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Collagenase胶原酶

来源:溶组织梭菌

IUB:3.4.24.3

胶原酶原料认证 

粗胶原酶制剂含有两种不同胶原酶的几种同工型,一种巯基蛋白酶、梭菌蛋白酶、一种胰蛋白酶样酶和一种氨肽酶。这种胶原蛋白水解和蛋白水解活性的组合可有效分解细胞间基质,这是组织解离的重要部分。该复合物的一个成分是水解酶,它优先在序列 Pro-Y-Gly-Pro 中的 Y-Gly 键处降解天然胶原蛋白中的螺旋区域,其中 Y 最常见的是中性氨基酸。这种切割产生对进一步肽酶消化敏感的产物。粗胶原酶被半胱氨酸、EDTA 或邻菲咯啉等金属螯合剂抑制,但 DFP 不抑制。它也被一种大的血浆糖蛋白α2-巨球蛋白抑制。钙2+是酶活性所必需的。每种胶原酶的特定酶谱已与从中获得研究细胞的组织(或与放置细胞的用途)相关,并且作为相关性的结果,Worthington 已经建立了几种类型的粗胶原酶:类型 1、2、3 和 4。

• 1 型粗胶原酶具有胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性的原始平衡。
• 2 型含有较高相对水平的蛋白酶活性,尤其是梭菌蛋白酶。
• 3 型含有低水平的二级蛋白酶。
• 4 型被设计成胰蛋白酶活性特别低,以限制对膜蛋白和受体的损害。
• 5 型 含有较高的胶原酶和酪蛋白酶值。
• 6 型 含有高胶原酶活性,酪蛋白酶与胶原酶的比例约为 2:1。设计为相对于 I 型 ( col  G)富含 II 型 ( col  H) 胶原酶。
• 7 型胶原酶和酪蛋白酶的活性比 1 型和 2 型胶原酶高四倍。

 •纯化的胶原酶,代码:CLSPA,含有最少的二次蛋白水解活性和高胶原酶活性。

 

新的! 无动物型 AFA、AFB 和 AFC、STZ1 和 STZ2胶原酶源自在*不含动物成分的培养基中生长的培养物,设计用于必须防止引入潜在动物源性病原体的生物加工应用。二级蛋白酶的水平与 1 型和 2 型胶原酶相似。

•  CLSAFA 是最初的 AFA 等级,旨在含有类似于 1 型和 2 型胶原酶的胶原酶和二级蛋白酶。
•  CLSAFB 含有比 CLSAFA 更高的胶原酶和酪蛋白酶活性。
•  CLSAFC 具有特别低的胰蛋白酶活性,类似于 4 型胶原酶。
•  STZ1 和 STZ2,0.22μ 过滤的 STEMxyme ® AOF 胶原酶/中性蛋白酶 (Dispase®) 混合物,用于原代细胞和干细胞分离。 

 

Worthington 还提供预包装形式的每种类型的 0.22µm 过滤制剂,用于直接重组和用于细胞分离和培养程序。酶类型和不同组织的有效性之间的相关性很好,部分原因是使用的可变参数。然而,大多数研究人员认为粗胶原酶批次的组织分型是一项有价值的服务。Worthington 胶原酶和污染物检测的详细说明可在Worthington 酶手册中找到。此外,组织特异性参考和详细的分离条件可以在Worthington 组织分离指南中找到。

胶原酶测定是Mandl的改进,其中将胶原酶与天然胶原一起温育5小时,并使用Moore and Stein, JBC, 176 , 367, (1948)比色茚三酮法测定胶原分解的程度。释放的氨基酸以每毫克胶原酶微摩尔亮氨酸表示。

用途:粗胶原酶广泛用于酶促原代细胞分离和组织解离程序。大多数研究人员要么使用粗制胶原酶制剂,例如 1、2、3 和 4 型,要么使用色谱纯化的胶原酶(代码:CLSPA);后者通常与二级酶如弹性蛋白酶、透明质酸酶等结合。为了获得最佳结果,必须针对要解离的组织调整蛋白水解活性的精确混合。不同组织的类型和有效性之间的相关性很好,并且可能部分取决于使用参数和目标以及批次间的差异。如需更多信息,请参阅胶原酶取样程序信息。Worthington 还出版了组织分离指南它提供了有关用于这些应用的酶的更多信息以及多种细胞和组织类型的具体参考。

单位定义:一个单位在 37°C、pH 7.5 下 5 小时内从胶原蛋白中释放 1 微摩尔 L-亮氨酸当量

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胶原蛋白 (CL)
脱氧核糖核酸酶 I (DP/D/DCLS/D2/DPFF/DPRF)
弹性蛋白酶 (ES/ESL/ESFF)
透明质酸酶 (HSE/HSEP)
中性蛋白酶 (Dispase, NPRO)
木瓜蛋白酶 (PAP/PAPL/PAP2)蛋白酶 K (PROK)
胰蛋白酶 (TL/TRL/TRL3/TRLS/TRTPCK)
胰蛋白酶抑制剂 (LBI/OI/SI/SIC)

细胞分离优化系统 (CIT)
肝细胞分离系统 (HIS)
新生儿心肌细胞分离系统 (NCIS)
木瓜蛋白酶解离系统 (PDS/PDS2)

 

 

描述 活动 代码 尺寸 货号
胶原酶,纯化
色谱纯化。≤ 50 个酪蛋白酶单位/毫克。以冻干粉形式提供。
储存在 2-8°C。
≥500 单位/毫克干重 CLSPA 4库 LS005275
10库 LS005273
LS005277
Collagenase Vial, NCIS
NCIS 试剂盒的一个组件。该材料经过 0.22 微米膜过滤并在高压灭菌小瓶中冻干。用 5 ml HBSS 或等价物重构的小瓶产生 300 单位/ml 胶原酶溶液,代码:CLSPA。适用于细胞分离和培养应用。
储存在 2-8°C。
≥500 单位/毫克干重 CLSPANK 1 六 LK003240
5 六 LK003245
胶原酶/弹性蛋白酶瓶 (CLSH)
HIS 试剂盒的酶瓶,含有 20,000 单位胶原酶(代码:CLS-1)和 30 单位弹性蛋白酶(代码:ESL),通过 0.22 微米膜过滤并冻干。
储存在 2-8°C。
每瓶≥20,000 单位胶原酶/30 单位弹性蛋白酶 CLSH 1 六 LK002066
5 六 LK002067
胶原酶,1 型
酶活性的原始平衡。每个批次都检测胶原酶、酪蛋白酶、梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性。建议用于上皮细胞、肝细胞、肺细胞和肾上腺原代细胞分离。一种透析的冻干粉末。
储存在 2-8°C。
≥125 单位/毫克干重 CLS-1 100 毫克 LS004194
LS004193
1克 LS004196
5克 LS004197
LS004200
胶原酶,2 型
准备含有更高的梭菌蛋白酶活性。建议用于骨骼、心脏、肝脏、甲状腺和唾液原代细胞分离。以透析、冻干粉末的形式提供。
储存在 2-8°C。
≥125 单位/毫克干重 CLS-2 100 毫克 LS004174
1克 LS004176
5克 LS004177
LS004179
胶原酶,3 型
次级蛋白水解污染物活性较低,但具有典型的胶原酶活性。建议用于乳腺原代细胞分离。一种透析的冻干粉末。
储存在 2-8°C。
≥100 单位/毫克干重 CLS-3 100 毫克 LS004180
1克 LS004182
5克 LS004183
LS004185
4 型胶原酶
准备含有较低的胰蛋白酶活性水平,以限制对膜蛋白和受体的损害,但胶原酶活性正常或高于正常。建议用于胰岛初级分离。一种透析的冻干粉末。
储存在 2-8°C。
≥160 单位/毫克干重 CLS-4 100 毫克 LS004186
1克 LS004188
5克 LS004189
LS004191
5
型胶原酶经过部分纯化,含有更高的胶原酶和酪蛋白酶活性。一种透析的冻干粉末。
储存在 2-8°C。
≥450 单位/毫克干重 CLS-5 100 毫克 LS005280
1克 LS005282
5克 LS005283
LS005284
胶原酶,6 型
准备含有高于正常的胶原酶、FALGPA 和酪蛋白酶活性,并设计为富含 II 型 ( col H ) 胶原酶。
储存在 2-8°C。
≥400 单位/毫克干重 CLS-6 100 毫克 LS005318
500 毫克 LS005319
2.5 克 LS005321
LS005323
胶原酶,7 型
准备含有比胶原酶 1-4 多 4-5 倍的胶原酶、FALGPA 和酪蛋白酶活性,并具有中等的梭菌蛋白酶和胰蛋白酶活性。
 
 
储存在 2-8°C。
≥1,000 单位/毫克干重 CLS-7 100 毫克 LS005332
500 毫克 LS005333
2.5 克 LS005335
LS005337
胶原酶,1 型,过滤
胶原酶,1 型(代码:CLS-1),通过 0.22 微米膜过滤并在小瓶中冻干。
储存在 2-8°C。
≥125 单位/毫克干重 CLSS-1 50 毫克 LS004214
5×50 毫克 LS004216
1克 LS004217
2 型胶原酶,2 型过滤
胶原酶(代码:CLS-2),通过 0.22 微米膜过滤并在小瓶中冻干。
储存在 2-8°C。
≥125 单位/毫克干重 CLSS-2 50 毫克 LS004202
5×50 毫克 LS004204
1克 LS004205
胶原酶,3 型,过滤
胶原酶,3 型(代码:CLS-3),通过 0.22 微米膜过滤并在小瓶中冻干,每小瓶含有 50 毫克。
储存在 2-8°C。
≥100 单位/毫克干重 CLSS-3 50 毫克 LS004206
5×50 毫克 LS004208
胶原酶,4 型,过滤
胶原酶,4 型(代码:CLS-4),通过 0.22 微米膜过滤并在小瓶中冻干。
储存在 2-8°C。
≥160 单位/毫克干重 CLSS-4 50 毫克 LS004210
5×50 毫克 LS004212
1克 LS004209
5 型胶原酶,5 型过滤
胶原酶(代码:CLS-5),通过 0.22 微米膜过滤并在小瓶中冻干。
储存在 2-8°C。
≥450 单位/毫克干重 CLSS-5 50 毫克 LS005286
5×50 毫克 LS005287
1克 LS005288
胶原酶 CLSAFA Animal Free/AF
在*不含动物成分的培养基中生长的制备培养物,专为必须防止引入动物源性病原体的生物加工应用而设计。
储存在 2-8°C。
≥150 单位/毫克干重 CLSAFA 100 毫克 LS004152
1克 LS004154
5克 LS004156
LS004158
胶原酶,CLSAFA,过滤
胶原酶,无动物/AF(代码:CLSAFA),通过 0.22 微米膜过滤并在小瓶中冻干。
储存在 2-8°C。
≥150 单位/毫克干重 CLSAFAS 50 毫克 LS004118
5X50 毫克 LS004119
LS004123
胶原酶 CLSAFB Animal Free/AF
由在*不含动物成分的培养基中生长的培养物制备而成,设计用于必须防止引入动物源性病原体的生物加工应用。
储存在 2-8°C。
≥300 单位/毫克干重 CLSAFB 100 毫克 LS004145
1克 LS004147
5克 LS004148
LS004150
胶原酶,CLSAFB,过滤
胶原酶,无动物/AF(代码:CLSAFB),通过 0.22 微米膜过滤并在小瓶中冻干。
储存在 2-8°C。
≥300 单位/毫克干重 CLSAFBS 50 毫克 LS004124
5×50 毫克 LS004125
LS004129
胶原酶 CLSAFC Animal Free/AF
由在*不含动物成分的培养基中生长的培养物制备而成,设计用于必须防止引入动物源性病原体的生物加工应用。
储存在 2-8°C。
≥200 单位/毫克干重 CLSAFC 100 毫克 LS004138
1克 LS004140
5克 LS004141
LS004143
Collagenase, CLSAFC, Filtered
Collagenase Animal Free/AF(代码:CLSAFC),通过 0.22 微米膜过滤并在小瓶中冻干。
储存在 2-8°C。
≥200 单位/毫克干重 CLSAFCS 50 毫克 LS004130
5×50 毫克 LS004131
LS004135
STEMxyme® 1,胶原酶/中性蛋白酶(分散酶)无动物性溶组织梭菌胶原酶(代码:CLSAFB)和无动物性多粘芽孢杆菌
中性蛋白酶 的专门组合,每毫克干重至少含有 250 个 CLS 单位和 1,000 个酪蛋白酶单位。专为干细胞和其他原代细胞分离和生物加工应用而设计,在这些应用中必须防止引入潜在的动物源性病原体。 储存在 2-8°C。
≥250 CLS/1,000 CAS 单位/毫克干重 STZ1 50 毫克 LS004106
5×50 毫克 LS004107
LS004111
STEMxyme® 2 胶原酶/中性蛋白酶(分散酶) 不含动物的溶组织梭菌 胶原酶(代码:CLSAFB)和不含动物的多粘芽孢杆菌
中性蛋白酶 的专门组合, 每毫克干重至少含有 250 个 CLS 单位和 2,000 个酪蛋白酶单位。专为干细胞和其他原代细胞分离和生物加工应用而设计,在这些应用中必须防止引入潜在的动物源性病原体。 储存在 2-8°C。
≥250 CLS/2,000 CAS 单位/毫克干重 STZ2 50 毫克 LS004112
5×50 毫克 LS004113
LS004117

 

上海金畔worthington现货产品

                                                                                                                                                                                                                   

货号 品名 规格 品牌
ls003126 Papain, Suspension 100mg Worthington
LK003163 Papain Dissociation System, Without EBSS 3 bx worthington
LK003150 Papain Dissociation System 1bx worthington
LS002140 Deoxyribonuclease I 1 gm Worthington
LK003178 PDS Kit Papain Vial 5vi Worthington
LS003118 Papain, Lyophilized 25mg worthington
LS002006 Deoxyribonuclease I 20mg Worthington
LS002274 Elastase, Suspension 25mg Worthington
LS02100 Neutral Protease (Dispase), Purified 10mg Worthington
LS02111 Neutral Protease, Partially Purified 5gm worthington
LS002290 Elastase, Lyophilized 25mg worthington
LS004196 Collagenase Type 1 (CLS-1) 1g worthington
LS004176 Collagenase, Type 2 (CLS-2)2型胶原酶 1gm worthington
LS002292 Elastase Lyophilized 100mg Worthington
LS003086 Trypsin Inhbitor, Ovomucoid 2 gm worthington
LS004176 Collagenase, Type 2 (CLS-2)2型胶原酶 1gm worthington
LS004196 Collagenase Type 1 (CLS-1) 1g worthington
LS004186 Collagenase, Type 4 100mg worthington
LS004194 Collagenase Type 1 (CLS-1) 100mg worthington
LS004182 Collagenase, Type 3 (CLS-3) 1g worthington
LS004188 Collagenase, Type 4 1gm Worthington
LS004191 Collagenase, Type 4 500 gm worthington
LS004174 Collagenase, Type 2 100mg worthington
LS004176 Collagenase, Type 2 (CLS-2)2型胶原酶 1gm worthington
LS003127 Papain, Suspension 1 gm worthington
LS003926 Phosphodiesterase I 100un Worthington
LS003740 Trypsin, TPCK Treated 100mg worthington
LS002138 Deoxyribonuclease I 25mg worthington
LS02104 Neutral Protease (Dispase), Purified 50mg Worthington
LS003744 Trypsin, TPCK Treated 1 gm worthington
LS002139 Deoxyribonuclease I 100mg worthington
LS004212 Collagenase, Type 4, Filtered Store at 2-8°C. 5x50mg worthington
LS004188 Collagenase, Type 4 1gm Worthington
LS004191 Collagenase, Type 4 500 gm worthington
LS003571 Trypsin Inhibitor, Soybean, Purified 1 gm worthington
LS02132 Chymotrypsin, Alpha, TLCK Treated, Sequencing Grade 4x100ug Worthington
LS001632 Cholinesterase, Butyryl 4 ku worthington
LK003163 Papain Dissociation System, Without EBSS 3 bx worthington
LS004188 Collagenase, Type 4 1gm Worthington
LS006344 Deoxyribonuclease I, RNase & Protease Free, Solution 500 un worthington
LS005275 Collagenase, Purified 4ku worthington
LS005273 Collagenase, Purified 10 ku worthington
LS001652 Collagen 5gm worthington
LS004189 Collagenase, Type 4 5 gm worthington
LS004182 Collagenase, Type 3 (CLS-3) 1g worthington
LS004180 Collagenase, Type 3 100mg Worthington
LS004185 Collagenase, Type 3 500 gm worthington
LS001896 Catalase Filtered 10ml Worthington
LS002880 Lysozyme 1G worthington
LS002105 Deoxyribonucleic Acid, Calf Thymus 100mg worthington
LS003554 Deoxyribonucleic Acid, Salmon Testes 1gm worthington