货号：003760

品名：sliceGolgi Kit （sliceGolgi试剂盒）

产品特点：

在自由浮动切片/切片上进行高尔基染色 

Bioenno  也在销售sliceGolgi  试剂盒，并增加  了  固色剂 套装。该  sliceGolgi 套件的设计上运行的片/段高尔基染色。浸渍和染色可以在自由浮动部分（50〜400微米厚度）上进行。额外的   固色剂套装使用Bioenno的醛来处理额外的样品。  

该试剂盒已经在来自大鼠和小鼠的许多类型的脑切片中进行了广泛的测试，它们是：

• 新鲜切片，例如使用组织切碎机快速制备的急性切片。

• 器官切片培养物，  例如培养的海马切片和培养的皮层切片。

• 已经完成电生理记录和/或药物施用的人造脑脊液（ACSF） – 切片。

• 用Bioenno醛  固定剂（产品目录号：003780）通过灌注或浸泡固定大脑的切片。固定的大脑可以在室温（RT，15至25摄氏度）下在50〜400微米处系统切片，并且切片可以单独进行高尔基染色，单独的免疫组织化学/免疫细胞化学（ICC）或组合的高尔基染色和ICC 。

• 额外的固色剂 套件允许处理更多的样品。Bioenno建议购买固定试剂盒的sliceGolgi试剂盒。

所述  sliceGolgi套件 可以被施加到视网膜，脊髓，和培养的细胞以染色神经元过程。

所述sliceGolgi套件产生树突和棘（参见图）的两个可靠和高质量的标记。神经元浸渍在50至200微米厚的切片中  超快，仅在某些情况下2-3天。一般来说，浸渍时间取决于部件的年龄和厚度，需要4-7天。该试剂盒可储存在15-25ºC的黑暗环境中长达12个月。

高尔基染色和免疫组化/免疫细胞化学（ICC）  

Bioenno Tech已经成功地将sliceGolgi试剂盒与ICC一起用于同一脑部分（见图4-9）。为了执行组合的高尔基染色和ICC，固定切片首先经历高尔基染色，然后进行ICC：

（1）组织处理：将  动物心脏灌注生理盐水，然后灌注由Bioenno Tech开发的  固定剂 （目录号：003780）。将大脑从颅骨上解剖并固定1-3天（4℃）。然后使用vibratome或类似类型的切片机/显微镜在RT下将脑部切成50〜100微米厚。切片以0.1M PB（pH 7.4）收集并可以在缓冲液中储存长达一周（4℃）。

固定切片可用于单独的高尔基染色，单独的ICC，以及组合的高尔基染色和ICC。

（2）  高尔基染色：  在RT（15-25℃）使用sliceGolgi试剂盒 对自由浮动切片进行高尔基染色  。神经元的浸润可能需要2-5天。

（3）  ICC：  自由浮动部分可以采用标准的抗生物素蛋白 – 生物素复合物（ABC）方法。通过在含有H 2 O 2的3,3'-二氨基联苯胺（DAB）中孵育切片可以使免疫反应产物可视化。

注：  该  sliceGolgi套件 不适用于冷冻组织工作。切割前固定的组织块不能冷冻。

产品功能

• 适用于切片/切片组织（厚度为50至400微米）
• 对自由浮动部分进行浸渍和染色
• 新型醛  固定剂 和增强浸渍液
• 神经元的浸润很快（2-7天）
• 结合高尔基体染色和免疫组织化学
• 经过验证的结果/用户友好
• 足够多达  1000个脑区 （50-400微米厚，尺寸约1×1.5厘米）
• 用于体外实验室使用
• 专门的
• 12个月保修

使用sliceGolgi试剂盒证明的结果 （产品目录号：003760）

• 经过验证的结果使用sliceGolgi套件 

树枝状分支和刺已经可靠地浸渍并用切片凝胶试剂盒染色。 

图1 – 额皮质层II中浸渍并染色的神经元

所述sliceGolgi试剂盒 用于浸渍和染色神经元中一日龄12（P12）C57BL小鼠的额皮质。200微米厚的切片中的神经元的树突棘（箭头）标记良好。箭头表示丝状伪足突起，未成熟的刺。图像是使用20x物镜拍摄的。

图2 – 新皮层第三层锥体神经元的树枝状分支

使用sliceGolgi试剂盒 浸渍和染色位于20×物镜的额顶皮质运动区域的锥体神经元的斜树突和主枝（茎）。C57BL小鼠12天龄。

图3 – 下丘脑外侧的神经元

所述sliceGolgi试剂盒 用于浸渍自由浮动的条件下在100微米厚的切片的神经元。从P12 C57BL小鼠的外侧下丘脑区域采集具有轴突终端的染色的神经元（20x物镜）。在树枝状分支上发现许多丝状伪足样突起（箭头）。

图4 – 联合使用sliceGolgi试剂盒和免疫组织化学/免疫细胞化学（ICC）

高尔基染色和ICC的组合允许同时观察树突棘和免疫反应产物。通常，自由浮动部分首先被处理用于高尔基染色，然后用于ICC。对于高尔基染色，通过升主动脉用0.9％盐水溶液灌注动物，然后用新制备的固定剂（目录号：003780，Bioenno Tech）灌注。将脑从颅骨上解剖并固定1-3天（4℃）。然后使用vibratome以50-100μm厚度切割脑，并将切片收集到0.1M PB（pH 7.4）中的组织培养孔中。该sliceGolgi套件（目录号：003760）浸渍（2-5天，RT）并染色树突（黑色）。为了执行ICC，将自由浮动切片进行标准的抗生物素蛋白 – 生物素复合物（ABC）方法。通过将切片在含有0.01％H 2 O 2的 0.04％3,3'-二氨基联苯胺（DAB）中温育8-10分钟来使免疫反应产物可视化。使用4x物镜从2个月大的C57小鼠的海马中取得图像。

图5 – 在同一脑切片上进行的高尔基染色和ICC

结合的高尔基染色和ICC：1）C57小鼠心脏灌注生理盐水，然后用Bioenno开发的醛固定剂 （目录号：003780）。2）使用sliceGolgi试剂盒对自由浮动切片（50微米）进行高尔基染色。浸渍时间仅在22±1℃时为2天。3）使用标准的抗生物素蛋白 – 生物素复合物方法处理小白蛋白（PV）的ICC。单克隆小鼠抗PV抗体（1：20,000，MAB1572，Chemicon）的温育时间在22±1℃过夜。使用4x物镜从丘脑摄取图像。

图6。- 树枝状分支和PV-免疫阳性神经元

高尔基染色和ICC在相同的脑部分进行。使用sliceGolgi试剂盒在自由浮动部分（100μm）上进行高尔基染色。浸渍时间为22±1℃3天。从4个月大的C57小鼠的下臂拍摄图像（63倍物镜）。

图7 – 高尔基染色的树突和免疫标记的神经元

所述sliceGolgi试剂盒用于浸渍和染色皮层神经元的树枝状分支在皮层的层III。免疫反应性神经元在相同区域中显现。从4个月大的C57小鼠拍摄图像（63倍物镜）。

图8 – 高尔基染色的皮层神经元和免疫标记的神经元

所述sliceGolgi试剂盒用于浸渍和染色神经元的树枝状分支在皮质的更深的层。仅在22±1℃时，100μm厚切片中神经元的浸润需要2天。免疫反应性神经元在相同区域中显现。该图像是使用20x物镜从2个月大的C57小鼠拍摄的。

图9 – 在相同的脑切片上进行高尔基染色和ICC

该sliceGolgi套件来标记树突分支。以20x物镜显示的顶部面板中的盒装区域被放大（63x）以突出树突棘（箭头）和免疫标记的神经元（箭头）。这些图像取自2月龄C57BL小鼠的额顶皮层（体感区域）。

产品信息：

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