genelink 26-4000-03说明书

上海金畔genelink 26-4000-03说明书

Random Primers Unlabeled

数量100μg

运输条件下 室温

储存-20摄氏度

描述
随机引物是代表该大小的所有可能序列的寡核苷酸的混合物。与使用六聚体(1,2)和cDNA合成类似,随机引物可用于在低聚物标记中引发合成。
随机引物标记产生高比活性标记DNA探针,可用于所有南方、北方和原位杂交研究。随机引物也可以类似于在cDNA合成中使用六聚体与寡聚体d(T)组合来产生更多的5'端cDNA序列。
最近,随机引物被用来检测DNA多态性。这些多态性,简单地被检测为DNA的片段,从父母一方扩增而不是从另一方扩增,是以孟德尔的方式遗传的,可以
可用于构建多种物种的遗传图谱。作者建议,这些多态性被称为RAPD(发音快速)标记,在随机扩增多态性DNA之后(3)。
重建
建议在无核糖核酸酶的DEPC处理水中以50µM(50 pmol/µl)的浓度或10mM Tris pH 8.0进行重组。储备溶液可根据需要进一步稀释至适当的工作浓度。
为了制备50μM的底漆溶液,使用冻干低聚物的“nmol/100µg”值并乘以20,以确定要添加的稀释液体积(以微升计)。
公式:
“总nmol”x 20=要添加的稀释剂μl。
-短时间旋转试管,将运输过程中可能卡在瓶盖中的试管内容物卸下。
颗粒可能非常小,不可见。
-直接向试管中加入适量的无核糖核酸酶水或10mM Tris pH 8.0。旋涡。
-上述溶液为50µM。这相当于50 pmol/µl。
荧光标记探针应避光,以避免光漂白。
在零下20点储存
重建后C或以下。
推荐用法
在20µl反应体积中,使用4µl 50µM溶液中的1µg DNA或RNA作为模板。
详见反应条件。
质量控制数据
该产品通过逆转录酶和聚(A)蛋白被证明能引发第一链cDNA反应+
RNA作为模板
使用klenow DNA聚合酶在随机引物标记反应中进行探针标记。
功能分析条件
下面给出的条件已经过测试,以产生第一链cDNA合成,并给出了一个例子。使用该产品的其他实验室已经使用了各种变体和其他方案,以产生出色的第一链合成。研究人员可以替代他们自己的反应条件。
RNA的质量对逆转录反应非常重要。必须有完整的全长RNA作为模板材料,不含微量RNA酶和污染性化学物质。低质量的RNA模板通常是导致cDNA产物截短和不完整的原因。