abbexa abx513030说明书

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abbexa abx513030说明书

1,25-Dihydroxyvitamin D3 (Calcitriol) ELISA Kit

Catalogue No: abx513030

Price: £395.00 

Available Options

* Size: 96 tests 

Calcitriol ELISA Kit is an ELISA kit against Calcitriol

骨化三醇ELISA试剂盒是针对骨化三醇的ELISA试剂盒。 
 

目标 1,25-二羟基维生素D3（骨化三醇）
反应性 一般（所有物种）
经过测试的应用 ELISA法
建议稀释 宜稀释/浓度应由终用户确定。
存储 出厂时温度为4°C。收到后，请按照试剂盒手册中的存放说明存放试剂盒。
有效期 该套件的有效期为6个月。
稳定性 试剂盒的稳定性取决于活性丧失的速率。在适当的存储条件下，有效期内的丢失率小于5％。为了大程度地降低性能波动，应严格控制操作程序和实验室条件。还强烈建议整个测试始终由同一用户执行。
测试范围 15.6 pg / ml-1000 pg / ml
灵敏度 <3.6皮克/毫升
标准格式 冻干
ELISA检测 比色法
ELISA数据 定量的
样品类型 血清，血浆和其他生物液体。
测定原理 该试剂盒基于三明治酶联免疫吸附测定技术。将抗体预包被到96孔板上。将标准品，测试样品和生物素偶联试剂添加到孔中并孵育。然后加入结合了HRP的试剂，并孵育整个平板。在每个阶段使用洗涤缓冲液去除未结合的结合物。TMB底物用于定量HRP酶促反应。添加TMB底物后，只有含有足够量的骨化三醇的孔才会产生蓝色产物，然后在加入酸性终止溶液后变为黄色。黄色的强度与结合在板上的骨化三醇的量成比例。在酶标仪中于450 nm处用分光光度法测量光密度（OD），由此可计算出骨化三醇的浓度。
套件组件
  • 预涂96孔微孔板
  • 标准
  • 标准稀释液
  • 洗涤缓冲液
  • 检测试剂A
  • 检测试剂B
  • 稀释剂A
  • 稀释剂B
  • TMB基板
  • 停止解决方案
  • 封口机
必需但未提供的材料
  • 37°C恒温箱
  • 多通道和单通道移液器以及无菌移液器吸头
  • 喷瓶或自动微孔板清洗机
  • 1.5毫升管
  • 蒸馏水
  • 吸收性滤纸
  • 100毫升和1升刻度量筒
  • 酶标仪（波长：450 nm）
  • ELISA摇床
试剂准备
  • 1）标准液：用推荐体积的标准稀释液配制标准液，制成标准溶液。然后，按照协议中的说明，使用标准稀释剂缓冲液对标准溶液进行系列稀释。
  • 2）洗涤缓冲液：按照协议中的说明，用蒸馏水稀释浓缩的洗涤缓冲液。
  • 3）检测试剂制备：计算所需工作溶液的总体积。用稀释剂A和稀释剂B分别以1：100稀释检测试剂A和检测试剂B。
测定步骤
  • 1）设置标准品，测试样品和对照孔。
  • 2）将100μl稀释的标准液分装到标准孔中。
  • 3）将100μl标准稀释缓冲液等分到对照（零）孔中。
  • 4）将100μl稀释样品等分到样品孔中。在37°C下孵育1小时。
  • 5）将100μl检测试剂A分装到每个孔中。在37°C下孵育1小时。
  • 6）洗3次。
  • 7）将100μl检测试剂B分装到每个孔中。在37°C下孵育30分钟。
  • 8）洗5次。
  • 9）将90μlTMB底物等分到每个孔中。在37°C下孵育10-20分钟。
  • 10）分装50μl终止溶液。
  • 11）在450 nm下测量OD。
协议
  • 使用前，将试剂盒的组分和样品平衡至室温（18-25°C）。建议为每个测试绘制标准曲线。
  • 1.在预涂板上分别设置标准孔，测试样品孔和对照孔（零孔），然后记录其位置。建议测量每个标准品和样品至少一式两份。
  • 2.将100 µL的每种标准品，对照品和样品加入适当的孔中。用盖密封板并在37°C下孵育1小时。
  • 3.取下盖子并丢弃液体。
  • 4.向每个孔中添加100μl检测试剂A工作溶液。用盖密封板并在37°C下孵育1小时。
  • 5.取下盖子并丢弃溶液。用1X Wash Buffer清洗板3次。
  • 6.将100 µL检测试剂B工作溶液添加到每个孔中，密封并在37°C孵育30分钟。
  • 7.弃去溶液并按照上一步中的说明用洗涤缓冲液将板洗涤5次。
  • 8.将90μlTMB底物等分到每个孔中。用盖密封板并在37°C下孵育10-20分钟。避免暴露在光线下。孵育时间仅供参考，宜时间应由终用户确定。请勿超过30分钟。
  • 9.向每个孔中加入50 µL终止溶液。立即在450 nm处读取。
结果计算 为了进行计算，请对每个参考标准品和每个样品的OD450重复读数取平均值，然后减去平均对照（零）OD450读数。可以将标准曲线绘制为每种参考标准溶液（Y）的相对OD450与每种标准溶液（X）的各自浓度的关系。样品的骨化三醇浓度可以从标准曲线内插。
可用性 在5-12个工作日内发货。
注意 本产品仅供研究使用。

 

范围和灵敏度可能会发生变化。请与我们联系以获取新的产品信息。为了获得准确的结果，必须将样品浓度稀释到试剂盒的中间范围。
请注意，我们的ELISA和CLIA试剂盒针对检测天然样品（而非重组蛋白）进行了优化。我们无法保证检测到重组蛋白，因为它们与天然蛋白可能具有不同的序列或三级结构。