kurabiotec BG100说明书

 

产品：BG100

版本：3.0，2019年1月

BG100®β-葡萄糖醛酸酶

红鲍

EC编号：3.2.1.31

中国科学院编号：9001-45-0

产品代码：BG100-10ml，BG100-25ml，BG100-50ml

产品描述

BG100®是一种来源于红鲍鱼内脏的软体动物β-葡萄糖醛酸酶。在用酶法、免疫分析法、质谱法、色谱法等方法进行分析之前，它已被用于从尿液和其他基质如胎粪中酶解葡萄糖醛酸。与许多来源于软体动物的葡萄糖醛酸酶一样，BG100®也含有一些硫酸酯酶活性。

BG100®比螺旋藻、外阴髌骨、甚至是普通鲍鱼来源的β-葡萄糖醛酸酶具有更广泛的亚速率适应性和更高的效率。耐高温，

BG100®允许用户在更高的温度下进行孵化，在更短的时间内实现*水解，特别是在吗啡-3-g、可待ying-6-g或诺丁丙诺非等难以分解的代谢物中。

由于部分纯化，BG100®有助于简化样品制备，避免色谱柱堵塞，并通过减少背景噪声干扰提高分析质量。

 

产品概述

产品形态：液体

温度范围：55-80°C

宜温度：68°C

pH范围：4.0-5.0

宜ph值：4.8

分子质量：~280kDa

储存/稳定性：2-8°C至少12个月

葡萄糖醛酸酶活性≥100000 U/ml

活动单元定义：一个单元将解放

在pH值为5.0和37°C时，每小时从酚酞葡萄糖醛酸中提取1.0μg酚酞（30分钟测定）

硫酸酯酶活性：≤8000 U/ml

活性单位定义：一单位硫酸酯酶

在pH 5.0和37°C下每小时水解1.0μmole对硝基邻苯二酚

BG100®分步水解

协议

1。可选的尿液样本离心，4°C，20000 x g，5分钟。

2。吸管100μl尿样。

三。根据表1添加缓冲液+BG100？+ISD+蒸馏水。

4。轻轻但*地混合。

5。在68℃下孵育45分钟。更多孵化时间见表2。

6。在25000 x g下离心10分钟。

 

笔记

•上述方案以100μl的初始尿量为基础。通过保持给定的比例，混合物可以适应任何所需的尿量。

•保持低酶尿比1:4很重要，以便

在表2所示的时间内达到预期的回收率，无论是在加标尿液中还是在真实样本中。

•必须将尿液稀释至少3至4倍，以优化酶活性。（速度是2倍）。

•终混合物中缓冲液的摩尔浓度应在120至170 mm范围内，以达到宜水解速度。在较低或较高的摩尔浓度下，速度降低。

•混合物中甲醇含量不得超过5%。

•可制备含有缓冲液、酶、水和ISD的主混合物，以简化工作流程。保持冷藏（2至8摄氏度）。

每天准备新鲜的。不要冻僵。

参考文献

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2。Jagerdeo，E和Schaaff，J.（2016年）。用超液相色谱/轨道质谱仪快速筛选生物液体中的药物或滥用，色谱学杂志B，1027，11-18。

三。关颖珊、麦肯尼、席尔瓦、拉比亚和罗萨斯。（2016）法医毒理学学会。海报：使用第二代酶简化样品制备。

四。Schedweiler，K；Sempio，C.等人。（2016）法医毒理学学会。海报：重组大肠杆菌“uglucuronidase”对人尿中8种大麻素的水解优化。

五。Derosiers，N；Scheidweiler，K；Huestis，M.（2015年）。液相色谱-串联质谱法测定口服液中6种大麻素及其代谢产物的含量。J.药物测试和分析，7655-736。

六。Ellis，K；McConnell，K.等人。（2015）海报：可待ying和吗啡葡萄糖醛酸在尿液中的快速酶解。