cytoskeleton AD99-A说明书

 

Cytoskeleton,Inc。很高兴为药物筛选,信号转导和细胞骨架研究提供广泛的试剂盒和产品。我们专注于生产纯化蛋白质和易于使用的试剂盒,以研究生物化学和细胞过程。我们的试剂盒可用于少量样品,用于基础研究或小屏幕(Biochem Kits™),也可用于大屏幕的高通量样品CytoDYNAMIX Screens™)。

除了我们现有的产品,我们还在产品线中为微管,微管蛋白,运动蛋白,小G蛋白效应物,GAP,GEF和其他几种蛋白提供药物筛选服务。

 

Binding Proteins

结合蛋白质

· 概述

· 关于

· CITATIONS

· 常见问题解答

 

测定所有肌动蛋白结合蛋白(ABP)以确保其活性与公布的值相当。测定因产品而异,包括F-肌动蛋白切断测定,F-肌动蛋白激活的ATP水解和肌动蛋白聚合测定。显示了测量WASP VCA结构域蛋白在肌动蛋白聚合中的作用(右)。

 

Cytoskeleton,Inc。销售一系列纯化的肌动蛋白结合蛋白。所有Cytoskeleton的肌动蛋白结合蛋白都具有高纯度,并经过严格的生物活性测试。细胞骨架还为肌动蛋白结合蛋白研究提供肌动蛋白,抗体和试剂盒。

 

由Arp2 / 3和WASP VCA结构域刺激的肌动蛋白聚合。试剂盒BK003用于研究Arp2 / 3(Cat。#RP01)和WASP VCA(Cat。#VCG03)结构域对肌动蛋白聚合的影响

肌动蛋白与细胞中的多种蛋白质相互作用
*,F-和G-肌动蛋白与细胞中的多种蛋白质相互作用(14)​​。目前有超过150种已知的肌动蛋白结合蛋白(ABP),其占细胞蛋白的约25%。ABP在肌动蛋白细胞骨架上赋予大量功能多样性,其涉及诸如肌肉收缩,唇形突破,细胞运动,胞质分裂和细胞质流动的过程。研究这些过程如何调节肌动蛋白丝功能和动力学是一个重要且不断增长的研究领域。

可以通过使用生物化学,遗传学和免疫学方法分离和研究肌动蛋白结合蛋白。因为存在超过50种类型的肌动蛋白结合蛋白,所以用于鉴定它们的方法及其功能/活性也是多种多样的。肌动蛋白亲和柱通常用于亲和纯化ABP,无论它们是F-或G-肌动蛋白结合。可以通过利用芘肌动蛋白荧光的聚合增强来进行显示潜在ABP影响肌动蛋白动力学的简单测定(参见测量肌动蛋白聚合物部分)。这种性质的研究有助于鉴定新的肌动蛋白结合蛋白。有几篇值得一读的关于识别和量化新肌动蛋白结合蛋白的可能方法的评论(15,16,17)

问题1:哪种肌动蛋白结合蛋白(ABP)可用作F-肌动蛋白结合对照? 

答案1:肌动蛋白结合蛋白α-辅肌动蛋白(Cat。#AT01)是一种F-肌动蛋白结合和交联蛋白,使其可用作F-肌动蛋白结合研究的对照。它的Kd是1μM,这意味着在该浓度下发生50%结合。因此,我们的目标是使用 2μM的α-肌动蛋白作为结合测定中的阳性对照。在结合反应中,2μM浓度的α-辅肌动蛋白相当于0.23μg/μl。此外,α-辅肌动蛋白对pH敏感,其高亲和力发生在pH 7.0。

 

问题2:Cytoskeleton的肌球蛋白或重的meromyosin是否具有F-肌动蛋白活力? 

答案2:遗憾的是,我们不会出售运动级肌球蛋白或重肌红蛋白用于肌动蛋白运动试验。我们发现质量控制测试非常难以复制,因此我们无法充分确保试剂的质量。因此,肌球蛋白(Cat。#MY02MY03)和重型meromyosin蛋白(Cat。#MH01)不推荐用于F-肌动蛋白运动测定。已经测试过这些试剂的客户在运动方面没有取得很好的成功,因此我们不建议购买样品进行测试。如果需要运动级肌动蛋白或重型meromyosin,我们建议遵循原始方案(Kron和Spudich,1985)并在液氮中冷冻100μl等分试样以确保稳定性。

    参考文献:  SJ Kron和JA Spudich,1985年。荧光肌动蛋白丝在固定在玻璃表面的肌球蛋白上移动。PNAS,83,6272-6276。

 

肌动蛋白(纯度> 99%):牛心肌

1×1毫克(Cat。#AD99-A)

5×1毫克(Cat。#AD99-B)

产品用途包括

· 鉴定和表征心肌肌动蛋白结合蛋白

· 体外心肌肌动蛋白聚合研究

 

材料:
牛心肌肌动蛋白作为冻干粉末提供。当一个小瓶在1ml肌动蛋白单体缓冲液复原:5.0毫摩尔Tris-HCl pH 8.0中,0.2毫米氯化钙2,0.2mM的ATP和0.5mM DTT,它是在1.0毫克/毫升的终浓度。

纯度:
通过在SDS-PAGE凝胶上扫描蛋白质的光密度测定来确定纯度。样品纯度> 99%。

生物活性:
生物活性以三种方式确定。种方法利用芘肌肉肌动蛋白作为聚合的荧光指示剂(使用1:10比例的AP05至AD99)。第二种是通过高速离心沉淀肌动蛋白聚合物。第三种方法通过特异性抑制DNase活性来测量单体的完整性。生物活性> 90%。

问题1:牛心肌肌肉肌动蛋白的同种型组成是什么?

答案1:  牛心肌肌动蛋白(Cat。#AD99)由84%的α-心肌细胞和16%的α-骨骼肌动蛋白同种型组成。 

 

问题2:当心肌肌动蛋白没有可用的芘结合物时,如何用芘测定法测量肌动蛋白聚合? 

答案2:  为了检查未标记的心肌肌动蛋白(Cat。#AD99)的聚合,请点击此处查看使用过量未标记[心肌]肌动蛋白加10%芘标记的骨骼肌肌动蛋白的聚合方案。芘肌肉肌动蛋白本身不会以该测定中使用的浓度聚合,因此该反应依赖于未标记的心肌肌动蛋白(Cat。#AD99)用于F-肌动蛋白形成。以这种方式,芘标记的肌肉肌动蛋白被吸收并聚合以充当用于聚合未标记的肌动蛋白的报道分子,其以更高的浓度存在。

Butler SC,et al。海藻中的pectenotoxins对各种肌动蛋白异构体聚合的抑制作用。毒理学。体外。26,493-499。

Fressinaud C.,et al。轴突细胞骨架蛋白在体外特异性调节少突胶质细胞的生长和分化。神经化学杂志。诠释。60,78-90。

Orlova A.,et al。肌球蛋白结合蛋白C的N-末端结构域可以多态性结合F-肌动蛋白。J. Mol。细胞。412,379-386。

Debold EP,et al。与增生性和扩张性心肌病相关的人肌动蛋白突变在体外表现出明显的细丝调节特性。J. Mol。细胞。心肺。48,286-292。

Passarelli C.,et al。分离的肌原纤维对体外谷胱甘肽化的易感性:对肌肉功能的潜在相关性。细胞骨架。67,81-89。

 

 

 

 

货号

品名

规格

品牌

BK165-S

Signal-Seeker™ SUMOylation 1 Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK165

Signal-Seeker™ SUMOylation 1 Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

BK163-S

Signal-Seeker™ Acetyl-Lysine Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK163

Signal-Seeker™ Acetyl-Lysine Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

BK160-S

Signal-Seeker™ Phosphotyrosine Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK160

Signal-Seeker™ Phosphotyrosine Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

BK162-S

Signal-Seeker™ SUMOylation 2/3 Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK162

Signal-Seeker™ SUMOylation 2/3 Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

BK161-S

Signal-Seeker™ Ubiquitination Detection Kit

(10 assay)

cytoskeleton

BK161

Signal-Seeker™ Ubiquitination Detection Kit

(30 assay)

cytoskeleton

AAC04-Beads

Acetyl-Lysine Affinity Beads

ea

cytoskeleton

APY03-Beads

Anti-Phosphotyrosine Affinity Beads

ea

cytoskeleton

ASM11-Beads

SUMOylation 1 Affinity Beads

ea

cytoskeleton

ASM24-Beads

SUMOylation 2/3 Affinity Beads

ea

cytoskeleton

UBA01-Beads

Ubiquitination Affinity Beads

ea

cytoskeleton

CIG02-Beads

Acetyl-Lysine Control Beads

ea

cytoskeleton

CIG03-Beads

SUMO1 IP Control Beads

ea

cytoskeleton

CIG01-Beads

IgG Control Beads

ea

cytoskeleton

CUB02-Beads

Ubiquitination Control Beads

ea

cytoskeleton

BLR01

BlastR™ Rapid Lysate Prep Kit

ea

cytoskeleton

BLR02

BlastR™ Rapid Filtration Kit

ea

cytoskeleton

AAC02

Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (7B1)

ea

cytoskeleton

AAC03

Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (19C4B2.1)

ea

cytoskeleton

AAC03-HRP

Acetyl Lysine-HRP Antibody Mouse Monoclonal (19C4B2.1)

ea

cytoskeleton

AAC01

Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (3C6.08.20)

ea

cytoskeleton

APY03

Phosphotyrosine Antibody Mouse Monoclonal (27B10)

ea

cytoskeleton

APY03-HRP

Phosphotyrosine-HRP Antibody Mouse Monoclonal (27B10)

ea

cytoskeleton

ASM01

SUMO1 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 5D8B16)

ea

cytoskeleton

ASM24

SUMO-2/3 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 11G2)

ea

cytoskeleton

ASM23

SUMO-2/3 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 12F3)

ea

cytoskeleton

ASM23-HRP

SUMO-2/3-HRP Antibody Mouse Monoclonal (Clone 12F3)

ea

cytoskeleton

AUB01

Ubiquitin Antibody Mouse Monoclonal

ea

cytoskeleton

AUB01-HRP

Ubiquitin-HRP Antibody Mouse Monoclonal

ea

cytoskeleton

PHDG1

Acti-stain 488 phalloidin

ea

cytoskeleton

PHDH1

Acti-stain 555 phalloidin

ea

cytoskeleton

PHDN1

Acti-stain 670 phalloidin

ea

cytoskeleton

BK001

Actin Binding Protein Spin-Down Assay Biochem Kit: rabbit skeletal muscle actin

ea

cytoskeleton

BK003

Actin Polymerization Biochem Kit (fluorescence format): rabbit skeletal muscle actin

ea

cytoskeleton

AKL95

Actin protein (>95% pure): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AD99

Actin protein (>99% pure): bovine cardiac muscle

ea

cytoskeleton

AS99

Actin protein (>99% pure): chicken gizzard muscle

ea

cytoskeleton

AKL99

Actin protein (>99% pure): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AKF99

Actin protein (pre-formed filaments): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AP05

Actin protein (pyrene labeled): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

APHR

Actin protein (rhodamine): human platelet

ea

cytoskeleton

AR05

Actin protein (rhodamine): rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

AT01

Alpha-actinin protein: rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

RP01P

Arp2/3 protein complex: porcine brain

ea

cytoskeleton

CS-TFC01

Cardiac Thin Filament Complex (CTFC)

ea

cytoskeleton

CF01

Cofilin 1 protein: human recombinant

ea

cytoskeleton

HPG6

Gelsolin protein: Homo sapiens recombinant

ea

cytoskeleton

MH01

Heavy meromyosin protein

ea

cytoskeleton

CS-MH03

Heavy Meromyosin Protein (HMM Fragment)

ea

cytoskeleton

CS-MYS03

Myosin – cardiac S1 fragment

ea

cytoskeleton

CS-MYS04

Myosin – skeletal muscle S1 fragment

ea

cytoskeleton

CS-MYS05

Myosin – smooth muscle S1 fragment

ea

cytoskeleton

MY02

Myosin II protein: rabbit skeletal muscle

ea

cytoskeleton

MY03

Myosin protein: bovine cardiac muscle

ea

cytoskeleton

PR02

Profilin 1 protein: Untagged, human recombinant

ea

cytoskeleton

PHDR1

Rhodamine Phalloidin

ea

cytoskeleton

CY-SC001

SiR-Actin Kit

ea

cytoskeleton

CY-SC013

SiR700-Actin Kit

ea

cytoskeleton

VCG03

WASP protein VCA domain: GST tagged: human

ea

cytoskeleton

 

 

 

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

1:强大的进口辐射能力,血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。

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6:我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech;sysy,TriLink BioTechnologies,Inc;worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。

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