胶原酶的区别

消化法中常使用的酶有3种:胰蛋白酶、胶原酶I以及透明质酸酶,透明质酸酶多与胰蛋白酶或胶原酶联合应用; 胶原酶作用较缓和,能消化细胞间质中的胶原纤维以释放细胞,对细胞损伤小,以胶原I为主。

胰蛋白酶(简称胰酶)是广泛应用的消化剂.胰蛋白酶是一种胰脏制品,对蛋白质有水介作用,主要作用于赖氨酸或精氨酸相连接的肽键,使细胞间质中的蛋白质水介而使细胞分散开,在常用的蛋白酶中由于产品的活力和纯度不同,对细胞的消化能力也不同,胰蛋白酶对细胞的作用,取决于细胞类型、酶的活力、配制的浓度、消化的温度、无机盐离子、pH以及消化时间的长短等. 胰蛋白酶作用较强,容易造成平滑肌细胞损坏;
胶原酶是一种从细菌中提取出来的酶,对胶原有很强的消化作用.适于消化纤维性组织、上皮组织以及癌组织,它对细胞间质有较好的消化作用,对细胞本身影响不大,可使细胞与胶原成分脱离而不受伤害.该酶分离效果好,即使有钙、镁离子存在仍有活性,故可用PBS和含血清的培养液配制,即操作简便又可提高细胞成活率,zui终浓度200u/mL  此酶消化作用缓和,无需机械振荡,但胶原酶价格较高,大量使用将增加实验成本,所以选择价廉物美的胶原酶是关键.

胶原酶的化学名为胶原蛋白水解酶(Collagenase),它能在生理PH和温度条件下特异性地水解天然胶原蛋白的三维螺旋结构,而不损伤其它蛋白质和组织。胶原酶的化学本质是一种蛋白质,因此,这对温度、PH和导致蛋白质变性的各种因素均非常敏感,极易受到外界条件的影响而改变其本身的构象和性质。

胶原酶(collagenase)是从溶组织梭状细胞芽孢杆菌提取制备的,主要水解结缔组织中胶原蛋白成分。当拟消化的组织较硬,内含较多结缔组织或胶原成分时,用胰蛋白酶解离细胞的效果较差,这时可采用胶原酶解离细胞法。胶原酶仅对细胞间质有消化作用而对上皮细胞影响不大。因此适于消化分离纤维性组织、上皮及癌组织,可使上皮细胞与胶原成分分离而不受损害。常用剂量为zui终浓度200U/ml。胶原酶分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝细胞胶原酶,要根据所要分离消化的组织类型选择胶原酶类型。

中文名称: I型胶原酶、II型胶原酶、IV型胶原酶、V型胶原酶

英文名称:Collagenase I、Collagenase II、Collagenase IV、Collagenase V

CAS号: 9001-12-1

规格:100mg, 1g ,5

产地:Worthington sigma  invitrogen

外观: 棕色或棕褐色结晶状冻干粉;

保存:-20°C

胶原酶配制方法和胰蛋白酶的配制方法一致,只是要注意标签中的活性单位,zui终配制 成为200u/mL就可以了.,

胰蛋白酶的配制、过滤除菌与分装过程

准备样品:干粉,PBS缓冲液,离心管两个、冻存管20个、盒子一个、枪头1盒、灭菌器、注射器。

准备工作:将离心管、冻存管装载盒子中高温高压灭菌。

配制:

1.称取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液浓度0.25%用电子天平准确称取粉剂50mg溶入离心管PBS(PH到7.2左右)液中。搅拌混匀,置于4℃内过一晚。

2.用注射滤器抽滤消毒:配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器(0.22微米微孔滤膜)抽滤除菌。

3.分装:将除菌之后的胰蛋白酶用移液枪分装至

 

A: Collagenase I(胶原酶I型) :  主要用于上皮、肺、脂肪和肾上腺组织细胞的分离。

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LS004194

Collagenase I(胶原酶I型)

100 mg

476

Worthington

LS004196

Collagenase I(胶原酶I型)

1 gm

2464

Worthington

LS004197

Collagenase I(胶原酶I型)

5 gm

10360

Worthington

17100-017

Collagenase I(胶原酶I型)

1g

3025

invitrogen

C0130-100MG

Collagenase I(胶原酶I型)

100mg

526.5

sigma

C0130-500MG

Collagenase I(胶原酶I型)

500MG

1473.03

sigma

C0130-1G

Collagenase I(胶原酶I型)

1G

2208.96

sigma

C0130-5G

Collagenase I(胶原酶I型)

5G

6113.25

sigma

 

B: Collagenase II(胶原酶II型) : 适用于肝脏,骨,甲状腺,心脏和唾液腺组织细胞的分离。

 

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LS004177

Collagenase II(胶原酶II型)

5 gm

10360

Worthington

LS004176

Collagenase II(胶原酶II型)

1 gm

2464

Worthington

LS004174

Collagenase II(胶原酶II型)

100 mg

476

Worthington

17101-015

Collagenase II(胶原酶II型)

1g

3025

invitrogen

C6885-25MG

Collagenase II(胶原酶II型)

25MG

508.95

sigma

C6885-100MG

Collagenase II(胶原酶II型)

100mg

778.05

sigma

C6885-500MG

Collagenase II(胶原酶II型)

500MG

1,980.81

sigma

C6885-1G

Collagenase II(胶原酶II型)

1G

2,971.80

sigma

C6885-5G

Collagenase II(胶原酶II型)

5G

7,926.75

sigma

 

C: Collagenase III(胶原酶 III型) 对哺乳动物的组织有广谱的消化作用

 

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LS004182

Collagenase III(胶原酶 III型)

1 gm

2464

Worthington

LS004183

Collagenase III(胶原酶III型)

5 gm

10360

Worthington

LS004180

Collagenase III(胶原酶III型)

100 mg

476

Worthington

 

D: Collagenase IV(胶原酶IV型):胶原酶Ⅳ包含至少7中蛋白酶成分,分子量从68-130KD不等。它能消化多种组织, 对哺乳动物的组织有广谱的消化作用

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17104-019

Collagenase IV(胶原酶IV型)

1g

3025

invitrogen

C5138-25MG

Collagenase IV(胶原酶IV型)

25MG

452.79

sigma

C5138-100MG

Collagenase IV(胶原酶IV型)

100mg

772.20

sigma

C5138-500MG

Collagenase IV(胶原酶IV型)

500MG

2,530.71

sigma

C5138-1G

Collagenase IV(胶原酶IV型)

1G

4,095.00

sigma

C5138-5G

Collagenase IV(胶原酶IV型)

5G

15,420.60

sigma

LS004189

Collagenase IV(胶原酶V型)

5 gm

10360

Worthington

LS004188

Collagenase IV(胶原酶V型)

1 gm

2464

Worthington

LS004186

Collagenase IV(胶原酶V型)

100 mg

476

Worthington

 

E: Collagenase V(胶原酶V型): 胶原酶Ⅴ包含至少7中蛋白酶成分,分子量从68-130KD不等。它可用于胰腺小岛组织的分离,结缔组织分离。

 

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LS005283

Collagenase V(胶原酶V型)

5 gm

12460

Worthington

LS005282

Collagenase V(胶原酶V型)

1 gm

2968

Worthington

LS005280

Collagenase V(胶原酶V型)

100 mg

588

Worthington

C9263-25MG

Collagenase V(胶原酶V型)

25MG

469.17

sigma

C9263-100MG

Collagenase V(胶原酶V型)

100mg

625.95

sigma

C9263-500MG

Collagenase V(胶原酶V型)

500MG

1,814.67

sigma

C9263-1G

Collagenase V(胶原酶V型)

1G

2,845.44

sigma

C9263-5G

Collagenase V(胶原酶V型)

5G

5,686.20

sigma