Haematologic HCT-0020说明书

Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注册公司,是一家专业从事体外研究用高质量血浆蛋白分离和表征的主要制造商。HTI的重点是凝血级联中涉及的蛋白质,以及骨代谢的调节。HTI产品系列包括超过150种高度纯化和充分表征的蛋白质,包括酶原,酶,辅因子和抑制剂,以及单克隆和多克隆抗体的互补系列。还可提供因子缺乏的等离子体和定制的血液采集管,用于临床研究。提供的服务包括定制蛋白质纯化,蛋白质修饰,化验开发,合同制造和合同研究。

 

haemtech Haematologic Technologies,Inc。(HTI/haemtech)是一家ISO 9001:2015注册公司,是一家专业从事体外研究用高质量血浆蛋白分离和表征的主要制造商。HTI的重点是凝血级联中涉及的蛋白质,以及骨代谢的调节。HTI产品系列包括超过150种高度纯化和充分表征的蛋白质,包括酶原,酶,辅因子和抑制剂,以及单克隆和多克隆抗体的互补系列。还可提供因子缺乏的等离子体和定制的血液采集管,用于临床研究。提供的服务包括定制蛋白质纯化,蛋白质修饰,化验开发,合同制造和合同研究。

 

haemtech HCT-0020说明书

 

 

Thrombin (alpha)

凝血酶(alpha)

 

 

凝血酶原
蛋白水解活化丝氨酸蛋白酶α-凝血酶通过酶原激活凝血酶原而产生。酶复合物凝血酶原酶催化凝血酶原中两个肽键的蛋白水解,产生NH2末端衍生的F1.2区和异二聚体α-凝血酶。α-凝血酶由“A”链(Mr = 6000)组成,其通过单个二硫键与“B”链(Mr = 31,000)共价连接。

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 HCT-0020 人类α-凝血酶

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尺寸

100微克,1毫克,10毫克(1毫克小瓶)

公式

50%甘油/水(v / v)

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存储

-20℃下

纯度

通过SDS-PAGE> 95%

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活动决定

纤维蛋白原凝固或显色测定

保质期(妥善保存)

12个月

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 HCT-DFP 人类α-凝血酶,

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尺寸

100微克

公式

20mM Hepes,150mM NaCl,pH 7.4

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存储

-80℃下

纯度

通过SDS-PAGE> 95%

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活动决定

纤维蛋白原凝固或显色测定

保质期(妥善保存)

12个月

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 HCT-FPRCK 人类α-凝血酶,PPACK(FPRck)活性位点被阻止

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尺寸

100微克

公式

20mM Hepes,150mM NaCl,pH 7.4

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存储

-80℃下

纯度

通过SDS-PAGE> 95%

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活动决定

纤维蛋白原凝固或显色测定

保质期(妥善保存)

12个月

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 HCT-BFPRCK 人α-凝血酶,生物素化PPACK(FPRck)活性位点阻断

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尺寸

100微克

公式

20mM Hepes,150mM NaCl,pH 7.4

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存储

-80℃下

纯度

通过SDS-PAGE> 95%

  •  

活动决定

纤维蛋白原凝固或显色测定

保质期(妥善保存)

12个月

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 BCT-1020 牛α-凝血酶

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尺寸

200微克,1毫克

公式

50%甘油/水(v / v)

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存储

-20℃下

纯度

通过SDS-PAGE> 95%

  •  

活动决定

纤维蛋白原凝固或显色测定

保质期(妥善保存)

12个月

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 BCT-DFP 牛α-Thrombin,

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尺寸

200微克

公式

20mM Hepes,150mM NaCl,pH 7.4

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存储

-80℃下

纯度

通过SDS-PAGE> 95%

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活动决定

纤维蛋白原凝固或显色测定

保质期(妥善保存)

12个月

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 BCT-FPRCK 牛α-凝血酶,PPACK(FPRck)活性位点被阻止

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尺寸

200微克

公式

20mM Hepes,150mM NaCl,pH 7.4

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存储

-80℃下

纯度

通过SDS-PAGE> 95%

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活动决定

纤维蛋白原凝固或显色测定

保质期(妥善保存)

12个月

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 BCT-BFPRCK 牛α-凝血酶,生物素化PPACK(FPRck)活性位点封闭

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尺寸

200微克

公式

20mM Hepes,150mM NaCl,pH 7.4

  •  

存储

-80℃下

纯度

通过SDS-PAGE> 95%

  •  

活动决定

纤维蛋白原凝固或显色测定

保质期(妥善保存)

12个月

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 MCT-5020 小鼠α-凝血酶

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尺寸

50微克

公式

50%甘油/水(v / v)

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存储

-20℃下

纯度

通过SDS-PAGE> 95%

  •  

活动决定

纤维蛋白原凝固或显色测定

保质期(妥善保存)

12个月

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α-凝血酶是通过酶原凝血酶原的蛋白水解活化产生的高度特异性丝氨酸蛋白酶(1)。在凝血期间,凝血酶裂解纤维蛋白原以形成纤维蛋白,导致凝血的终步骤,形成纤维蛋白凝块。凝血酶还负责反应激活因子V因子和因子VIII。据报道,凝血酶还激活因子XIII和血小板,并且还起血管收缩蛋白的作用。凝血酶的促凝血活性以两种方式停止:1)通过肝素辅助因子II或抗凝血酶III /肝素复合物抑制; 或2)与血栓调节蛋白形成复合物。凝血酶/血栓调节蛋白复合物的形成导致凝血酶不能切割纤维蛋白原并激活因子V和VIII,

凝血酶是由NH2-末端“A”链(Mr = 6,000)和COOH-末端“B”链(Mr = 31,000)组成的双链酶,其通过单个二硫键保持共价结合。人凝血酶比牛凝血酶短13个氨基酸,这是由于人蛋白上的凝血酶切割位点不存在于牛蛋白中。

凝血酶还用于细菌中表达的融合蛋白的位点特异性切割(9-11)。凝血酶敏感位点掺入目的重组蛋白和促进纯化和/或表达的肽或蛋白质之间。通过用凝血酶切割,从表达的杂交体释放靶蛋白。然后可以通过亲和层析容易地除去凝血酶。

使用如Nesheim等人所述的Lundblad程序(1)的修改,由纯化的凝血酶原制备人,牛和小鼠凝血酶。(2)。凝血酶以50%(vol / vol)甘油/ H2O供应,应储存在-20oC。通过SDS-PAGE分析确定纯度,并在凝血酶特异性凝固测定中测量活性,并与标准化的NIH凝血酶进行比较。凝血酶也可用活性位点用DFP,FPRck或生物素化的FPRck阻断。

融合蛋白的切割
除了在凝血研究中的广泛应用外,凝血酶还可用于融合蛋白的位点特异性切割。凝血酶敏感位点掺入目的重组蛋白和促进纯化和/或表达的肽或蛋白质之间。通过用凝血酶切割,从表达的杂交体释放靶蛋白。然后可以通过亲和层析容易地除去凝血酶。批次一致性确保每次都可重现的结果。对于涉及细胞培养的实验,请与我们联系,讨论用于细胞培养的定制低内毒素批次。

凝胶

Novex 4-12%Bis-Tris

加载

人β和γ凝血酶,每通道1μg

缓冲

MES

标准

SeeBluePlus 2; 肌球蛋白(188 kDa),磷酸化酶B(98 kDa),BSA(62 kDa),谷氨酸脱氢酶(49 kDa),酒精脱氢酶(38 kDa),碳酸酐酶(28 kDa),肌红蛋白红(17 kDa),溶菌酶(14 kDa),抑肽酶(6kDa),胰岛素,B链(3kDa)。

 

本土化

等离子体

行动方式

丝氨酸蛋白酶,其裂解纤维蛋白原以形成纤维蛋白; 还负责激活蛋白C,血小板活化和反应激活因子V,因子V和因子VIII

分子量

36,700(3-6)

消光系数

Ë

1%

1厘米,280纳米

 

= 18.3(人类)(6)

= 19.5(牛)(7)

 

 

具体活动

大约3800 NIH单位/ mg

等电点

7.0-7.6(人类)(3)

结构体

两个亚基,大约先生= 6,000和31,000

碳水化合物百分比

约5%

 

 

 

 

 

 

 

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