biogenes大肠杆菌|360-HCP ELISA说明书
大肠杆菌细胞广泛用于生物制药的生产。在药物开发过程中，残留宿主细胞蛋白 (HCP) 的分析对于确保生物制药的质量和安全非常重要。对于大肠杆菌，HCP 模式受应用制造条件的强烈影响。仅使用一组抗体的传统通用测定法并不能充分代表这种多样性。为了克服与传统通用 HCP 检测相关的限制，BioGenes 开发了增强型通用 E.coli|360-HCP ELISA，它由一组四种不同的通用试剂盒组成。
大肠杆菌中的 HCP模式受多种因素影响
1)大肠杆菌菌株的遗传背景
不同大肠杆菌菌株的基因组表现出显着的多样性。典型的大肠杆菌基因组编码约。4,500 – 5,000 个基因，其中大约 50% 的基因存在于核心基因组中。据估计，大肠杆菌的泛基因组包括约。128,000 个基因，因此携带了大量潜在的 HCP 物种。
2) 细胞培养条件
大肠杆菌的基因表达高度依赖于细胞的生长阶段、培养基和补充剂的类型以及生长条件。中枢代谢途径的重组、应激相关基因的表达和底物降解酶的分泌主要受营养物质的有效性和细胞应激条件（如温度、氧气和盐度）的影响。
3) 重组药物的性质
重组（外来）蛋白的过表达可导致重组菌株的蛋白质组在代谢功能蛋白、伴侣蛋白和热休克蛋白的表达模式方面发生显着变化。
为什么有四种套件类型？
所有这些条件共同影响了在大肠杆菌发酵过程中发生的* HCP 谱，没有单一的通用试剂盒能够检测每一个 HCP。E.coli|360-HCP ELISA
使用不同组的抗 HCP 抗体提供更高的检测特异性和灵敏度，分为四种试剂盒类型（A 型、C 型、D 型、E 型），用于优化 HCP 检测。
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大肠杆菌抗原的遗传背景：BL21 (DE3) & W3110
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发酵培养基：LB培养基和矿物培养基
由于难以预测大肠杆菌中的 HCP 谱，我们建议先测试所有四种试剂盒类型，然后根据 ELISA 关键参数（如稀释线性、准确度和总覆盖率）选择性能最佳的试剂盒。
| 类型 | 细胞系 | 生长培养基 |
|---|---|---|
| A型（第二代即将发布） | BL21 (DE3) | 矿物介质 |
| E型 | W3110 | 矿物介质 |
| D型（第二代即将发布） | BL21 (DE3) | LB培养基 |
| C型 | W3110 | LB培养基 |
请注意：在 360-HCP ELISA 试剂盒中从 Triton™ X-100 转换为 TWEEN®20
根据 REACH（化学品的注册、评估、和限制）法规 (EC) No 1907/2006 的附件 XIV，Triton™ X-100（包含 4-(1,1,3,3-四甲基丁基)苯酚，乙氧基化）将在 2021 年 1 月 1 日之前在我们所有的 ELISA 试剂盒组件中被 TWEEN®20（聚山梨醇酯 20）取代。