热启动直扩型Taq DNA聚合酶(dNTP)说明书

产品详情

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本酶为Taq-D DNA聚合酶（KlenTaq1）的热启动型，需95度加热5分钟或98度加热2分钟而激活。Taq-D DNA聚合酶是大肠杆菌重组表达的嗜热细菌Thermus aquaticus来源的外切酶缺失型Taq DNA聚合酶（删除了5’ 外切酶结构域）。该酶具有5’→3’聚合酶活性，无5’→3’外切酶活性和3’→5’外切酶活性。扩增产物具有3'-dA尾巴。不可用于Taqman探针法q-PCR。本酶经基因工程改造，尤其适合于溶解曲线法单核苷酸多态性（SNP）分型。扩增片段的长度可达3 kb。延伸速度为1.0 kb/min（72℃）。

特点

·  本酶为热启动聚合酶，可提高扩增的特异性，减少非特异性扩增和引物二聚体；

·  热稳定性好：95℃下半衰期超过40 min；

·  模板DNA耐受范围广；

·  PCR产物具有3’-dA尾巴，可直接用于T/A克隆；

·  可以掺入dUTP、dITP、荧光标记核苷酸。

·  相比普通Taq DNA 聚合酶，本酶更加适合未处理的血液、组织、唾液等样本的PCR；

浓度

2.5U/μl

活性定义

以大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在72℃、30 min内，将10 nmole脱氧核糖核苷酸掺入到酸不溶物中所需的酶量，定义为一个活性单位（U）。

酶贮存缓冲液

20 mM Tris-HCl (pH 8.0), 100 mM KCl, 1 mM DTT, 0.1 mM EDTA, 0.5% Nonidet P40, 0.5% Tween 20, and 50% glycerol。

产品包装规格及组成

运输与保存

-20℃保存 冰袋运输

适用范围

·       溶解曲线法单核苷酸多态性（SNP）分型

·       DNA荧光标记

·       血液、组织样本等直扩PCR

应用举例

以下反应举例为50 μl标准PCR体系， 仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。

      *DNA template可参照如下标准（50 μl PCR体系）：

   PCR反应条件

注意事项

·       本酶为热启动聚合酶，需95度加热5分钟或98度加热2分钟而激活；因此有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增和引物二聚体，得到良好的PCR结果。

·       Taq-D DNA聚合酶具有脱氧核苷酸转移酶活性，因此在PCR产物3’末端通常会加上1个多余的腺嘌呤。

· 碱基出错率是指在每个碱基合成过程中所掺入的错误核苷酸数目。Taq-D DNA聚合酶的碱基错误率为1×10^-5。

· 对非热启动酶而言，建议在冰上配置PCR 反应液后，再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增，得到良好的PCR结果。

· 如进行PCR扩增后，除目的条带外，还伴随其他杂带，建议适当减少体系中的酶用量，以增加PCR扩增反应的特异性

· 本公司Buffer经大量PCR反应实例优化而成，然而对某些PCR反应存在一个镁离子浓度。若需要优化镁离子浓度，请购买本公司不含镁离子的buffer和MgCl₂/MgSO₄。

      本产品仅限科研实验使用，临床应用安全性和有效性未鉴定，不可用于医疗临床诊断。

质量控制

相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶污染。PCR方法检测无宿主残余DNA，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。

室温放置一周，扩增活性无明显改变；但强烈建议不要在室温下长期放置，用毕放回-20度。

ampliqon Taq DNA聚合酶主混合物红色简介

Taq DNA聚合酶Master Mix RED是Taq DNA PCR Master Mix的一种非常流行的替代品，具有相同的优点。惰性红色染料和稳定剂是额外的功能，可以直接加载到琼脂糖凝胶上进行分析。

特征

一体式2x主混音器，方便使用

省时反应设置

直接加载到琼脂糖上

移液管易于可视化

红色跟踪染料

提高再现性

产品产量高

最大处理5 kb

说明

Taq DNA聚合酶主混合物RED是一种即用即用的1.1倍或2倍主混合物。Taq DNA聚合酶Master Mix RED有两种最终MgCl2浓度：1.5 mM和2.0 mM。Taq DNA DNA聚合酶Master Mix RED由Ampliqon Taq DNA多聚酶、NH4+缓冲系统、dNTP和氯化镁组成。

红色追踪染料的前端在0.5-1.5%琼脂糖凝胶上以300-1000 bp运行。

红色跟踪染料和稳定剂不会干扰PCR。如果需要，可以通过旋转柱纯化或其他方法从PCR产物中去除红色染料。此外，使用Taq DNA聚合酶Master Mix RED DNA生成的PCR产物可以在用旋转柱或PureIT ExoZAP PCR CleanUp处理后直接用于测序。

直接凝胶加载

扩增结束后，PCR产物可直接加载到琼脂糖和SDS DNA凝胶上。红色染料提供了移液和凝胶加载的简单可视化。红色染料前沿在0.5-1.5%琼脂糖凝胶上以300-1000 bp运行。

TAQ DNA聚合酶2x主混合红与两个竞争对手的比较

将Taq DNA聚合酶主混合物RED与来自两个竞争对手的Taq DNA PCR主混合物进行比较。评估了四个不同长度的DNA靶标PAH（203bp）、Q8（727bp）、CFTR（613bp）和BAIP（788）。Ampliqon Taq DNA聚合酶Master Mix RED在本研究中表现相同或更好。每次放大都是根据供应商手册进行的。

红色染料没有PCR干扰

红色染料不会干扰PCR性能。两种不同的DNA靶点；PAH（203 bp）和BAIP（788 bp）使用Taq DNA聚合酶2x Master Mix RED进行重复扩增，并在琼脂糖凝胶上进行可视化。

ampliqon代理

热启动型 Taq DNA聚合酶(dNTP)说明书

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产品描述

本酶为 HotStart Taq DNA 聚合酶，需 95 度加热 5 分钟或 98 度加热 2 分钟而激活。Taq DNA 聚合酶是大肠杆菌重组表达的嗜热细菌 Thermus aquaticus 来源的热稳定型 DNA 聚合酶，分子量为 94 kDa。本酶经特殊改造，具有良好扩增能力和延伸速度，扩增片段的长度可达 5-6 kb，延伸速度为 2-3 kb/ min（72℃）。该酶具有 5’→3’聚合酶活性，较弱的 5’→3’外切酶活性；无 3’→5’ 外切酶活性。扩增产物具有 3'-dA 尾巴。

产品应用

1、热启动 PCR 扩增

2、Multiplex PCR

3、菌落PCR

4、TA 克隆 PCR 产物添加 3’-dA

5、DNA 荧光标记

活性定义

以大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物，在 72℃、30 min 内，将 10 nmole 脱氧核糖核苷酸掺入到酸不溶物中所需的酶量，定义为一个活性单位（U）。

质量控制

相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶污染。PCR 方法检测无宿主残余 DNA，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。

室温放置一周，扩增活性无明显改变；但强烈建议不要在室温下长期放置，用毕放回-20 度。

运输与保存

干冰运输。-20℃保存，有效期2年。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作！

本产品主要用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

备注

1、本酶为热启动 Taq DNA 聚合酶，需 95 度加热 5 分钟或 98 度加热 2 分钟而激活；因此有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增和引物二聚体，得到良好的PCR 结果。

2、Taq DNA 聚合酶具有脱氧核苷酸转移酶活性，因此在 PCR 产物 3’末端通常会加上 1 个多余的腺嘌呤。

3、对非热启动酶而言，建议在冰上配置 PCR 反应液后，再放入 PCR 仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增，得到良好的PCR 结果。

4、碱基出错率是指在每个碱基合成过程中所掺入的错误核苷酸数目。Taq DNA 聚合酶的碱基错误率为 1×10-5。

5、如进行 PCR 扩增后，除目的条带外，还伴随其他杂带，建议提高退火温度，或进行梯度退火， 确定最佳退火温度；同时可以适当减少体系中的 Taq 酶用量，以增加 PCR 扩增反应的特异性。

6、本公司 Buffer 经大量 PCR 反应实例优化而成，然而对某些PCR 反应存在一个良好的镁离子浓度。若需要优化镁离子浓度，请购买本公司不含镁离子的 buffer 和 MgCl2/MgSO4。

热启动型 Taq DNA聚合酶说明书

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PCR系列

产品描述

本酶为 HotStart Taq DNA 聚合酶，需 95 度加热 5 分钟或 98 度加热 2 分钟而激活。Taq DNA 聚合酶是大肠杆菌重组表达的嗜热细菌 Thermus aquaticus 来源的热稳定型 DNA 聚合酶，分子量为 94 kDa。本酶经特殊改造，具有扩增能力和延伸速度，扩增片段的长度可达 5-6 kb，延伸速度为 2-3 kb/ min（72℃）。该酶具有 5’→3’聚合酶活性，较弱的 5’→3’外切酶活性；无 3’→5’ 外切酶活性。扩增产物具有 3'-dA 尾巴。

产品应用

热启动 PCR 扩增；

Multiplex PCR；

菌落PCR；

TA 克隆 PCR 产物添加 3’-dA；

DNA 荧光标记等

活性定义

以大马哈鱼精子 DNA 作为模板/引物，在 72℃、30 min 内，将 10 nmole 脱氧核糖核苷酸掺入到酸不溶物中所需的酶量，定义为一个活性单位（U）。

质量控制

相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶污染。PCR 方法检测无宿主残余 DNA，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因。

室温放置一周，扩增活性无明显改变；但强烈建议不要在室温下长期放置，用毕放回-20 度。

运输与保存

干冰运输。-20℃保存，有效期2年。

注意事项

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作！

本产品主要用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。

备注

1、本酶为热启动 Taq DNA 聚合酶，需 95 度加热 5 分钟或 98 度加热 2 分钟而激活；因此有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增和引物二聚体，得到良好的PCR 结果。

2、Taq DNA 聚合酶具有脱氧核苷酸转移酶活性，因此在 PCR 产物 3’末端通常会加上 1 个多余的腺嘌呤。

3、对非热启动酶而言，建议在冰上配置 PCR 反应液后，再放入 PCR 仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增，得到良好的PCR 结果。

4、碱基出错率是指在每个碱基合成过程中所掺入的错误核苷酸数目。Taq DNA 聚合酶的碱基错误率为 1×10-5。

5、加 PCR 扩增反应的特异性。

6、本公司 Buffer 经大量 PCR 反应实例优化而成，然而对某些PCR 反应存在一个镁离子浓度。若需要优化镁离子浓度，请购买本公司不含镁离子的 buffer 和 MgCl2/MgSO4。