qa-bio E-S001说明书

 

qa-bio E-S001说明书

Sialidase Au

唾液酸酶
尿毒症重组菌
零件号-酶的量
E-S001–60微升
E-S001-20–20微升
E-S001-200–200微升平方英寸
1包括缓冲器
仅包括酶

神经氨酸酶
α(2-3,6,8,9)唾液酸酶Au能切割复杂碳水化合物和糖蛋白中所有非还原性末端唾液酸残基。不同键的相对解理速率为:
α(2-6)>α(2-3)>α(2-8),α(2-9)。
此外,这种酶会分解支链唾液酸(与内部残留物相连)。这种特性使得它在唾液酸酶中是仅有的。切割支链残基可能需要高浓度的酶和较长的培养时间。要仅切割非还原性末端α(2-3)不分枝唾液酸残基,请使用唾液酸酶SP,零件号E-S007。
α-(2-3,6,8,9)唾液酸酶是从一株解脲杆菌中分离得到的。利用寡糖标准对酶进行了广泛的表征。
来源于大肠杆菌中的脲杆菌重组体。
酶代码EC3.2.1.18
目录
20 mM Tris-HCl,25 mM NaCl,pH 7.5中的唾液酸酶
包括20微升和60微升包装尺寸:
5x反应缓冲液250 mM磷酸钠,pH 6.0
比活性>135u/mg
活性>5u/ml
分子量70000道尔顿
pH值范围4.5-7,宜值6.0
推荐的缓冲液浓缩液为标准底物的酶活性提供了宜的pH值。如果由于糖蛋白溶解度或活性要求,在亚宜pH下进行糖苷酶处理,酶活性预计会有所降低。
建议使用
一。向试管中加入100μg糖蛋白或1 nmol低聚糖。
2。加水至14μL
三。加入4μL 5X反应缓冲液。
四。加入2μLα(2-3,6,8,9)唾液酸酶。
5个。37℃孵育1小时。
如果天然蛋白和脱乙酰蛋白之间的大小差异足以进行检测,则可以通过SDS-PAGE监测脱乙酰。
注:如果存在支链唾液酸,则需要更长的培养时间。
特异性切割所有非还原性末端支链和不支链唾液酸
比活度定义为在37℃、pH值为5.0的条件下,在1分钟内从MU-NaNaNa[2'-(4-甲基伞形烯基)-α-D-N-乙酰神经氨酸]中产生1微摩尔甲基伞形酮所需的酶的量。
在4℃下储存酶。
纯度每批α(2-3,6,8,9)唾液酸酶的污染蛋白酶测试如下;10μg变性BSA与2μL酶孵育24小时。SDS-PAGE分析表明处理后的牛血清白蛋白没有降解迹象。
生产宿主菌株已被广泛测试,不产生任何可检测的糖苷酶。
适当储存时,稳定性至少稳定12个月。暴露在环境温度下几天不会减少活动。酶在37摄氏度下保持活性至少一周。