03-B025 | KANEKA KanCapAᵀᴹ 3G Bulk resin NEW | 25 mL | 26520 | kaneka |
| KPA03-C001 | KANEKA KanCapAᵀᴹ 3G Pre – packed column NEW | 1 mL | 3298 | kaneka |
| KPA03-C005 | KANEKA KanCapAᵀᴹ 3G Pre – packed column NEW | 5 mL | 11934 | kaneka |
| KPA03-S200 | KANEKA KanCapAᵀᴹ 3G Robocolumn NEW | 200 µL | 6120 | kaneka |
| KPA03-S600 | KANEKA KanCapAᵀᴹ 3G Robocolumn NEW | 600 µL | 13260 | kaneka |
| KPA02-B025 | KANEKA KanCapAᵀᴹ Bulk resin NEW | 25 mL | 23868 | kaneka |
| KPA02-C001 | KANEKA KanCapAᵀᴹ Pre – packed column NEW | 1 mL | 2958 | kaneka |
| KPA02-C005 | KANEKA KanCapAᵀᴹ Pre – packed column NEW | 5 mL | 10744 | kaneka |
| KPA02-S200 | KANEKA KanCapAᵀᴹ Robocolumn NEW | 200 µL | 5508 | kaneka |
| KPA02-S600 | KANEKA KanCapAᵀᴹ Robocolumn NEW | 600 µL | 12036 | kaneka |
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