T细胞尼龙毛柱分离法

上海金畔生物科技有限公司提供T细胞尼龙毛柱
简单介绍
在研究体内及体外的免疫系统时,分离淋巴细胞群是一个关键步骤。因为现在市场上并没有针对B细胞的特异性抗血清,所以分离淋巴细胞中的T细胞并不是十分方便。T细胞尼龙毛分离法利用
了尼龙毛对B细胞的亲和力,从而使T细胞在没有严重损伤的情况下达到的足够的纯度。
 
T细胞尼龙毛柱分离法的详细介绍
T细胞尼龙毛柱分离法
在研究体内及体外的免疫系统时,分离淋巴细胞群是一个关键步骤。因为现在市场上并没有针对B细胞的特异性抗血清,所以分离淋巴细胞中的T细胞并不是十分方便。T细胞尼龙毛分离法利用
了尼龙毛对B细胞的亲和力,从而使T细胞在没有严重损伤的情况下达到的足够的纯度。因为这个方法不像流式和磁珠费用昂贵,而且操作简便,所需要的条件也不高,是一种非常实用的方法

(在此我向各位解释一下,现在分离T细胞的方法主要是三种,流式,磁珠法,尼龙毛法。与前两种方法相比,尼龙毛法的优势在于无需特定的设备仪器,一般的实验室均有条件操作;价格相
对低廉;可以进行大量样本操作。)
首先要指出的是实验中所使用的是分离T细胞专用的尼龙毛(Nylon Fiber),不是化工上的尼龙纤维,曾经有人问过我这种问题,如果你买错了,可是做不出来的!其次,现在市面上的尼龙毛
也是良隽不齐,也有同仁反应买到的尼龙毛加入缓冲液以后成了一团糨糊,根本没法使用,这个问题就要靠各位的慧眼了。
现在市面上有尼龙毛填料,也已经有了商品化的尼龙毛柱子,这两者的区别主要是以下两点:
1.       商品化的柱子的填料量是已经定好的,有一个确定的上样量范围。而自己买填料装柱可以控制填料量,也就是可以控制上样量,这对于样本量非常少,或是样本量非常大的实验需求
非常合适。
2.       商品化的柱子已经经过了无菌处理(一般是辐射灭菌),而自己装柱当然就要自己灭菌了。
3.       商品化的柱子在实验的重复性上有着绝对的优势。自己装的柱子在填料的处理和装柱的松紧等方面不容易控制,差异性的控制就看你的实验技巧了。
操作方法:
1.秤取1.5g尼龙毛装入20-30ml玻璃或一次性注射器内(要可以灭菌的),填料的体积控制在15毫升左右(注射器上有标记,所以还是比较好控制的),因为尼龙毛的松紧关系到T细胞的回收率,
所以要特别注意。注射器下端配接5厘米左右长的带有弹簧夹的橡皮管。
2. 加入大量的PBS平衡柱子后,用铝箔包裹,并置于适当的容器内,高压灭菌15分钟。
(商品化尼龙毛柱以上步骤可以省略,经过无菌PBS平衡后直接进行下列步骤。)
3. 灭菌的尼龙毛柱垂直固定后放于超净台内,顶部以铝箔覆盖,避免污染。
4. 橡皮管,弹簧夹用无水酒精消毒后接注射器下端,打开弹簧夹调节流速在大约3-4ml/min。
5.首先,加入3-4倍柱体的无血培养基平衡;随后,之后加入相同体积的含有血清的培养基平衡(上述培养基都要预热),最后等培养基页面接近柱填料页面时,关闭弹簧夹。
6. 样本细胞悬浮液浓度控制在5×108cells/ml的,上样量一般是1/3-1/5柱体积(商品化的柱子一般都有推荐上样量)。样品加入之后,再加入少量培养液,然后关闭弹簧夹。
7. 柱上覆盖铝箔,移置于消毒过的容器中,37℃孵育1小时。此过程中柱子必须要保持垂直状态。
8. 从培养箱中拿出柱子,置于超净台内,除去铝箔。接上按照4.中的方法消毒的弹簧夹和橡皮管,加入适当体积经37℃预热的培养基,打开弹簧夹控制流速在3-4 mL/min,流出约5ml之后,
流出的培养液基变得不透明,此时其中含有T细胞,收集这一部分培养基。
9. 基本上何时结束收集取决于流出液体中细胞的浓度,实际上,收集的量达到一个柱体积时就可以停止收集,因为即使收集更多的量,回收率几乎不会增加。
10 。参考数据:
样本:小鼠脾脏(T细胞含量在30-40%,B细胞含量在55-60%)
细胞回收率:13-25%
B细胞污染率:小于15%
 
样本:大鼠脾脏(T细胞含量在30-35%,B细胞含量在55-65%)
细胞回收率:大于25%
B细胞污染率:小于15%
 
样本:人或兔外周血
细胞回收率 : 20-30% (人);25-35% (兔)
B细胞污染率:小于5% (人、兔)
 
(注)收集粘附于尼龙毛上的细胞时,将T细胞收集完毕后的尼龙毛在无菌操作的状态下取出,转移到适当的容器中,用镊子小心的将尼龙毛松开,粘附的细胞可以洗到培养基中。或者将注射
器芯插入注射器内,通过压力使的粘附的细胞随着液体流出。
 
产品信息
品牌     品名                   规格
Wako  T细胞尼龙毛柱          0.5g*10  (推荐用于小鼠脾脏)
Wako  T细胞尼龙毛柱L型      1g*10   (推荐用于大鼠脾脏、人或兔子的外周血)
Wako  T细胞尼龙毛            2g*5   (可按照自己的需要装柱,控制上样量)
Wako  小鼠淋巴细胞分离试剂  30mL*5  用于从小鼠脾脏,淋巴结,淋巴结悬浮液中分离淋巴细胞
Wako  人淋巴细胞分离试剂  100ml*6  用于从人血中提取淋巴细胞
Wako  铁粉(羰基铁)Iron Powder, from Iron Carbonyl  25g   直径25um,用于清除巨噬细胞
Wako  κ-卡拉胶κ-Carrageenan  25g
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Echelon Lysophosphatidic Acid Competitive ELISA Kit

上海金畔生物科技有限公司提供Echelon试剂盒 抗体
Echelon试剂盒 抗体
1997年成立于美国犹他州的Echelon公司前身为美国国家细胞信号研究中心。其提供各种抗体、分析检测试剂盒和抑制剂等产品,主要擅长细胞信号、脂类代谢和标记物研究的相关产品,可为
癌症、糖尿病、炎症、感染和心脑血管疾病等各领域的研究提供全面有效的工具。
中华试剂网负责Echelon在中国市场的产品销售、技术应用与支持等各项业务。一如既往地为中国化学行业广大科研和生产用户提供卓越的产品与服务。
核心竞争力:
专注脂质代谢研究,产品齐全
可提供科研试剂和各类检测服务
特色产品:
PI3-Kinase PI3-激酶
Lysolipids 血溶性脂类
Sphingolipids 鞘脂类
Autotaxin(ATX) 自分泌运动因子
如果您需要更多产品资料请访问:www.echelon-inc.com
Echelon产品线
Lipid Kinases & Phosphatases
脂质激酶和***酸
 
Lipid-Protein Interaction Tools
脂蛋白质相互作用工具
 
Lipid-Specific Assay Kits
脂质特定检测试剂盒
 
Lipid-Specific Antibodies & Binding Proteins
脂质特定抗体和结合蛋白
 
Hyaluronic Acid & Collagen IV Assay Kits
透明质酸和IV型胶原检测试剂盒
 
Synthetic Inositol phosphates, Lipids, & Phospholipids
合成的***酸肌醇,脂和***脂
 
PI3-Kinase PI3-激酶
Echelon 可提供PI3-Kinase 实验解决全套方案,从分析服务到实验用抗体、酶和抑制剂等,全面满足科研需求。
专业系列
产品编号
特色产品
 
检测试剂盒
K-1000
PI3-K ELISA Kit
 
K-1000S
PI3-K ELISA: Pico Assay
 
K-1100
PI3-K Fluorescence Polarization Kit
 
K-1300
PI3-K AlphaScreen®
 
K-2700S
TRueFRET PI3-K Activity Assay
 
K-3000
Class III PI3-K ELISA Kit
 
抗体
Z-R015
Anti-huVps34 (Class III PI3-Kinase) Antibody for IP
 
Z-R016
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抑制剂
B-0021
Resveratrol (Class IA PI3-K Inhibitor)
 
B-0222
Wortmannin (PI3-Kinase Inhibitor)
 
B-0294
PI3-Kinase Inhibitor (LY294002)
 
B-0301
PI3-Kinase Gamma Inhibitor 1 (AS605240)
 
B-0302
PI3-Kinase Gamma Inhibitor 2 (AS604850
 
B-0303
PI3-Kinase Alpha Inhibitor 1 (PI-103)
 
B-0304
PI3-Kinase Alpha Inhibitor 2
 

P27-18H
PI3-K (p-110 alpha/p85 alpha) Active Enzyme
 
P28-10H
PI3-K (p-110 beta/p85 alpha) Active Enzyme
Lysolipids 血溶性脂类
Lysolipid Pathway                                            Synthetic Lysophosphatidic Acid (LPA)
Inhibitors 抑制剂系列                                      Labeled 标记物系列
Ligands 配体系列                                           Ligands 配体系列
Analogs 类似物系列                                         Saturated 底物系列
Unsaturated 不饱和系列
专业系列
产品标号
特色产品
 
Kits试剂盒
K-2800B
Lysophosphatidic Acid Competitive ELISA Kit
 
K-4100
Autotaxin Activity Assay
 
K-4200
Autotaxin Inhibitor Screening Kit
 
Enzymes酶
E-4000
Autotaxin Enzyme
 
Substrate底物
L-2000
FS-3 LysoPLD/Autotaxin Substrate
 
Inhibitors抑制剂
L-7416
LysoPLD/Autotaxin Inhibitor
 
Sphingolipids 鞘脂类
Synthetic Sphingolipids
Sphingosine 鞘氨醇          Ceramide 神经酰胺
Sphingosine 1 Phosphate (S1P ) 鞘氨醇***      Sphingomyelin 鞘***脂
FTY720P
专业系列
产品编号
特色产品
 
Kits试剂盒
K-1900
Sphingosine 1 Phosphate ELISA Kit (S1P)
 
K-3500
Sphingosine Kinase 1 Activity Assay
 
K-1800
Sphingomyelinase Assay Kit
 
K-3200
Acid Sphingomyelinase Assay Kit
 
Enzymes酶
E-K068
Sphingosine Kinase 1, active
 
E-K069
Sphingosine Kinase 2, active
 
Inhibitors抑制剂
B-0024
Sphingosine Kinase Inhibitor
Autotaxin(ATX) 自分泌运动因子
Echelon是世界上唯一完整全面提供Autotaxin(ATX) 和Autotaxin(ATX) 相关试剂的供应商。
产品编号
特色产品
 
S-400B
Sphingomyelin Biotin
 
P-B0SM
Sphingomyelin Beads
 
S-6100
Sphingosine Beads
 
S-6110
Sphingosine 1 Phosphate Beads
 
P-B00Ss
Sphingo Bead Sample Pack
 
G-SM01
Sphingomyelin Grip (Equinatoxin)
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Echelon PI3-Kinase PI3-激酶

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牛血清白蛋白,无蛋白酶

上海金畔生物科技有限公司提供牛血清白蛋白,无蛋白酶
货号:DCL0001B
包装:100g
英文名:Albumin,Bovine,Faction V .Protease free别名:BSA, Protease free CAS:9048-46-8级别:>98.0%外观:类白色冻干粉
不含蛋白酶成分.Protease free
溶于水。难于盐析。水溶液加热至60-70℃时,蛋白即凝固沉淀。生化研究。遗传工程和药物研究。蛋白质标准制备。肽酶及其他蛋白质的稳定剂。
BSA一般做为稳定剂被用于限制酶或者修饰酶的保存溶液和反应液中,因为有些酶在低浓度下不稳定或活性低。加入BSA后,它可能起到“保护”或“载体”作用,不少酶类添加BSA后能使其活
性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不会受到什么影响。对多数底物DNA而言,BSA可以使酶切更完全,并可实现重复切割。在37℃,酶切反应超过1h时,BSA可以使酶更加稳定,因为
在不含BSA的反应缓冲液中,许多限制性内切酶在37℃下只能存活10″20min甚至更短的时间。而BSA可以结合缓冲液或底物DNA中抑制限制性内切酶活性的金属离子和其它化学物质。
 
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标记用辣根过氧化物酶

 
上海金畔生物科技有限公司提供辣根过氧化物酶 标记用
货号:ECE0066B
包装:100mg
英文名:Peroxidase horseradish; HRP别名:HRP级别:250u/mg
辣根过氧化物酶(HRP)是一种糖蛋白,每个分子含有一个氯化血红素(protonhemin)区作辅基。酶的浓度和纯度常以辅基的含量表示。
辣根过氧化物酶,RZ>3.0, 250u/mg,ECE0066B
英文名称:Peroxidase horseradish; HRP
CAS号:9003-99-0
EINECS号:232-668-6
Enzyme Commission Number:1.11.1.7
MDL number:MFCD00071339
级别:RZ>3.0,250u/mg
Donor:hydrogen-peroxide oxidoreductase Horseradish peroxidase
辣根过氧化物酶,英文名HRP; Peroxidase horseradish。辣根过氧化物酶是一种糖蛋白,每个分子含有一个氯化血红素(protonhemin)区作辅基。酶的浓度和纯度常以辅基的含量表示。
SKU 级别 包装 货期 价格(rmb) 其它情况
ECE0066B RZ>3.0,250u/mg 100mg 1周 询价 冰袋包装运输
更大包装请询价:15221999938
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保质期: 2 Years
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用途
过氧化物酶,通常来源于辣根(因此称辣根过氧化物酶),是临床检验试剂中的常用酶。该产品不但广泛用于多个生化检测项目,也广泛运用于免疫类(ELISA)试剂盒。过氧化物酶作为多个
试剂盒显色体系的关键成分,对试剂盒的质量有重要影响。辣根过氧化物酶,是酶标记法所用的一种主要酶,医药上用于测定生物体液中葡萄糖和半乳糖的含量,用作诊断酶。
辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)比活性高,稳定,分子量小,纯酶容易制备,所以最常用。HRP是由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成的糖蛋白,糖含量18%。HRP由多个
同功酶组成,分子量为40,000,等电点为PH3~9,酶催化的最适PH因供氢体不同而稍有差异,但多在PH5左右。酶溶于水和58%以下饱和度硫酸铵溶液。氯化血红素辅基的最大吸收峰是403nm,
HRP酶蛋白的最大吸收峰是275nm,一般以OD403nm /OD275nm的比值RZ表示酶的纯度,计算式是:
HRP纯度(RZ)=A403nm/A275nm
纯度RZ(Reinheit Zahl)值越大说明酶内所含杂质越少。高纯度的酶RZ值应在3.0左右(最高可达3.4)。用于ELISA检测的HRP的RZ值要求在3.0以上。
1) RZ>3 活性 >250u/mg, 主要应用于免疫学,是高纯度的过氧化酶。采用特殊色谱纯化技术以除去会影响免疫学反应的同工酶B .
2) RZ>2 活性 >180u/mg ,主要应用于临床化学,我们的客户也有将这个规格的产品应用于免疫学研究的。此时,一个标准化的分析方法就变得尤为重要。
3) RZ>1 活性 >100u/mg,主要应用于血糖试纸和尿液分析试纸。
4) RZ>0.6 活性 >60u/mg ,主要应用于尿液分析试纸。
安全信息
个人防护装备 Eyeshields, Gloves, type N95 (US), type P1 (EN143) respirator filter
WGK德国 3
F 10-21
有关该产品的运输、使用、弃置等的进一步信息,请致电15221999938索取该产品的MSDS。
贮存与运输
2-8°C。避光,防潮。
 
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Roche品牌代理商

Roche品牌代理商–上海金畔
1. Roche品牌介绍
罗氏应用科学部(Roche Applied Science)做为罗氏诊断公司的业务部门之一,专业服务于全球科学研究领域用户。罗氏产品当中拥有深受科研者欢迎的X-tremeGENE转染试剂、DIG地高辛核酸
标记及杂交系统、TUNEL凋亡检测试剂、蛋白酶抑制剂药片等。除实验室常用的生化及分子生物学产品外,罗氏应用科学部为客户提供一系列基因组学和蛋白质组学分子生物学研究系统解决方
案,不断满足当今生命科学的研究应用需要。主要产品:分子、细胞、蛋白、凋亡、转染和地高辛产品。
2. Roche重点产品
主要产品:分子、细胞、蛋白、凋亡、转染和地高辛产品。
3. Roche官网
http://https://www.roche-applied-science.com/shop/home
4. 金畔生物代理Roche品牌联系方式
上海金畔生物科技有限公司
地 址: 上海市浦东新区东靖路699弄36栋701室
邮 编: 201208
qq: 2743691513
固话总机:021-50837765
订货热线:15221999938
网 址: www.jinpanbio.com
Email:sales@jinpanbio.com

Bio-rad品牌代理商

Bio-rad品牌代理商–上海金畔

1. Bio-rad品牌介绍
美国伯乐BIO-RAD公司公司总部设在美国加里福尼亚州的Hercules,在全球有30多家全资子公司,服务于全球超过85,000家科研院所,生物技术和制药公司,和临床实验室。
BIO-RAD公司自1952年成立以来,在50多年中为临床诊断和生命科学研究市场提供了广泛的新型产品和服务,始终居于科学发现的中心地位。 BIO-RAD公司 现今利用多种技术制造并
生产了几千种产品,这些技术包括蛋白质组学、生物信息学、电泳、成像、免疫测定、层析、微生物学和基因转移。根据产品的不同,BIO-RAD公司公司下设三大部门,它们是生命科学部,临
床诊断部和工业材料部,产品种类达6000余种。BIO-RAD公司主要产品有蛋白组研究产品、层析仪与填料、蛋白质和核酸电泳产品、基因枪与电穿孔仪、定量基因扩增仪、图像分析系统、激光
共聚焦扫描显微镜、酶标仪和洗板机系列、食品检测仪器与试剂、糖化血红蛋白检测系列产品、质控系统、毒物检测产品、血液病毒检测产品等。
2. Bio-rad重点产品
生命科学试剂
临床诊断试剂
3. Bio-rad官网
www.bio-rad.com
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APSC品牌代理商

APSC品牌代理商–上海金畔
1. APSC品牌介绍
APSC主要提供有机凝胶色谱标准品(Organic GPC/SEC Standards)和水性凝胶色谱标准品(Aqueous GPC/SEC Standards)两类产品。
GPC(Gel Permeation Chromatography),凝胶渗透色谱,又称为尺寸排阻色谱(Size Exclusion Chromatography,简称SEC),它是基于体积排阻的分离机理,通过具有分子筛性质的固定相,用来分离相对分子质量较小的物质,并且还可以分析分子体积不同、具有相同化学性质的高分子化合物。
GPC是一种特殊的液相色谱,所用仪器与高效液相色谱仪类似,GPC的分离是利用体积排除机理,装填的是多孔性凝胶或微粒,孔径大小与待分离的聚合物分子相似,体积大的高分子化合物不能进入凝胶孔,最先从凝胶粒间流出,淋出体积(时间)最小,高聚物依分子量从大到小依次淋出。这样,通过做已知分子量的高分子聚合物的标准曲线,就能分析同系未知待测高分子化合物了。
2. APSC重点产品
机凝胶色谱标准品(Organic GPC/SEC Standards)和水性凝胶色谱标准品(Aqueous GPC/SEC Standards)两类产品。
3. APSC官网
http://www.ampolymer.com/
4. 金畔生物代理APSC品牌联系方式
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Abnova品牌代理商

Abnova品牌代理商–上海金畔
1. Abnova品牌介绍
Abnova是世界上最大的单克隆抗体生产商之一,现有抗体产品种类近10000种,其中2/3是单克隆抗体。和传统的单克隆抗体生产方法相比,Abnova采用更先进的技术和设备,可以极大地提高单克隆抗体的生产效率并降低其生产的成本。Abnova具有每个月开发500个小鼠单克隆抗体的能力,他们的目标是:人类基因组中的每一个表达基因都至少有一种抗体。
2. Abnova重点产品
单克隆抗体
3. Abnova官网
http://hamptonresearch.com/
4. 金畔生物代理Abnova品牌联系方式
上海金畔生物科技有限公司
地 址: 上海市浦东新区东靖路699弄36栋701室
邮 编: 201208
qq:  2743691513
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