Cytoskeleton，Inc。很高兴为药物筛选，信号转导和细胞骨架研究提供广泛的试剂盒和产品。我们专注于生产纯化蛋白质和易于使用的试剂盒，以研究生物化学和细胞过程。我们的试剂盒可用于少量样品，用于基础研究或小屏幕（Biochem Kits™），也可用于大屏幕的高通量样品（CytoDYNAMIX Screens™）。
除了我们现有的产品，我们还在产品线中为微管，微管蛋白，运动蛋白，小G蛋白效应物，GAP，GEF和其他几种蛋白提供药物筛选服务。
Binding Proteins
结合蛋白质
· 概述
· 关于
· CITATIONS
· 常见问题解答
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测定所有肌动蛋白结合蛋白（ABP）以确保其活性与公布的值相当。测定因产品而异，包括F-肌动蛋白切断测定，F-肌动蛋白激活的ATP水解和肌动蛋白聚合测定。显示了测量WASP VCA结构域蛋白在肌动蛋白聚合中的作用（右）。
Cytoskeleton，Inc。销售一系列纯化的肌动蛋白结合蛋白。所有Cytoskeleton的肌动蛋白结合蛋白都具有高纯度，并经过严格的生物活性测试。细胞骨架还为肌动蛋白结合蛋白研究提供肌动蛋白，抗体和试剂盒。 |
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由Arp2 / 3和WASP VCA结构域刺激的肌动蛋白聚合。试剂盒BK003用于研究Arp2 / 3（Cat。＃RP01）和WASP VCA（Cat。＃VCG03）结构域对肌动蛋白聚合的影响。 |
肌动蛋白与细胞中的多种蛋白质相互作用
*，F-和G-肌动蛋白与细胞中的多种蛋白质相互作用（14）。目前有超过150种已知的肌动蛋白结合蛋白（ABP），其占细胞蛋白的约25％。ABP在肌动蛋白细胞骨架上赋予大量功能多样性，其涉及诸如肌肉收缩，唇形突破，细胞运动，胞质分裂和细胞质流动的过程。研究这些过程如何调节肌动蛋白丝功能和动力学是一个重要且不断增长的研究领域。
可以通过使用生物化学，遗传学和免疫学方法分离和研究肌动蛋白结合蛋白。因为存在超过50种类型的肌动蛋白结合蛋白，所以用于鉴定它们的方法及其功能/活性也是多种多样的。肌动蛋白亲和柱通常用于亲和纯化ABP，无论它们是F-或G-肌动蛋白结合。可以通过利用芘肌动蛋白荧光的聚合增强来进行显示潜在ABP影响肌动蛋白动力学的简单测定（参见测量肌动蛋白聚合物部分）。这种性质的研究有助于鉴定新的肌动蛋白结合蛋白。有几篇值得一读的关于识别和量化新肌动蛋白结合蛋白的可能方法的评论（15,16,17）
问题1：哪种肌动蛋白结合蛋白（ABP）可用作F-肌动蛋白结合对照？
答案1：肌动蛋白结合蛋白α-辅肌动蛋白（Cat。＃AT01）是一种F-肌动蛋白结合和交联蛋白，使其可用作F-肌动蛋白结合研究的对照。它的Kd是1μM，这意味着在该浓度下发生50％结合。因此，我们的目标是使用 2μM的α-肌动蛋白作为结合测定中的阳性对照。在结合反应中，2μM浓度的α-辅肌动蛋白相当于0.23μg/μl。此外，α-辅肌动蛋白对pH敏感，其高亲和力发生在pH 7.0。
问题2：Cytoskeleton的肌球蛋白或重的meromyosin是否具有F-肌动蛋白活力？
答案2：遗憾的是，我们不会出售运动级肌球蛋白或重肌红蛋白用于肌动蛋白运动试验。我们发现质量控制测试非常难以复制，因此我们无法充分确保试剂的质量。因此，肌球蛋白（Cat。＃MY02和MY03）和重型meromyosin蛋白（Cat。＃MH01）不推荐用于F-肌动蛋白运动测定。已经测试过这些试剂的客户在运动方面没有取得很好的成功，因此我们不建议购买样品进行测试。如果需要运动级肌动蛋白或重型meromyosin，我们建议遵循原始方案（Kron和Spudich，1985）并在液氮中冷冻100μl等分试样以确保稳定性。
参考文献： SJ Kron和JA Spudich，1985年。荧光肌动蛋白丝在固定在玻璃表面的肌球蛋白上移动。PNAS，83,6272-6276。
Arp2/3 protein complex: porcine brain Arp2 / 3蛋白复合物：猪脑
窗体顶端
2×50 ug (Cat. # RP01P-A)
6×50 ug (Cat. # RP01P-B
窗体底端
产品用途包括
· 体外肌动蛋白聚合刺激化合物的阳性对照
· 发现Arp2 / 3激活或抑制化合物
· Arp2 / 3相互作用蛋白的表征和发现
材料
Arp2 / 3蛋白质复合物由7个蛋白质亚基组成，均以大致相等的化学计量比存在（见图1）。Arp2 / 3复合物是肌动蛋白丝成核的关键调节因子，蛋白质亚基在进化上是高度保守的。蛋白质复合物已从猪脑中纯化，并以冻干粉末形式提供。当用蒸馏水重构，所述复合物是在以下缓冲液为：20mM Tris pH值7.5，25mM的氯hua钾，1毫摩尔MgCl 2，0.5mM的EDTA，0.1mM的ATP，1％葡聚糖和5％的蔗糖。Arp2 / 3复合物的分子量为224kDa。
注意： 来自procine大脑的RP01P取代牛脑中的RP01。我们比较了两种来源的Arp2 / 3复合物的活性，并发现它们在肌动蛋白聚合试验中表现相同（见图2）
纯度
通过在4-20％聚丙烯酰胺凝胶上扫描考马斯蓝染色蛋白的光密度测定法测定纯度。确定Arp2 / 3蛋白质复合物纯度为90％（参见图1）。
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图1.Arp2 / 3蛋白纯度测定： 在4-20％SDS-PAGE系统中通过电泳分离10μg的Arp2 / 3复合物样品，并用考马斯蓝染色。用Precision RedTM Protein Assay Reagent（Cat。＃ADV02）测定蛋白质定量。Mark12分子量标记来自Life Technologies。 |
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在肌动蛋白聚合测定（Cat。＃BK003）中测试生物活性 RP01P 。结合WASP（Cat。＃VCG03）的VCA结构域，一种Arp2 / 3激活剂，与没有RP01的对照相比，它显示刺激肌动蛋白聚合20倍。这表明对肌动蛋白聚合诱导的Arp 2/3特异性（图2）。
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图2.使用Arp2 / 3和VCA结构域蛋白的 肌动蛋白聚合测定：如该方法中所述进行肌动蛋白聚合; 所有反应均含有0.8μM肌动蛋白。含有Arp2 / 3或VCA的反应（数据未显示）显示肌动蛋白成核很少或没有增强。单独的肌动蛋白在这些条件下（单独的肌动蛋白反应）也显示出低聚合能力。然而，在存在VCA结构域的情况下，Arp2 / 3导致肌动蛋白成核的增强（注意聚合的陡峭成核阶段）。随时间以任意荧光单位测量肌动蛋白聚合。在我们的测试中，猪衍生的Arp2 / 3（孔E＆F）表现出与源自牛源（孔G＆H）的Arp2 / 3相同的表现。 |
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问题1：存储Arp2 / 3（Cat。＃RP01P）的*方法是什么？
答案1： 将干燥的冻干的Arp2 / 3蛋白质（<10％湿度）保存在4°C，稳定6个月。冻干蛋白也可以在-70°C下干燥储存，在那里它可以稳定6个月。但是，在-70°C时，管盖上的橡胶密封可能会破裂并产生水分。因此，我们建议在4°C下储存。如果储存在-70°C，如果使用这种储存条件，则必须在干燥剂中加入冻干蛋白。用10μl冷的Milli-Q水将蛋白质复合物重悬至5mg / ml。重悬后，复合物在以下缓冲液中：20 mM Tris pH 7.5,25 mM KCl，1 mM MgCl 2，0.5mM EDTA，0.1mM ATP，1.0％（v / v）葡聚糖和5％（v / v）蔗糖。然后将蛋白质等分成实验大小的量，在液氮中快速冷冻并在-70℃下储存，在此稳定6个月。Arp2 / 3的进一步稀释应在以下缓冲液中进行：20mM Tris pH 7.5,25mM KCl，1mM MgCl 2和1mM DTT（注意：在使用前立即将DTT加入缓冲液中）。注意：将液体氮中的Arp2 / 3蛋白快速冷冻非常重要，因为其他冷冻方法会导致活性显着降低。通过置于室温水浴中1分钟快速除霜。避免反复冻/融循环。
问题2：Arp2 / 3（Cat。＃RP01P）是否与肌动蛋白聚合试剂盒（Cat。＃BK003）兼容？
答案2： 是的，Arp2 / 3与肌动蛋白聚合试剂盒（Cat。＃BK003）配合使用可以很好地研究肌动蛋白结合蛋白对肌动蛋白聚合的影响。有关其他信息，请参阅Arp2 / 3数据表（Cat。＃RP01P）。Arp2 / 3复合物能够在体外以1：200的摩尔比（Arp2 / 3：肌动蛋白）诱导肌动蛋白丝的支化聚合。这种刺激在体外可观察到聚合试验; 然而，在典型的聚合条件下，单独的Arp2 / 3的刺激非常低。在存在N-WASP蛋白（或N-WASP的VCA结构域，Cat。＃VCG03）的情况下，Arp2 / 3的成核活性大大增强。在Arp2 / 3数据表中描述的聚合测定中，芘肌动蛋白（Cat。＃AP05或BK003）的终浓度为0.8μM，Arp2 / 3复合物为10 nM，VCA结构域（Cat。＃VCG03） ）是400 nM。
注意： 来自procine大脑的RP01P取代牛脑中的RP01。我们比较了两种来源的Arp2 / 3复合物的活性，并发现它们在肌动蛋白聚合试验中表现相同。以下测定参考Arp2 / 3蛋白复合物：牛脑（Cat.RP01）。
Leng，Y.，Zhang，J.，Badour，K.，Arpaia，E.，Freeman，S.，Cheung，P.，Siu，M。和Siminovitch，K。（2005）。Abelson-interactctor-1促进WAVE2活化所需的WAVE2膜易位和Abelson介导的酪氨酸磷酸化。PROC。国家科。科学院。科学。美国102,1098-1103。
van der Gucht，J.，Paluch，E.，Plastino，J。和Sykes，C。（2005）。应力释放驱动基于肌动蛋白的运动的对称性破坏。PROC。国家科。科学院。科学。美国102,7847-7852。
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货号 |
品名 |
规格 |
品牌 |
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BK165-S |
Signal-Seeker™ SUMOylation 1 Detection Kit |
(10 assay) |
cytoskeleton |
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BK165 |
Signal-Seeker™ SUMOylation 1 Detection Kit |
(30 assay) |
cytoskeleton |
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BK163-S |
Signal-Seeker™ Acetyl-Lysine Detection Kit |
(10 assay) |
cytoskeleton |
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BK163 |
Signal-Seeker™ Acetyl-Lysine Detection Kit |
(30 assay) |
cytoskeleton |
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BK160-S |
Signal-Seeker™ Phosphotyrosine Detection Kit |
(10 assay) |
cytoskeleton |
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BK160 |
Signal-Seeker™ Phosphotyrosine Detection Kit |
(30 assay) |
cytoskeleton |
|
BK162-S |
Signal-Seeker™ SUMOylation 2/3 Detection Kit |
(10 assay) |
cytoskeleton |
|
BK162 |
Signal-Seeker™ SUMOylation 2/3 Detection Kit |
(30 assay) |
cytoskeleton |
|
BK161-S |
Signal-Seeker™ Ubiquitination Detection Kit |
(10 assay) |
cytoskeleton |
|
BK161 |
Signal-Seeker™ Ubiquitination Detection Kit |
(30 assay) |
cytoskeleton |
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AAC04-Beads |
Acetyl-Lysine Affinity Beads |
ea |
cytoskeleton |
|
APY03-Beads |
Anti-Phosphotyrosine Affinity Beads |
ea |
cytoskeleton |
|
ASM11-Beads |
SUMOylation 1 Affinity Beads |
ea |
cytoskeleton |
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ASM24-Beads |
SUMOylation 2/3 Affinity Beads |
ea |
cytoskeleton |
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UBA01-Beads |
Ubiquitination Affinity Beads |
ea |
cytoskeleton |
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CIG02-Beads |
Acetyl-Lysine Control Beads |
ea |
cytoskeleton |
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CIG03-Beads |
SUMO1 IP Control Beads |
ea |
cytoskeleton |
|
CIG01-Beads |
IgG Control Beads |
ea |
cytoskeleton |
|
CUB02-Beads |
Ubiquitination Control Beads |
ea |
cytoskeleton |
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BLR01 |
BlastR™ Rapid Lysate Prep Kit |
ea |
cytoskeleton |
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BLR02 |
BlastR™ Rapid Filtration Kit |
ea |
cytoskeleton |
|
AAC02 |
Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (7B1) |
ea |
cytoskeleton |
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AAC03 |
Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (19C4B2.1) |
ea |
cytoskeleton |
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AAC03-HRP |
Acetyl Lysine-HRP Antibody Mouse Monoclonal (19C4B2.1) |
ea |
cytoskeleton |
|
AAC01 |
Acetyl Lysine Antibody Mouse Monoclonal (3C6.08.20) |
ea |
cytoskeleton |
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APY03 |
Phosphotyrosine Antibody Mouse Monoclonal (27B10) |
ea |
cytoskeleton |
|
APY03-HRP |
Phosphotyrosine-HRP Antibody Mouse Monoclonal (27B10) |
ea |
cytoskeleton |
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ASM01 |
SUMO1 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 5D8B16) |
ea |
cytoskeleton |
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ASM24 |
SUMO-2/3 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 11G2) |
ea |
cytoskeleton |
|
ASM23 |
SUMO-2/3 Antibody Mouse Monoclonal (Clone 12F3) |
ea |
cytoskeleton |
|
ASM23-HRP |
SUMO-2/3-HRP Antibody Mouse Monoclonal (Clone 12F3) |
ea |
cytoskeleton |
|
AUB01 |
Ubiquitin Antibody Mouse Monoclonal |
ea |
cytoskeleton |
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AUB01-HRP |
Ubiquitin-HRP Antibody Mouse Monoclonal |
ea |
cytoskeleton |
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PHDG1 |
Acti-stain 488 phalloidin |
ea |
cytoskeleton |
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PHDH1 |
Acti-stain 555 phalloidin |
ea |
cytoskeleton |
|
PHDN1 |
Acti-stain 670 phalloidin |
ea |
cytoskeleton |
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BK001 |
Actin Binding Protein Spin-Down Assay Biochem Kit: rabbit skeletal muscle actin |
ea |
cytoskeleton |
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BK003 |
Actin Polymerization Biochem Kit (fluorescence format): rabbit skeletal muscle actin |
ea |
cytoskeleton |
|
AKL95 |
Actin protein (>95% pure): rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
AD99 |
Actin protein (>99% pure): bovine cardiac muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
AS99 |
Actin protein (>99% pure): chicken gizzard muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
AKL99 |
Actin protein (>99% pure): rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
AKF99 |
Actin protein (pre-formed filaments): rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
AP05 |
Actin protein (pyrene labeled): rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
APHR |
Actin protein (rhodamine): human platelet |
ea |
cytoskeleton |
|
AR05 |
Actin protein (rhodamine): rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
AT01 |
Alpha-actinin protein: rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
RP01P |
Arp2/3 protein complex: porcine brain |
ea |
cytoskeleton |
|
CS-TFC01 |
Cardiac Thin Filament Complex (CTFC) |
ea |
cytoskeleton |
|
CF01 |
Cofilin 1 protein: human recombinant |
ea |
cytoskeleton |
|
HPG6 |
Gelsolin protein: Homo sapiens recombinant |
ea |
cytoskeleton |
|
MH01 |
Heavy meromyosin protein |
ea |
cytoskeleton |
|
CS-MH03 |
Heavy Meromyosin Protein (HMM Fragment) |
ea |
cytoskeleton |
|
CS-MYS03 |
Myosin – cardiac S1 fragment |
ea |
cytoskeleton |
|
CS-MYS04 |
Myosin – skeletal muscle S1 fragment |
ea |
cytoskeleton |
|
CS-MYS05 |
Myosin – smooth muscle S1 fragment |
ea |
cytoskeleton |
|
MY02 |
Myosin II protein: rabbit skeletal muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
MY03 |
Myosin protein: bovine cardiac muscle |
ea |
cytoskeleton |
|
PR02 |
Profilin 1 protein: Untagged, human recombinant |
ea |
cytoskeleton |
|
PHDR1 |
Rhodamine Phalloidin |
ea |
cytoskeleton |
|
CY-SC001 |
SiR-Actin Kit |
ea |
cytoskeleton |
|
CY-SC013 |
SiR700-Actin Kit |
ea |
cytoskeleton |
|
VCG03 |
WASP protein VCA domain: GST tagged: human |
ea |
cytoskeleton |
上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商
1：强大的进口辐射能力，血清、抗体、耗材、大部分限制进口品等。
2：产品种类齐全，经营超过700多品牌，基本涵盖所有生物实验试剂耗材。
3：提供加急服务，货品一般1-2周到货。
4：富有竞争力的价格优势，绝大部分价格有优势。
5：多年积累良好的信誉，大部分客户提供货到付款服务。客户包括清华、北大、交大、复旦、中山等100多所高校，ROCHE，阿斯利康、国药、fisher等知药企。
6：我们还是Santa,Advanced Biotechnologies Inc,Athens Research & Technology,bangs,BBInternational,crystalchem,dianova,FD Neurotechnologies,Inc. FormuMax Scientific,Inc, Genebridege, Glycotope Biotechnology GmbH; iduron,Innovative Research of America, Ludger, neuroprobe,omicronbio, Polysciences,prospecbi, QA-BIO,quickzyme,RESEARCH DIETS,INC,sterlitech；sysy,TriLink BioTechnologies,Inc；worthington-biochem,zyagen等几十家国外公司代理。
7：我们还是invitrogen,qiagen,MiraiBioam,sigma;neb,roche,merck, rnd,BD, GE,pierce,BioLegend等知*批发，欢迎合作。