BioDynamics DE110说明书


上海金畔为BioDynamics特约经销商,BioDynamics实验室公司成立于1999年,开发用于生物研究的试剂和试剂盒。

 

  

来自嗜冷细菌的碱性磷酸酶

Alkaline Phosphatase from psychrophilic bacterium

 

 

 

 

来自嗜冷菌Shewanella sp。的碱性磷酸酶。SIB1(PAP)具有BAP和CIAP的优点。

 

 

 

来自嗜冷菌Shewanella sp。的碱性磷酸酶。SIB1(PAP)可以很容易地作为SAP和CIAP进行热灭活。
另一方面,即使通过苯酚提取,BAP也不容易失活。
请参考这个地方

 

因为酶在60℃下的活性是在37℃下的活性的约4倍,所以酶不仅可以从突出的3'端除去磷酸盐,而且可以在60℃下从钝端或凹入的5'端除去30分钟。
(另一方面,SAP和CIAP在60°C时迅速失活。)

 

DynaZyme 

产品名称

DE110

来自Shewanella.sp的碱性磷酸酶(PAP)。SIB1

 

 

 

 

PAP的优点
尽管BAP难以灭活,但PAP很容易被热灭活。

 

 

如下图所示,PAP处理在平板上产生比转化后的BAP处理更多的白色菌落。因为活性BAP在灭活处理后存活,活性BAP在连接反应期间除去插入DNA的磷酸盐并导致连接效率降低。实验表明,PAP在结扎前很容易灭活,但不能在BAP中灭活。为了在BAP处理后获得足够量的白色菌落,插入DNA必须以高插入量:载体比例加入到ligaton反应中以克服存活的BAP或必须进行两次以上的苯酚提取。

 

将1μgEcoRI切割的pBluescript SK(+)载体用0.5单位BAP或5单位PAP在37℃去磷酸化。去磷酸化后,将反应混合物处理如下,

 

1。

未处理:将反应混合物直接用于连接反应。

 

2。

苯酚:向反应混合物中加入等体积的苯酚并将其涡旋30秒。然后用yi醚萃取混合物,并用乙醇沉淀。将沉淀物干燥并用dH 2 O 溶解。将其用于连接反应。

 

3。

加热:反应混合物仅在95℃下加热5分钟用于PAP,或在100℃加热5分钟用于BAP。这些直接用于连接反应。

在上述处理后,将EcoRI切割的去磷酸化的pBluescript SK(+)载体连接到1kb插入DNA片段上。用连接产物转化感受态XL1-Blues。白色菌落的数量如图所示。

 

 

 

DNA Size Marker

 

DM112

DynaMarker® DNA Low D

 

DM122

DynaMarker® DNA High D

 

DM132

DynaMarker® for Plasmid D

 

DM100

DynaMarker® DNA Small

 

DM310

λHind III Marker

 

 

 

DNA Loading Dye

 

DM210

6×BPB Loading Dye

 

New Type Colored Size Molecular Weight Marker

 

DM253

DynaMarker® Prestain Marker for Small RNA Plus

 

DM260

DynaMarker® Prestain Marker for RNA High

 

DM270

DynaMarker® DIG Labeled Blue Color Marker for Small RNA

 

 

 

RNA Size Marker

 

DM152

DynaMarker® RNA Low II

 

DM157

DynaMarker® RNA Low II Easy Load

 

DM160

DynaMarker® RNA High

 

DM170

DynaMarker® RNA High for Easy Electrophoresis

 

DM180

DynaMarker® dsRNA

 

DM185

DynaMarker® dsRNA Easy Load

 

DM192

DynaMarker® Small RNA II

 

DM197

DynaMarker® Small RNA II Easy Load

 

 

 

Protein Size Marker

 

DM610

DynaMarker® Protein Eco

 

DM625

DynaMarker® Protein BlueRed

 

DM637

DynaMarker® Protein MultiColor III

 

DM660

DynaMarker® Protein MultiColor Stable

 

DM670

DynaMarker® Protein MultiColor Stable, Low Range

DynaZyme

 

DE110

Alkaline Phosphatase

 

 

from psychrophilic bacterium

DynaExpress

 

DS610

Long ssDNA Preparation Kit

DS620

 

DP100

ProteinChecker

 

DS500

QuickBlue Staining Solution

Other reagents for molecular biology

 

DR110

DEPC-treated Water, 1 ml Χ 5

 

DR115

DEPC-treated Water, 50 ml Χ 2

 

DR117

DEPC-treated Water, 500 ml

 

DR120

RNase-free Water, non DEPC, 1 ml Χ 5

 

DR125

RNase-free Water, non DEPC, 50 ml Χ 2

 

DR127

RNase-free Water, non DEPC, 500 ml

 

F012

DNA, Salmon Sperm, Sonicated

 

F008

Anti-6 × Histidine Antibody

 

上海金畔生物科技有限公司是专业从事生物技术产品销售的高科技企业,是国内生物试剂、仪器、消耗品领域的企业之一。金畔公司自成立以来,连续10年高速成长。公司的发展目标是建成专业从事生物技术产品销售、生产与开发的公司。 

 

上海金畔生物科技有限公司是实验试剂一站式采购服务商

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LabAssay™ ALP LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒

LabAssay™ ALP
LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒

  • 产品特性
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  • 参考文献

LabAssay™ ALP LabAssay™ ALP                              LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒

LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒


碱性磷酸酶的活性检测试剂盒,常用于检测培养的成骨细胞、实验动物血清和骨组织中的碱性磷酸酶活性。
碱性磷酸酶(ALP)广泛分布于肝脏、骨和小肠之中。组织中酶活性的变化是成骨等生理现象的重要标志。在骨代谢研究领域被用作骨形成指标之一。

本产品是以对硝基苯磷酸盐为底物的碱性磷酸酶检测试剂盒,通过使用酶标仪进行多样品检测。

 

◆检测原理

碱性磷酸酶存在下,碳酸盐缓冲溶液(pH 9.8)中的对硝基苯磷酸盐分解成对硝基苯酚和磷酸,产生的对硝基苯酚在碱性条件下呈黄色。通过测量405 nm处的吸光度,可以计算样品中的碱性磷酸酶活性。


LabAssay™ ALP                              LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒

◆产品性能


检测范围:>0.06 mmol/L

标准曲线范围:0.0625~0.5 mmol/L

重复性:C.V.<10%

样品:血清(小鼠、大鼠、人)

所需样品量:20 μL

检测时间:约20min

检测波长:405 nm

◆试剂盒成分


底物片(溶解时对硝基苯基磷酸二钠 6.7 mmol/L)

10 片

底物溶解buffer (2.0 mmol/L 氯化镁 含有 0.1 mol/L 碳酸盐缓冲液 pH 9.8)

50 mL × 1瓶

反应终止液(0.2 mol/L氢氧化钠溶液)

50 mL × 1瓶

标准溶液 (0.5 mmol/L 对硝基苯酚溶液)

5 mL × 1瓶


◆标准曲线示例


LabAssay™ ALP                              LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒



◆检测操作方法

根据下表中的条件进行反应。

Test

标准

空白

底物缓冲液

100 μL

100 μL

100 μL

待测物

样品20   μL

标准溶液20   μL

蒸馏水   20 μL

  孔板混匀仪中震荡1   min,37°C下孵育15 min。

反应终止液

80 μL

80 μL

80 μL

  孔板混匀仪中震荡1   min,使用酶标仪测量405 nm处吸光度

◆数据


加标回收测试

ALP的加标回收测试,将已知含量的标准品加标到人、小鼠、大鼠样品中,n=2。


● 人血清样品

添加量(mmol/L)

平均值(mmol/L)

回收量(mmol/L)

回收率(%)

0.429

0.097

0.527

0.098

101

0.197

0.587

0.158

80.2

0.297

0.672

0.243

81.8

0.507

0.866

0.437

86.2

● 小鼠血清样品


添加量(mmol/L)

平均值(mmol/L)

回收量(mmol/L)

回收率(%)

0.284

0.060

0.343

0.059

98.3

0.127

0.399

0.115

90.6

0.251

0.507

0.223

88.8

0.500

0.753

0.469

93.8

● 大鼠血清样品


添加量(mmol/L)

平均值(mmol/L)

回收量(mmol/L)

回收率(%)

0.374

0.060

0.439

0.065

108.3

0.127

0.483

0.109

85.8

0.251

0.598

0.224

89.2

0.500

0.855

0.481

96.2

稀释线性度测试


使用随附的缓冲液制备样品,使其处于检测范围内,用缓冲液连续梯度稀释4次,并检测结果。

● 人血清样品

LabAssay™ ALP                              LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒



● 小鼠血清样品

LabAssay™ ALP                              LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒



● 大鼠血清样品

LabAssay™ ALP                              LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒



样品检测案例


● 人样品


样品

检测值 (mean)

SD

CV (%)

混合血清,男性

0.556

0.003

0.5

混合血浆(EDTA),男性

0.07

0.001

1.2


※抗凝固剂的EDTA会产生负误差,所以请不要使用。

● 小鼠样品:CD-1(ICR)、雄性、血清


样品

检测值 (mean)

SD

CV (%)

No.1

0.31

0.013

4.2

No.2

0.453

0.001

0.2

No.3

0.495

0.015

3

No.4

0.442

0.013

2.9

No.5

0.373

0.002

0.5

● 大鼠样品:SD、雄性、血清


样品

检测值(mean)

SD

CV (%)

No.1

0.538

0.005

1

No.2

0.441

0.01

2.2

No.3

0.357

0

0

No.4

0.46

0.002

0.5

No.5

0.301

0.011

3.6

单位:mmol/L, n=2



点击了解LabAssay™全系列

※ 产品已更新,旧编号为:291-58601

参考文献


 Ito, S. et al. : J. Pharmacol. Exp. Ther., 333, 341 (2010). ※小鼠肾组织提取液

 Matsuyama, A. et al. : Clin. Exp. Pharmacol. Physiol., 45, 75 (2018). ※MC3T3-E1细胞, C2C12细胞

 Chiba, T. et al. : J. Atheroscler. Thromb., 23, 1099 (2016). ※小鼠血浆

 Kohno, Y. et al. : Stem Cell Res. Ther., 8, 115 (2017). ※骨膜间充质干细胞

 Iwakura, T. et al.J. Orthop. Res., 27, 208 (2009). ※人培养细胞提取液

 Furuya, Y. et al. : J. Biol. Chem., 286, 37023 (2011). ※小鼠血清

 Itoh, T. et al. : J. Biol. Chem., 284, 19272 (2009). ※小鼠培养细胞提取液


产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
633-51021 LabAssay™ ALP
 LabAssay™ 碱性磷酸酶检测试剂盒
500 tests for Cellbiology

现货​aveslabs PAP说明书

上海金畔现货aveslabs PAP说明书

Anti-Prostatic Acid Phosphatase Antibody

抗前列腺酸性磷酸酶抗体

重组小鼠 PAP 蛋白在细菌中表达。通过将纯化的重组 PAP 注射到蛋鸡中并从从超免疫母鸡收集的鸡蛋中纯化 IgY 部分来制备针对这种蛋白质的抗体。这些抗体已在人类、小鼠和大鼠组织中得到验证。

一抗

人、小鼠、大鼠

免疫组化、白细胞

ACPP

45 kDa

产品详情

前列腺酸性磷酸酶 (PAP)

小鼠前列腺酸性磷酸酶 (PAP) 是一种 43,698 道尔顿蛋白(381 个氨基酸;NCBI 登录号 AAF23171),与前列腺癌细胞以及参与疼痛通路的初级传入感觉神经元相关。这种蛋白质是一种酶,可将脊髓背角灰质中的一磷酸腺苷 (AMP) 去磷酸化,从而产生游离腺苷。已证明将 PAP 注射到实验小鼠的背角可通过以镇痛、抗痛觉过敏和抗异常性疼痛的方式发挥作用来降低疼痛感知。

10 毫克/毫升

多克隆

免疫球蛋白Y

免疫组化、白细胞

ACPP

45 kDa

在大肠杆菌中表达的重组小鼠 PAP

人、小鼠、大鼠

AB_2313557

-20°C 避光保存。在这些条件下,抗体应具有至少 2 年的保质期(只要它们保持无菌)。如需更长的储存期,请在 -80°C 下储存。请注意,在此较低温度下储存会因水结晶而破坏一些抗体活性。

液体

用重组小鼠前列腺酸性磷酸酶蛋白免疫鸡。重复注射后,从蛋鸡中收集免疫卵,从中制备 IgY 抗体(“抗 PAP IgY 级分”)。使用共价连接了 PAP 蛋白的琼脂糖基质(“亲和纯化的抗 PAP”)进一步纯化了一些这种抗体。随附小瓶中的最终制剂含有 10 mg/mL 的“抗 PAP IgY 部分”,辅以 20 µg/mL 的“亲和纯化的抗 PAP”加上 50% (v/v) 甘油(以防止冻结在 –20°C)。最后,将该抗体制剂过滤灭菌(0.45mm)并制备200ul等分试样。

WB:1:1000-1:2000
IHC:1:500-1:1000

通过 10% 福尔马林固定的成年小鼠,使用组织切片的免疫组织化学分析抗体。检查切片的 PAP 阳性背根神经节感觉神经元。使用浓度为 1:500 的二抗(荧光素标记的山羊抗鸡 IgY,Aves Cat.#F-1004)。

这些抗体将用作研究实验室试剂,而不是用作人类的诊断或治疗试剂。

美国

冰袋

前列腺酸性磷酸酶 (PAP) (EC 3.1.3.2) (5'-核苷酸酶) (5'-NT) (EC 3.1.3.5) (Ecto-5'-核苷酸酶) (硫胺素单磷酸酶) (TMPase) [切割成:PAPf39 ]

UniProt(免疫原物种):P15309

 

 

抗酒石酸酸性磷酸酶 TRAP 染色试剂盒 TRAP Staining Kit

抗酒石酸酸性磷酸酶 TRAP 染色试剂盒
TRAP Staining Kit

  • 产品特性
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  • Q&A
  • 参考文献

可用于破骨细胞抗酒石酸酸性磷酸酶 TRAP 染色试剂盒抗酒石酸酸性磷酸酶 TRAP 染色试剂盒                              TRAP Staining Kit

TRAP Staining Kit

抗酒石酸酸性磷酸酶 TRAP 染色试剂盒                              TRAP Staining Kit

  TRAP Staining Kit 可用于破骨细胞的抗酒石酸酸性磷酸酶染色。骨量是由成骨细胞和破骨细胞两者间的活性平衡来控制的。
  碱性磷酸酶(ALP 染色试剂盒,Cat.No. PMC-AK20-COS)和抗酒石酸酸性磷酸分别是成骨细胞和破骨细胞的标记物。

◆试剂盒的组成

组成

数量

保存

Tartrate-containing Buffer

50 mL

4°C (不用冻结)

Chromogenic Substrate

10 vials

4°C

盒内试剂的量可用于 10×96 孔板

#其他所需的材料
● 10%福尔马林中性缓冲液
● 磷酸盐缓冲盐水(PBS)
● 蒸馏水或去离子水

◆步骤(96-孔板规格)

1.   去除培养基。用 100 μL 的 PBS 清洗每个孔。
2.   添加 50 μL 10%的福尔马林中性缓冲溶液至每个孔板里,并在室温下放置5分钟。
3.   用 250 μL 的去离子水清洗每个孔板。 (×3次)
4.   用5mL 酒石酸盐缓冲液溶解1瓶 
5.   添加 50 μL 的显色底物至每个孔板内。
6.   在 37℃ 下孵育 20-60 分钟。调节孵育时间直到 TRAP 染色结果能清晰地显示在图1中。
7.   用去离子水冲洗以终止反应。

注意: 孵育时间过长会导致过度染色显色底物。

  

抗酒石酸酸性磷酸酶 TRAP 染色试剂盒                              TRAP Staining Kit

 图 1: 破骨细胞TRAP染色

相关资料


抗酒石酸酸性磷酸酶 TRAP 染色试剂盒                              TRAP Staining Kit

详情请点击图片


抗酒石酸酸性磷酸酶 TRAP 染色试剂盒                              TRAP Staining Kit

细胞培养试剂盒及细胞培养分析试剂盒的宣传单 [PDF]

TRAP Staining Kit [PMC-AK04F-COS]
TRAP Staining Kit可用于破骨细胞里的抗酒石酸酸性磷酸酶的染色。

 Stains All Gel Staining Kit for Acidic Proteins [PMC-AK02-COS]
该试剂盒专门设计用来染色调节骨骼钙化的强酸性蛋白如:如骨钙素、骨桥蛋白和BSP二强酸性蛋白质。

 Adipocyte Fluorescent Staining kit [PMC-AK19F-COS]
用氟硼荧和通过H33258荧光染色的细胞核来染色细胞里的脂肪球。

Pancreatic beta-cell Fluorescent Staining Kit [PMC-AK11F-COS]

Acidic Mucopolysaccaride Assay Kit [PMC-AK03-COS]

DNA Quantity Kit [PMC-AK06-COS]
DNA 不通过从培养细胞里提纯也可以进行量化。

TypeI collagenase assay kit [PMC-AK37-COS]

Lipid Assay Kit [PMC-AK09F-COS]
此试剂盒(油红的oilphilic红色染料)染色细胞内的油滴,并且用有机溶剂萃取法能够量化油量

GPDH Assay Kit [PMC-AK01-COS]
该试剂盒在测定酶活性方面,比传统方具有更高的稳定性和再现性等优势。

Alkaline Phosphatase Staining Kit [PMC-AK20-COS]
这是用于成骨细胞的碱性磷酸酶的染色。

Calcified nodule Staining kit [PMC-AK21-COS]

POLARIC [PMC-AK12-COS]
用于活细胞的溶剂变色荧光

Gelatin zymography kit [PMC-AK47-COS]

MMP Marker [PMC-AK38-COS]

◆TRAP 染色试剂盒常见问题


Q1: 该款试剂盒是否可用于石蜡包埋的组织?

A1: 非常抱歉,我们没有用这个做过石蜡包埋的组织。如果样品含有福尔马林的话,也不能用。


Q2: 操作说明书是可以做 10×96 孔板实验。能否介绍一下使用6孔板的步骤?

A2: 请使用 96 孔板的 30 倍试剂。比如显色试剂的量是1.5mL。


Q3: 是否可以染巨噬细胞?

A3: 可以。


Q4: 进行免疫荧光实验时,是否可以一起使用?如果可以,请告知实验流程。

A4: 我们没有用该试剂盒同时进行免疫荧光实验。


Q5: 如果显色底物溶解的话,在4℃可以保存多久?

A5: 非常抱歉,显色底物不能溶解后保存。最好现配现用。显色底物提供3mg/瓶,有 10 瓶。


Q6: 能够提供小包装?

A6: 目前不行。


参考文献


1]

Morinobu, A., Biao, W., Tanaka, S., Horiuchi, M., Jun, L., Tsuji,G., Sakai, Y., Kurosaka, M., Kumagai, S. (-)-Epigallocatechin-3-Gallate Suppresses Osteoclast Differentiation and Ameliorates Experimental Arthritis in Mice. Arthritis Rheum. 58, 2012-2018 (2008)


[2]

Hase, H., Kanno, Y., Kojima, H., Sakurai, D., Kobata, T. Coculture of Osteoclast Precursors With Rheumatoid Synovial Fibroblasts Induces Osteoclastogenesis via Transforming Growth Factor beta-Mediated Down-Regulation of Osteoprotegerin. Arthritis Rheum. 58, 3356-3365(2008)


3

Cao, H., Kuboyama, N. A Biodegradable Porous Composite Scaffold of PGA/beta-TCP for Bone Tissue Engineering. Bone. 46, 386-395 (2010)


4

Okada, Y., Hamada, N., Kim, Y., Takahashi, Y., Sasaguri, K., Ozono, S., Sato, S. Blockade of Sympathetic beta-receptors Inhibits Porphyromonas Gingivalis-induced  lveolar Bone Loss in an Experimental Rat Periodontitis Model. Arch. Oral Biol. 55, 502-508 (2010)


5

Okamoto, A., Ohnishi, T., Bandow, K., Kakimoto, K., Chiba, N., Maeda, A., Fukunaga, T., Miyawaki, S., Matsuguchi, T. Reduction of Orthodontic Tooth Movement by Experimentally Induced Periodontal Inflammation in Mice. Eur. J. Oral Sci. 117, 238-247 (2009)


6

Fujiwara, T., Fukushi, J., Yamamoto, S., Matsumoto, Y., Setsu, N., Oda, Y., Yamada, H., Okada, S., Watari, K., Ono, M., Kuwano, M., Kamura, S., Iida, K., Okada, Y., Koga, M., Iwamoto, Y. Macrophage Infiltration Predicts a Poor Prognosis for Human Ewing Sarcoma. Am. J. Pathol. 179, 1157- 170 (2011)

   

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相关产品
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PMC-AK04F-COS TRAP Staining Kit
抗酒石酸酸性磷酸酶TRAP染色试剂盒
10 PLATE
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PMC-AK20 Alkaline Phosphatase Staining Kit 1 Kit

proteinkinase PP-SHP1-020说明书

proteinkinase PP-SHP1-020说明书

 

SHP-1,20微克

Src同源性2域酪氨酸磷酸酶1,催化亚基

同义词:6型酪氨酸蛋白磷酸酶非受体,蛋白酪氨酸磷酸酶1C,PTP-1C,造血细胞蛋白酪氨酸磷酸酶,SH-PTP1,蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-1,PTPN6,HCP,HCPH,SHP1,HPTP1C ,SHP-1

订货号: PP-SHP1-020

 

SHP-1由位于N端的两个SH2(Src同源性2)域组成,随后是催化域(PTP域)和短的C末端尾巴。SHP-1的SH2结构域在酶活性的调节中起重要作用。在没有刺激的情况下,SHP-1通过其N末端SH2(N-SH2)域的变构抑制作用而失活。含磷酸酪氨酸(pY)的配体的结合导致N-SH2域内的构象转变,在其上释放PTP结构域,底物分子可接近该结构域。SHP-1主要在造血细胞中表达,并在上皮细胞中较低水平表达。它被认为是各种免疫细胞功能的负调节剂,包括B细胞和T细胞的抗原刺激以及嗜中性粒细胞活性。

蛋白质信息:SHP-1的催化亚基是在大肠杆菌中表达的单个非糖基化多肽链(氨基酸243-541)重组体。SHP-1作为不溶性蛋白聚集体(包涵体)过表达。在分离的包涵体在氧化还原缓冲液中重新折叠后,通过FPLC凝胶过滤色谱法纯化蛋白质。另外的氨基酸(Met)在N末端连接。蛋白质浓度:1.0 mg / ml,纯度:> 95%,比活度:5.000 U * / mg

订购信息:用干冰运输

产品特定文献:

Chong ZZ,Maiese K.(2007年)“ Src同源2域酪氨酸磷酸酶SHP-1和SHP-2:对细胞生长,炎症和损伤的多样化控制。” 组蛋白。22(11):1251-67。

张建。阿拉斯加索马尼;Siminovitch,KA(2000年),“ SHP-1酪氨酸磷酸酶在细胞信号转导的负调控中的作用”。Semin。免疫 12,361-378。

杨健,刘力,何丹,宋雪,梁旭,赵忠杰,周国伟。(2003)“人蛋白质酪氨酸磷酸酶SHP-1的晶体结构”。J生物化学。2003 278(8):6516-20。

Imhof D,Wieligmann K,Hampel K,Nothmann D,Zoda MS,Schmidt-Arras D,Zacharias M,Boehmer FD,ReissmannS。“蛋白质酪氨酸N末端SH2结构域的线性和环状磷酸肽配体的设计和生物学评估磷酸酶SHP-1。” J Med化学 2005年3月10日; 48(5):1528-39。
 

 

 

 

 

proteinkinase PP-PP2CA-050说明书

proteinkinase PP-PP2CA-050说明书

 

PP2C alpha,50 µg

蛋白质磷酸酶1A /蛋白质磷酸酶2 C alpha

别名:蛋白磷酸酶1A,EC 3.1.3.16,蛋白磷酸酶2C同工型alpha,PP2C-alpha,IA,PPM1A,PP2CA,MGC9201

货号: PP-PP2CA-050

Ser / Thr特异性磷酸酶可分为两个主要家族:PPP家族,包括PP1,PP2A,PP2B /钙调神经磷酸酶和由PP2C组成的PPM家族。PPM基团对二价金属离子(Mg2 +,Mn2 +)有严格的要求,并且对已知的PPP抑制剂不敏感。初发现哺乳动物PP2C存在两种高度保守的同工型(α和β),它们表现出大约70%的序列同源性。某些亲脂性化合物可将PP2Cα刺激10到1/2倍。通过脂蛋白的不饱和脂肪酸,活化的PP2Cα参与了促凋亡蛋白BAD的去磷酸化,从而引发了细胞凋亡。PP2Cα还上调p53的表达和活性,降低CDK2和CDK6以及MAPK的活性。

蛋白质信息:在大肠杆菌中生产的PPM1A /PP2Cα重组体是一条含有382个氨基酸的单糖基化多肽链,分子量为46.6 kDa。蛋白质浓度:1.0 mg / ml,纯度:> 95% SDS PAGE,比活度:8.000 U * / mg,

订购信息:用干冰运输

请注意:本产品仅用于研究目的,只能交付给学术和商业客户。 

产品特定文献:

陆刚,王Y。(2008年)“哺乳动物2C型磷酸酶同工型的功能多样性:来自一个老家庭的新故事。” 临床Exp Pharmacol生理学。35(2):107-12。

Klumpp S,Thissen MC,Krieglstein J.(2006年)“细胞凋亡中的蛋白磷酸酶2 Calpha和2 Cbeta类型”。Biochem Soc Trans。34(Pt 6):1370-5

杰克逊医学博士,德努·JM。(2001)“蛋白质磷酸酶的分子反应-从结构和化学的观点。” Chem Rev.101(8):2313-40。

Lammers T,Peschke P,Ehemann V,Debus J,Slobodin B,Lavi S,Huber P.(2007年)“ PP2Calpha在细胞生长,放射敏感性和化学敏感性以及致瘤性中的作用。” 摩尔癌症。17; 6:65

产品引文:

Mihlan S1,ReißC,Thalheimer P,Herterich S,Gaetzner S,Kremerskothen J,PavenstädtHJ,Lewandrowski U,Sickmann A,Butt E.(2013)“ LASP-1的核输入受磷酸化和动态蛋白质-蛋白质相互作用的调节癌基因。32(16):2107-13。

 

 

酸性磷酸酶 Acid Phosphatase

酸性磷酸酶
Acid Phosphatase

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酸性磷酸酶酸性磷酸酶                              Acid Phosphatase

Vitamin B1・B2测定用

  本产品是由米曲霉(Aspergillus oryzae产生的酵素、含有多种酵素。测定维生素B1B2时,利用磷酸酶的高活性,能从结合型分解到游离型。

酸性磷酸酶                              Acid Phosphatase

◆通知

本产品和通常测定维生素B1・B2时使用的高峰淀粉酶U是同一种酵素,可以一样使用。

◆规格 


●Appearance : Slightly yellow~brown、powder

●Potency : min.100 Units/g

<Potency的定义>

pH3.5, 40℃条件,β-甘油磷酸二钠溶液作用下每30分钟分离出1 mg的磷的酵素量记为1 Unit。

◆使用例

● 配置酵素溶液

将本产品大约1 g溶解到100 mL的纯水或者缓冲液中,调整pH到4.5附近,放置在冷所处一会后,过滤或离心分离,使用上清液。

● 与样品反应

样品中抽取配置维生素B1或B2含量大约为10 μg左右。该样品为干燥酵母或者是植物组织(大豆等)的抽出液时,加入本产品1%溶液0.5~1 mL、40℃条件下反应5小时。该样品为动物组织(猪肉或猪肝等)的匀浆时,加入1%溶液大约10 mL、40℃条件下反应约10小时。

  ※上记是一般的使用例。根据样品的种类和结合型维生素B1或B2的含量不同,请根据需要改善条件。

产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
016-24901 Acid Phosphatase
酸性磷酸酶
10 g for Vitamin B1 and B2 Determination
012-24903 Acid Phosphatase
酸性磷酸酶
50 g for Vitamin B1 and B2 Determination

双特异性蛋白磷酸酶抑制剂

双特异性蛋白磷酸酶抑制剂

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双特异性蛋白磷酸酶抑制剂双特异性蛋白磷酸酶抑制剂


蛋白磷酸酶是使磷酸化蛋白去磷酸化的酶。作为生物体内重要的蛋白翻译后修饰方式,磷酸化与去磷酸化发生在多种蛋白中。磷酸化与去磷酸化的调节错综复杂,有助于控制信号传递和调节酶活性。

根据对氨基酸残基的特异性进行分类,蛋白磷酸酶可分为酪氨酸磷酸酶和丝氨酸/苏氨酸磷酸酶两种。

研究表明,双特异性蛋白磷酸酶(Dual-specific Protein Phosohatase)可作用于酪氨酸残基,也可作用于丝氨酸和苏氨酸残基。

FUJIFILM Wako可提供双特异性蛋白磷酸酶VHR的选择性抑制剂RE12,以及CDC25B的选择性抑制剂RE44。

◆RE12

抑制对象:Vaccinia H1-related Phosphatase(VHR)

双特异性蛋白磷酸酶抑制剂

化学式

RE12是天然由来化合物RK-682的衍生物,据报道其具有VHR和乙酰肝素酶抑制活性,可高选择性抑制VHR。

RE12对双特异性蛋白磷酸酶的抑制活性

PPases

VHR

CDC25A

CDC25B

CDC25C

IC50 (μmol/L)

1.63

ND

ND

ND

ND:IC50>100 μmol/L

关于VHR

痘苗病毒 H1 相关磷酸酶 (VHR,Vaccinia H1-related Phosphatase) 是一种双特异性蛋白磷酸酶,可使 MAPK 家族的 ERK1/2 和 JNK1/2 去磷酸化。

据报道,在VHR表达被抑制的细胞中,细胞周期的G1/S和G2/M转变停滞。此外,VHR在宫颈癌细胞(HeLa细胞)和前列腺癌中过度表达,因此VHR作为抗癌药物开发的靶点也备受关注。

RE44

抑制对象:Cell Division Cycle 25 B (CDC25B)、Cell Division Cycle 25 A (CDC25A)

双特异性蛋白磷酸酶抑制剂

化学式

RE44是一种选择性作用于CDC25A和CDC25B而不作用于CDC25C的抑制剂。

RE44对双特异性蛋白磷酸酶的抑制活性

PPases

CDC25A

CDC25B

CDC25C

VHR

IC50 (μmol/L)

13.5

4.26

ND

24.9

ND:IC50>100 μmol/L

关于磷酸酶CDC25

研究表明,磷酸酶CDC25B、CDC25A可促进细胞周期的发展,参与DNA损伤时检查点调节,并且在多种癌细胞中表达亢进。

CDC25(细胞分裂周期25分子)是一种双特异性蛋白磷酸酶,是一种使同一蛋白质上的磷酸化酪氨酸和磷酸化丝氨酸/苏氨酸去磷酸化的酶。 使 CDK(细胞周期蛋白依赖性激酶)去磷酸化,促进激酶激活和细胞周期进程。 当 DNA 受到紫外线照射、电离辐射或药物损伤时,它还参与检查点调节。

CDC25蛋白有CDC25A、CDC25B和CDC25C的亚型。据报道CDC25A和CDC25B在肺癌、胃癌和胰腺癌等多种癌细胞中过表达。

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