pnabio具有NLS的Cas9蛋白
Cas9 Protein with NLS
与引导RNA结合的Cas9蛋白比质粒或mRNA转染为CRISPR / Cas9技术提供了优势。大的好处是您可以使RNP复合物易于在体内工作。Cas9蛋白寿命短（细胞中半衰期约为24小时），因此将脱靶效应和镶嵌性降至低。您还可以通过简单的裂解分析轻松地体外测试指导RNA的活性。此外，Cas9蛋白非常稳定，与mRNA相比，活性确认要容易得多。后，由于它不需要转录或翻译，因此它在线虫，昆虫，植物和非典型模型系统等更广泛的生物中具有活性。
PNA Bio提供的Cas9蛋白与NLS偶联，可以注射/转染。
Cy3-Cas9可以很容易地富集被CRISPR / Cas9复合物转染的细胞。
体外裂解测定
将PCR产物与各种量的Cas9蛋白一起孵育并在凝胶上电泳。体外裂解测定是检查sgRNA活性的简单方法。
RNP复合体的转染
sgRNA的RNP复合体和各种Cas9蛋白通过电穿孔（Neon）或脂转染胺（LF2000）转染到NIH3T3细胞中。
注射RNP复合物
对于小鼠胚胎注射，将60ng / ul的Cas9蛋白和15ng / ul的两个sgRNA各自的RNP复合物注射到小鼠胚胎中。从幼犬中提取尾巴DNA并进行T7E1检测。灰色代表野生型，绿色代表大缺失（＃2,3,4,8），红色代表小in / del（＃5,6,7），蓝色代表纯合子。小in / del（＃9，10）。
Cas9蛋白
- 化脓性链球菌 NLS的Cas9蛋白
- 注射，转染就绪
- 通过体外裂解测定，电穿孔（作为RNP复合物）和
每批小鼠胚胎注射验证的活性 - 标准浓度（CP01，重构为1 mg / ml）：20 ug，50 ug或200 ug（50 ug x 4）
- 高浓度（CP02和CP03，重构为5 mg / ml）：250 ug（CP02）或1 mg（CP03，250 ug x 4）
- 包装：CP01为20 ug或50 ug，CP02 / CP03为250 ug
- 建议使用CP01进行显微注射，建议使用CP02 / CP03进行电穿孔
- 也可用：D10A切口酶（CN01）和D10A / H840A dCas9（CD01）蛋白
- 如果美国东部时间下午5点之前收到订单，Cas9蛋白通常在同一天发货
- 欲了解更多，请联系我们 order@pnabio.com或单击此处。
Cas9蛋白的液体形式
- 可用量为1 mg / ml或5 mg / ml
- CP04-100：1毫克/毫升（6 uM），20 ug x 5管
- CP04-500：5毫克/毫升（30 uM），100 ug x 5管
高保真SniperCas9蛋白
- 具有高保真度且不影响活性的Cas9蛋白变体
- 通过定向进化方法发现
- 可用1 mg / ml（CSP01）或5 mg / ml（CSP02）
- 阅读有关SniperCas9的新出版物
- 切口酶和dCas9蛋白
- 化脓性链球菌的带有NLS的D10A Cas9切口酶蛋白（CN01和CN02）
- D10A / H840A Cas9用化脓性链球菌（CD01和CD02）的NLS裂解死亡蛋白
- 有50 ug大小（CN01 / CD01，重构为1 mg / ml）或250 ug大小（CN02 / CD02）。
Cy3-Cas9和Cy3-dCas9蛋白
- Cy3用NLS（CP06）标记的Cas9蛋白，可对转染的细胞进行分类和可视化
- 共聚焦显微镜检测荧光
- 通过体外裂解测定和细胞转染证实活性
- 提供25 ug，50 ug，100 ug或200 ug（CP06-200）
- 浓度1 mg / ml或5 mg / ml
- 也提供Cy3标记的dCas9蛋白（CD07）
Cy3-Cas9蛋白的活性通过电穿孔进入细胞，然后进行T7E1分析来确认。通过共聚焦显微镜确认荧光。
| 产品 | 描述 | 可用尺寸 |
| CP01 Cas9蛋白 |
具有NLS的Cas9蛋白（可注射）； 重构为1 mg / ml（6 uM） |
20 ug（120 pmol / 6 uM x 20 ul） 50 ug（300 pmol / 6 uM x 50 ul） 200 ug（50 ug x 4管） |
| CP02 高浓度 Cas9蛋白 |
具有NLS的Cas9蛋白（可注射）； 重构为5 mg / ml（30 uM） |
250 ug（1530 pmol / 30 uM x 50 ul） |
| CP03 高浓度 Cas9蛋白 |
具有NLS的Cas9蛋白（可注射）； 重构为5 mg / ml（30 uM） |
1毫克（250 ug x 4） |
| CP04-100 Cas9蛋白 |
具有NLS的Cas9蛋白（可注射）； 液体形式，1 mg / ml（6 uM） |
100 ug（20 ug x 5） |
| CP04-500 高浓度 Cas9蛋白 |
具有NLS的Cas9蛋白（可注射）； 液体形式，5 mg / ml（30 uM） |
500 ug（100 ug x 5） |
| CS01 SniperCas9蛋白 |
HF Cas9 protein with NLS (injection ready); reconstitutes to 1 mg/ml (6 uM) |
50 ug (300 pmol / 6 uM x 50 ul) 200 ug (50 ug x 4 tubes) |
| CS02 High conc SniperCas9 protein |
HF Cas9 protein with NLS (injection ready); reconstitutes to 5 mg/ml (30 uM) |
250 ug (1530 pmol / 30 uM x 50 ul) |
| CN01 nickase protein |
Cas9 D10A Nickase protein injection ready with NLS; reconstitutes to 1 mg/ml (6 uM) | 50 ug |
| CN02 nickase protein |
Cas9 D10A Nickase protein injection ready with NLS; reconstitutes to 5 mg/ml (30 uM) | 250 ug |
| CD01 dCas9蛋白 |
具有NLS的Cas9 D10A / H840A蛋白; 准备注射，复溶至1 mg / ml（6 uM） |
50微克 |
| CD02 dCas9蛋白 |
具有NLS的Cas9 D10A / H840A蛋白; 准备注射，复溶至1 mg / ml（6 uM） |
250 ug（50 ug x 5管） |
| CP06 Cy3-Cas9蛋白 |
Cy3用NLS标记Cas9蛋白； 1 mg / ml或5 mg / ml溶液（30 uM） |
25 ug / 50 ug / 100 ug / 200 ug |
| CD07 Cy3-dCas9蛋白 |
Cy3用NLS标记Cas9死亡蛋白； 5 mg / ml溶液（30 uM） |
50微克 200微克 |