D-核糖SigmaR7500

发表于2024-03-09由上海金畔生物科技有限公司

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本公司各种实验室生化试剂大量备现货，欢迎广大新老客户订购

详情介绍

D（+）Glucose D-葡萄糖 1kg Amresco0188
D-葡萄糖-1-磷酸二钠 1g Fluka49230
D-葡萄糖-6-磷酸二钠 500mg SigmaG7250
D-葡萄糖-6-磷酸二钠 1g SigmaG7250
D-葡萄糖-6-磷酸钡盐 100mg SigmaP7627
D-葡萄糖-6-磷酸钡盐 500mg SigmaP7627
Heparin Sodium * 1g 上海
Heparin Sodium * 10g 上海
lnositol 肌醇 100g 国产
lnositol 肌醇 1kg 国产
IPTG   异丙基-B-D-硫代半乳糖苷 1g Merck
IPTG   异丙基-B-D-硫代半乳糖苷 10g Merck
IPTG   异丙基-B-D-硫代半乳糖苷 100g Merck
Lactulose * 1g SigmaL7811
Laminarin 昆布多糖 100mg USA
Laminarin 昆布多糖 1g USA
Lipopolysaccharide 脂多糖 10mg SigmaL-2880
Lipopolysaccharide 脂多糖 10mgX10 SigmaL-2880
L（+）Lactic acid   L-乳酸 5g Amresco0462
a-乳糖 1kg Sigma
Maltose 麦芽糖 500g Amresco
Maltose 麦芽糖 1kg Amresco
D-Trehalose 海澡糖 5g SigmaT5251
D-Trehalose 海澡糖 10g Amresco
D-Mannitol D-* 100g Amresco
D-Mannitol D-* 500g 国产
Glycogen Type II   糖原II 1g SigmaG8751
Glycogen Type III   糖原III 500mg SigmaG8876
Glycogen Type IX   糖原IX 500mg SigmaG0885
Pectin 果胶 25g SigmaP9135
Pectin 果胶 100g SigmaP9135
凝胶多糖 10g Japan
Zymosan A   酵母多糖 A 1g 美国BBL
D-（+）-Raffinose D-绵子糖 5g SigmaR-0250
D-（+）-Raffinose D-绵子糖 10g Amresco
D-xylose D-木糖 500g Amresco
Xylitol * 500g Amresco
D（-）-Ribose D-核糖 5g SigmaR7500
D（-）-Ribose D-核糖 25g SigmaR7500
D-Sorbitol D-* 100g Amresco 0691
D-Sorbitol D-* 500g Amresco 0691
Starch Soluble   可溶性淀粉 100g SigmaS-9765
Starch Potato   马铃薯淀粉 100g SigmaS4251
Sucrose Ultre Pure 蔗糖 1kg Invitrogen15503-022
Xylan　木聚糖 5g Sigma

细胞葡萄糖摄取检测试剂盒 Glucose Cellular Uptake Measurement Kit

发表于2024-03-09由上海金畔生物科技有限公司

细胞葡萄糖摄取检测试剂盒
Glucose Cellular Uptake Measurement Kit

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

细胞内葡萄糖吸收检测试剂盒

细胞葡萄糖摄取检测试剂盒 Glucose Cellular Uptake Measurement Kit

◆原理

胰岛素是降血糖的激素，它能够以脂肪细胞或者骨骼肌等为中心促进糖输送活性，将糖从细胞外吸收到细胞内。

测定糖的吸收量一般是使用³H标记的3-O-甲基-D-葡萄糖和2-脱氧葡萄糖（2DG）的方法。这种方法需要用同位素，所以只能在RI管理区域内使用，在一般的实验室也无法使用。

本试剂盒使用安全，操作简单，用non-RI法能够简便地测定细胞内糖吸收量。

细胞葡萄糖摄取检测试剂盒 Glucose Cellular Uptake Measurement Kit

试剂盒测定

细胞吸收的2DG会在己糖激酶的催化下会被2-脱氧葡萄糖-6磷酸（DG6P）氧化，不继续进行酶反应而是留在细胞内。

本试剂盒是在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PDH）的酶反应下，生成2DG6P成比例地生成NADPH，然后NADPH发生氧化生成荧光基质后就可以测定荧光物质的荧光强度。

◆优点・特色

●　检测2-deoxyglucose (2DG) (葡萄糖类似物) 摄入的总量

●　葡萄糖，2DG被细胞摄取后，在己糖激酶作用下，迅速磷酸化为2-脱氧葡萄糖-6-磷酸（2DG6P）。

●　而2DG6P在细胞内聚集，不会发生进行代谢。

●　细胞裂解物中的2DG6P在耦合酶作用下，产生荧光信号，其强度与2DG6P的量正相关。

●　利用已知2DG6P的标准曲线，对照检测的荧光强度计算样品2DG水平

相关产品比较

	【本试剂盒】 Measurement Kit, Broad Range, Fluorometric Cat. No. MBR-PMG-K01E	【相关产品】 2-Deoxyglucose (2DG) Uptake Measurement Kit Cat. No. CSR-OKP-PMG-K01E
测定方法	Non-RI法	Non-RI法
操作时间	3小时	5~7小时（2天）
检测方法	荧光（Ex 540 nm/Em 590 nm）	发光（420 nm）
特征	测定范围广（0~50 μm）能够迅速进行测定可以使用高通量法一步测定	高灵敏度（0~5 μm）定量检测试剂盒

◆案例・应用

试剂盒组成

试剂	规格	数量	储存（开封后）
2DG6P Solution (1 mM)	500 μL	3×3 mL	-20°C (避光)
Sample Diluent Buffer Concentrate (100x)	5 mL	1 vial
Substrate Buffer	9 mL	1 vial
Fluorescent Substrate	120 μL	1 vial
Enzyme Solution	270 μL	1 vial

该试剂盒可进行100次反应

需要准备：

●　超纯水（蒸馏水）

●　2-deoxyglucose 建议产品

●　牛血清白蛋白建议产品

●　96-well黑色多孔板

●　96-well荧光酶标仪（激发波长540 nm/荧光波长590 nm）

●　超声波细胞裂解装置

胰岛素刺激3T3-L1细胞分化后2DG的摄取情况

※具体操作见“相关资料”

胰岛素刺激3T3-L1细胞分化及样品制备

对于您实验的细胞，需要根据细胞本身的情况优化培养基和各项条件，如实际浓度、培养时间及其他实验相关参数。
以下是标准12孔培养板的3T3-L1细胞操作步骤。

试剂和培养基
･Serum-free culture medium
･Krebs Ringer Phosphate HEPES (KRPH) buffer at 37°C
(1.2 mM KH₂PO₄, 1.2 mM MgSO₄, 1.3 mM CaCl2, 118 mM NaCl, 5 mM KCl, 30 mM Hepes, pH7.5)
･BSA (essentially fatty acid free and globulin free grade, use Sigma Ca. No. A0281 or equivalent)

･2-Deoxy-D-glucose (2DG) solution
･ Insulin solution
･ PBS(-)
･Phloretin or Cytochalasin B (or other glucose uptake inhibitor)

细胞样品制备

1) Differentiate 3T3-L1 cells to adipocytes in a 12-well culture plate.

2) Replace culture media with serum-free medium. Return to incubator for 6 hours.

3) Gently wash cells 3 times with 1.5 mL of warm KRPH buffer without BSA?.

4) Gently add 3 mL of warm KRPH buffer containing 2% BSA.

加入胰岛素

5) For this example, insulin is added to a final concentration of 1 μm .

6) Incubate cells for 18 min at 37°C.

加入2DG

7) For this example, 2DG is added to a final concentration of 1 mM.

8) Incubate cells at 37°C for 20 minutes.

9) Wash cells gently 3× with cooled PBS containing 200 μM Phloretin to inhibit further 2DG uptake.

细胞裂解及样品制备

10) Add 1.5 mL of 1× Sample Diluent Buffer.and lyse cells by sonication with a microtip sonicator.

11) Collect cell lysate to tube, and apply heat treatment at 80°C for 15 minutes.
　　　　Note: Do not add protease inhibitors to cell lysates.
　　　　Note: If an alternate method for cell lysis will be used, do not use NaOH as NaOH degrades 2DG6P.

12) Centrifuge lysates at 15000 x g for 20minutes at 4°C

13) Transfer cell lysate supernatants to a fresh tube. These cell lysate supernatants are your experimental samples.
　　　　Note: Supernatants can be stored at -20°C for later analysis.

检测细胞裂解液中的2 DG
　　14) Follow the procedure of [Section III-1] “2DG Measurement Protocol” above.

【参考文献】

[1]	Yamamoto N, et al ,(2006). A nonradioisotope, enzymatic assay for 2-deoxyglucose uptake in L6 skeletal muscle cells cultured in a 96-well microplate. Anal. Biochem. 351: 139-145.

产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
CSR-MBR-PMG-K01E	Glucose Cellular Uptake Measurement Kit (Broad Range, Fluorometric) 细胞葡萄糖摄取检测试剂盒	100 tests	–	–

2-NBDG & 2-NBDLG 2-NBDG & 2-NBDLG

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2-NBDG & 2-NBDLG
2-NBDG & 2-NBDLG

产品特性
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参考文献

2-NBDG & 2-NBDLG（2-NBDG对照底物）

◆原理

取自活细胞的葡萄糖，实时可视

与高纯度荧光标记葡萄糖的镜像异形体一起开始销售！！

葡萄糖是微生物乃至人等大多数生物支撑生命活动的重要营养素。葡萄糖进入细胞内的活性成为检测细胞活动度的基本且重要指标。可视至今为止，葡萄糖进入细胞内活性检测采用反射性标记物，在活细胞状态进行实时检测比较困难。

2-NBDG¹作为可视的葡萄糖导入细胞试剂，是D-葡萄糖荧光衍生物。松冈等人以迅速检测食物中毒菌（细胞存活指标）为目的，开发了2-NBDG。此后，经山田、松冈、稻垣等人的共同研究，类似哺乳细胞的葡萄糖运载蛋白通过动力学运输葡萄糖，2-NBDG能有效向产生胰岛素的胰脏细胞中导入葡萄糖²。并且，不断有实验结果显示：2-NBDG能用于全身各种组织和器官^3,4,5，特别是将葡萄糖作为供给脑的唯一能源，对代谢相关提出新建议等，极其引人注目^6,7,8。

此次，本公司推出高纯度2-NBDG产品。有报告指出，2-NBDLG作为2-NBDG的镜像异形体，对2-NBDG膜的吸附程度和非特异性膜通过的评价等有用，而且是2-NBDG十分有效的对照比合物。2-NBDLG与2-NBDG同样，推出了高纯度的产品⁹。这些产品对葡萄糖研究来说具有非常重要的意义，有望作为标准品被广泛使用。另外，关于检测对照，请参考文献⁵。

1. Biochim. Biophys. Acta, 1289,5(1996)

2. J.Biol.chem.,275,22278(2000)

3. Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.,101,12899(2004)

4. Cell,123,1307(2005)

5. Nat. Protoc.,2,753(2007)

6. Proc.Natl.Acad.U.S.A.,101,14937(2004)

7. J.Neurosci.Res.,83,996(2006)

8. Glia,55,1222(2007)

9. Tetrahedron Lett.,49,6876(2008)

◆优点・特色

●　2-NBDG

全称：2-[N-(7-Nitrobenz-2-oxa-1,3-diazol-4-yl)amino]-2-deoxy-D-glucose

分子式：(M.W. 342.26) C₁₂H₁₄N₄O₈

说明：监测活细胞内葡萄糖摄取

结构：

2-NBDG & 2-NBDLG 2-NBDG & 2-NBDLG

●　2-NBDLG

全称：2-[N-(7-Nitrobenz-2-oxa-1,3-diazol-4-yl)amino]-2-deoxy-L-glucose

分子式：(M.W. 342.26) C₁₂H₁₄N₄O₈

说明：2-NBDG的对照底物

结构：

2-NBDG & 2-NBDLG 2-NBDG & 2-NBDLG

【数据分析】

2-NBDLG.pdf

2-NBDG.pdf

【参考文献】

[1] T. Yamamoto, Y. Nishiuchi, T. Teshima, H. Matsuoka, and K. Yamada, Tetrahedron Lett., 49, 6876 (2008). (Chem. Synthesis)

[2] K. Yamada, M. Saito, H. Matsuoka, and N. Inagaki, Nature Protocols, 2, 753 (2007). (Protocols for Measurement)

[3] K. Yoshioka, H. Takahashi, T. Homma, M. Saito, K.-B. Oh, Y. Nemoto, and H. Matsuoka, Biochim. Biophys. Acta, 1289, 5 (1996).(Original)

[4] K. Yamada, M. Nakata, N. Horimoto, M. Saito, H. Matsuoka, and N. Inagaki, J. Biol. Chem., 275, 22278 (2000). (Measurement of Glucose

Uptake in Living Mammalian Cells)

[5] K. Yamada, M. Saito, H. Matsuoka, and N. Inagaki, Nature Protocols, 2, 753 (2007). (Chem. Synthesis & Protocols for Measurement)

[6] J.V. Rocheleau, G.M. Walker, W.S. Head, O.P. McGuinness, and D.W. Piston, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 101, 12899 (2004).(Monitoring

of Glucose Uptake in Islet)

产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
331-00641	2-NBDLG	0.5 mg/瓶	2-NBDLG	–
334-00631	2-NBDG	0.5 mg/瓶	2-NBDG	–

LabAssay™ Glucose LabAssay™ 葡萄糖检测试剂盒（Mutarotase-GOD 法）

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LabAssay™ Glucose
LabAssay™ 葡萄糖检测试剂盒（Mutarotase-GOD 法）

产品特性
相关资料
Q&A
参考文献

LabAssay™ Glucose (Mutarotase-GOD method)

LabAssay™ 葡萄糖检测试剂盒（Mutarotase-GOD法）

葡萄糖是生物体内重要的能量来源物质。在溶液中，葡萄糖α型和β型两种异构体以维持一定比例的平衡状态存在（也有链状葡萄糖，但数量极少）。本产品为酶法测定试剂，结合了将α-D-葡萄糖转化为β-型的变旋酶和只作用于β-D-葡萄糖的葡萄糖氧化酶。

◆检测原理

显色试剂作用于样品后，样品中的α-D-葡萄糖在变旋酶的作用下迅速转化为β-D-葡萄糖。β-D-葡萄糖受到葡萄糖氧化酶（GOD）的作用而被氧化，同时生成过氧化氢。生成的过氧化氢在过氧化物酶（POD）的作用下，与显色剂中的苯酚和4-氨基安替比林定量氧化缩合，生成红色素。通过测定这种红色色素，即可计算样品中的葡萄糖浓度。

◆试剂盒性能

●　标准曲线范围：50～500 mg/dL（mg/100 mL）
●　检测时间：约10 min
●　样品：血清、血浆（小鼠、大鼠、人）
●　样品量：2 μL

●　测定波长：主波长505 nm、副波长600nm

◆标准曲线示例

LabAssay™ Glucose LabAssay™ 葡萄糖检测试剂盒（Mutarotase-GOD 法）

◆检测操作法

微孔板法

按照下表条件在孔板中反应。

	Tests	标准	空白对照
显色试剂	300 μL	300 μL	300 μL
待测物	样品 2 μL	标准溶液 2 μL	－^※1
充分混合，37℃加热 5 min。以空白为对照，测定样品和标准溶液在 505 nm^※2处的吸光度。

※1：是否添加 2 μL 的水都不会对吸光度造成实际上的差异，因此省略水的添加。

※2：双波长检测时，主波长505 nm／副波长600 nm。

◆数据

加标回收测试

葡萄糖的加标回收测试，将已知含量的标准品加标到人、小鼠、大鼠样品中，n=2。

人样品

人样品	添加量（mg/dL）	实测值（mg/dL）	回收量（mg/dL）	回收率（%）
血清样品	–	104	–	–
	109	205	101	92.7
	163	246	143	87.7
	218	308	204	93.6
	272	363	259	95.2
血浆样品（EDTA）	–	100	–	–
	114	201	101	88.6
	171	249	149	87.1
	228	306	206	90.4
	285	357	257	90.2
血浆样品（肝素）	–	103	–	–
	112	219	116	104
	168	262	159	94.6
	224	308	205	91.5
	280	369	266	95

小鼠样品

小鼠样品	添加量（mg/dL）	实测值（mg/dL）	回收量（mg/dL）	回收率（%）
血清样品	–	98.1	–	–
	89.2	177	78.9	88.5
	134	201	103	76.9
	178	251	153	86
	223	280	182	81.6
血浆样品（EDTA）	–	93	–	–
	90.8	174	81	89.2
	136	203	110	80.9
	182	248	155	85.2
	227	276	183	80.6
血浆样品（肝素）	–	111	–	–
	91.2	187	76	83.3
	137	227	116	84.7
	182	263	152	83.5
	228	294	183	80.3

大鼠样品

大鼠样品	添加量（mg/dL）	实测值（mg/dL）	回收量（mg/dL）	回收率（%）
血清样品	–	96.1	–	–
	86.1	179	82.5	95.8
	129	214	117	90.7
	172	258	162	94.2
	215	295	199	92.6
血浆样品（EDTA）	–	101	–	–
	95	193	92	96.8
	143	226	125	87.4
	190	273	172	90.5
	238	310	209	87.8
血浆样品（肝素）	–	103	–	–
	99	196	93	93.9
	149	226	123	82.6
	198	279	176	88.9
	248	319	216	87.1

样品检测示例

人血清样品

	测定值（mg/dL）		mean	SD	CV（%）
混合人血清	104.2	102.9	103.6	0.97	0.94
混合人血浆（EDTA）	99.8	100.2	100	0	0

正常雄性Sprague Dawley大鼠血清

序号	测定值（mg/dL）		mean	SD	CV（%）
1	132.2	139.9	136.1	5.4	4
2	113.9	122.3	118.1	5.9	5
3	135.2	143.8	139.5	6.1	4.3
4	118.4	114.9	116.6	2.5	2.2
5	132	136.9	134.5	3.5	2.6

正常雄性Sprague Dawley大鼠血浆（K2EDTA）

序号	测定值（mg/dL）		mean	SD	CV（%）
1	107.3	108.2	107.8	0.64	0.59
2	108.9	112.5	110.7	2.6	2.3
3	124.3	123.4	123.9	0.65	0.52
4	105	111.2	108.1	4.4	4.1
5	110.2	118.5	114.3	5.9	5.1

正常CD-1（ICR）雄性小鼠血清

序号	测定值（mg/dL）		mean	SD	CV（%）
1	127.1	132.6	129.9	3.9	3
2	145.9	148.1	147	1.5	1
3	143.4	158.4	150.9	11	7
4	150.2	157.1	153.6	4.9	3.2
5	136.3	132.2	134.3	2.9	2.1

正常CD-1（ICR）雄性小鼠血浆（K2EDTA）

序号	测定值（mg/dL）		mean	SD	CV（%）
1	86.8	87.9	87.3	0.72	0.83
2	88.3	94.4	91.3	4.4	4.8
3	100.2	95.1	97.7	3.6	3.7
4	107.7	98.8	103.2	6.3	6.1
5	106.1	108.6	107.3	1.8	1.6

正常CD（ICR）雄性小鼠全血（K2EDTA）

序号	测定值（mg/dL）		mean	SD	CV（%）
1	81.6	82.9	82.2	0.91	1.1
2	108	118	113	7.1	6.2
3	92	84.5	88.2	5.3	6
4	95.5	101	98.2	3.8	3.9
5	69.3	67.2	68.3	1.5	2.2

正常雄性比格犬血清

序号	测定值（mg/dL）		mean	SD	CV（%）	年龄
1	97.6	110	104	9.1	8.7	4
2	71.1	79.7	75.4	6.1	8.1	6
3	65.2	75	70.1	6.9	9.8	6
4	63.3	62.7	63	0.39	0.61	11
5	77.6	86.5	82	6.3	7.7	12
6	73.3	79	76.2	4	5.3	6
7	36.8	38.8	37.8	1.4	3.8	10
8	56.2	60.2	58.2	2.8	4.9	4

正常雄性比格犬血浆（EDTA）

序号	测定值（mg/dL）		mean	SD	CV（%）	年龄
1	97.4	89.3	93.4	5.7	6.1	4
2	96	90.9	93.5	3.6	3.9	6
3	88.5	81.4	84.9	5	5.9	10
4	78.6	71.8	75.2	4.8	6.4	12
5	85.5	80.2	82.9	3.8	4.5	6
6	75	71.8	73.4	2.2	3	11
7	85.7	83.7	84.7	1.4	1.6	10
8	83.9	82.6	83.2	0.91	1.1	12

正常雄性短毛猫血清

序号	测定值（mg/dL）		mean	SD	CV（%）	年龄
1	63.2	64.7	64	1.1	1.7	3
2	65.2	67.1	66.1	1.3	2	3
3	32.4	37	34.7	3.2	9.4	6
4	40.2	43.3	41.8	2.2	5.3	4
5	44.8	44.2	44.5	0.46	1	6
6	21.4	20.3	20.8	0.72	3.4	6
7	253	248	250	3.7	1.5	1
8	98.2	91.6	94.9	4.7	5	1

正常雄性短毛猫血浆（EDTA）

序号	测定值（mg/dL）		mean	SD	CV（%）	年龄
1	200	201	200	0.94	0.47	0.5
2	118	115	117	2.3	2	1
3	223	224	224	0.54	0.24	3
4	272	261	266	7.5	2.8	0.5
5	120	119	119	0.83	0.69	3
6	115	112	114	2	1.8	3
7	134	136	135	1.4	1	0.5
8	107	109	108	1.5	1.4	1

◆稀释线性度测试

LabAssay™ Glucose LabAssay™ 葡萄糖检测试剂盒（Mutarotase-GOD 法）

点击了解LabAssay™全系列

※ 产品已更新，旧编号为：298-65701

参考文献

1. Yamashita, Y. et al. : Biosci. Biotechnol. Biochem., 77, 888 (2013).　※小鼠血浆

2. Narita, T. et al. : Exp. Gerontol., 104, 127 (2018).　※大鼠血浆

3. Yamasaki, M. et al. : Food Sci. Technol. Res., 21,　827 (2015).　※小鼠血清

4. Fan, Y. et al. : J. Biomed. Sci., 23, 56 (2016).　※小鼠血清

5. Wang, W. et al. : J. Renin Angiotensin Aldosterone Syst., 15, 384 (2014).　※小鼠血清

6. Yamashita, Y. et al. : J. Nutr. Sci., 1, e2 (2012).　※小鼠血浆

7. Maesako, M. et al. : Neurobiol. Aging., 33, 1011 (2012).　※小鼠血清

产品列表

产品编号	产品名称	产品规格	产品等级	备注
638-50971	LabAssay™ Glucose LabAssay™ 葡萄糖检测试剂盒（Mutarotase-GOD法）	500 tests	for Cellbiology	–