Kingfisher生物技术有限公司致力于加快兽医基础研究，开发和商业化了之前市场未曾涉及的多个物种的研究试剂。我们的主要重点是开发牛、马、猪和鸡的兽医研究用高品质试剂，此外，我们也提供包括犬、猫、山羊、绵羊、火鸡、水牛、鲶鱼、鲑鱼等其他动物和鱼类研究领域用试剂。我们公司位于明尼苏达州圣保罗市，我们与大学和企业实验室建立了合作研究中心，位于明尼苏达大学的明尼阿波利斯和圣保罗校区间，上海普迈生物新近被代理Kingfisher产品，将与Kingfisher公司携手开拓中国市场公司必将成为生物技术领域的*,也将Kingfisher公司的理念贯彻到底，打造生物技术新概念，Kingfisher主要产品有以下几个方面：
    重组蛋白：   干扰素、白介素、巨噬细胞移动抑制因子等
    多克隆抗体： 抗CCL2、抗IL、抗CXCL9等多抗
    ELISA试剂盒：牛CCL2、牛IL-13、犬和马IL-1 beta、鸡IL-16等ELISA 试剂盒

种属 Species
        Bovine   牛   重组蛋白、多抗、ELISA试剂盒
        Canine   犬   重组蛋白、多抗、ELISA试剂盒
        Chicken  鸡  重组蛋白、多抗、ELISA试剂盒
        Equine   马   重组蛋白、多抗、ELISA试剂盒
        Feline    猫   重组蛋白、多抗、ELISA试剂盒
        Rabbit   兔   重组蛋白、多抗、ELISA试剂盒
        Swine    猪   重组蛋白、多抗、ELISA试剂盒
        Turkey  火鸡重组蛋白、多抗、ELISA试剂盒

蛋白质常见问题

什么是载体蛋白？

载体蛋白是在重构期间添加到冻干的重组蛋白中的另外的蛋白质，以在储存，冷冻和使用期间增加稀释的重组蛋白的稳定性。

什么是重组蛋白重建的可接受的载体蛋白？

牛血清白蛋白（BSA）是用于重组蛋白重建的常见的载体蛋白。但是，如果使用牛重组蛋白，请使用非牛载体蛋白，如马血清白蛋白（ESA）。 

如果使用重组蛋白进行体外细胞培养刺激，通常可以在含有血清或其他可接受的载体蛋白而不是BSA / ESA溶液的完整细胞培养基中直接重构重组蛋白。

重构需要多少浓度的载体蛋白？

在终溶液中载体蛋白的浓度应至少为0.1％。如果需要，可以使用另外的载体蛋白。通常，在1X PBS中的0.1-10％BSA溶液是可接受的重构溶液。

重组蛋白重建的可接受体积是多少？

通常，对于我们的5μg和25μg重组蛋白质小瓶，100μL是可接受的重建体积。我们的5μg和25μg样品瓶的大体积为500μL。 

通常，1 mL是我们100μg小瓶重组蛋白的可接受的重建体积。我们的100μg样品瓶的大体积为2 mL。

重组时重组蛋白的浓度是多少？

重组蛋白的浓度取决于重建体积。例如，如果在100μL载体蛋白溶液中重构5μg重组蛋白，则浓度为5μg/100μL或50μg/ mL。 

重组蛋白的生物活性是什么？

重组蛋白的生物活性列于数据表。如果数据表中未列出生物活性，我们正在测试重组蛋白的生物活性。物种特异性生物测定通常不适用于我们的大多数蛋白质。因此，需要开发这些生物测定法。我们选择在此测试期间提供重组蛋白。 

重组蛋白的生物活性单位是多少？

我们仅以质量单位（即μg）报告我们的重组蛋白生物活性，而不是以生物活性单位（即单位）。生物活性单位是在特定条件下在特定测定中产生特定生物活性测量所需的产物量。生物活性单位依赖于蛋白质和化验。另外，通常仅人类重组蛋白质具有与生物活性单位相关的这些特异性生物测定法。生物活性测量单位通常没有明确规定非人类物种。鉴于生物测定通常产生高度可变的结果，生物活性单位的确定也是高度可变的。然而，质量不是可变的，因此它提供了更准确的测量。从而，

酵母作为表达系统有什么优势，它与大肠杆菌表达系统相比如何？

酵母作为表达系统具有几个优点，并且由酵母产生的重组蛋白具有几个特征，使得它们成为包括细胞培养在内的许多应用的理想选择。Kingfisher Biotech使用的酵母表达系统将重组蛋白分泌到培养基中。这种分泌通常被认为是纯化过程的步，因为酵母细胞固有地分泌很少的天然蛋白质。酵母分泌的重组蛋白质通过高尔基体处理，因此它们可以进行翻译后修饰。这些修饰可包括糖基化，磷酸化和硫酸化。有许多蛋白质需要修改蛋白质功能，正确折叠或溶解度。酵母表达系统的另一个好处是酵母没有像E这样的细菌细胞壁。大肠杆菌，因此不存在内毒素（脂多糖）。酵母天然无内毒素。

大肠杆菌表达的重组蛋白不含有翻译后修饰（大肠杆菌不含高尔基体）。在大肠杆菌中制备的重组蛋白通常定位于包涵体。从这些包涵体中纯化可能需要苛刻的条件来释放重组蛋白，然后进行随后的重折叠过程。这些苛刻的治疗可以影响蛋白质的功能。

ELISA常见问题解答

你有自己动手的ELISAs技术指南吗？

是的，我们这样做。这是链接–ELISA技术指南

使用自己动手ELISA可以进行多少次检测？

自己动手的ELISA试剂盒是独立的非结合抗体（捕获抗体），重组蛋白（标准）和生物素化抗体（检测抗体）。如果需要（或组件用完），可以单独购买这些组件中的每一个。已显示这些抗体与ELISA中提供的标准一起起作用。评估各个组件的数据表将提供代表性的工作浓度，以帮助确定可以执行的分析的数量。通常，捕获抗体是限制性试剂。

例如，猪IFNα1自己做的ELISA（DYI0724S-003）包括：
 

100μg抗猪IFNα1多克隆抗体（PB0445S-100）：

ELISA中该试剂的推荐滴度为1-5μg/ ml。如果在96孔板中每孔100μl涂覆，则需要大约10ml试剂涂覆96孔板。因此，根据使用的滴度，每板需要10μg-50μg。这意味着所提供的试剂应涂覆2-10个板。
 

5μg重组猪IFNα1（RP0010S-005）：

*标准浓度需要由用户确定。如果使用50 ng / ml（0.05μg/ ml）的高标准浓度，假设每个平板需要0.5 ml标准品，这应该为200次分析提供足够的标准。
 

50μgBiotinylatedAnti-SwineIFNα1多克隆抗体（PBB0451​​S-050）：

ELISA中该试剂的推荐滴度为0.1-0.5μg/ ml。如果检测到 

在96孔板中每孔100μl，这将需要大约10ml试剂来检测96孔板。因此，取决于所用的滴度，每个ELISA需要1-5μg。这意味着所提供的试剂应在10-50次检测中检测。

因此，取决于优化结果，能够用所提供的组件执行的ELISA的数量可能存在相当大的差异。如前所述，这些组件中的每一个都可以单独购买。有可能的是，捕获抗体需要单独购买，因为该试剂将在其他组分（它通常是限制性试剂）之前首先被耗尽。

我们可以在ELISAs中使用其他样本类型，如血清或血浆吗？

我们的许多客户使用我们的ELISAs进行血清，血浆或其他样品类型检测。为了使用不同的样品类型，需要在测定中验证标准品和样品稀释剂。*稀释剂应提供线性结果（即当稀释样品时，在校正稀释因子时获得相似的值）并且具有80-120％的回收率（即，如果将已知量的标准物添加到样品类型中，80-添加的120％应在测定中测量。

为了验证样品稀释剂是否与所需的样品类型一起工作，需要进行线性和回收分析。该测定法易于实施。只需使用您的测试样品稀释剂准备正常的标准曲线。将已知量的标准品加入/加入测试样品中。向测试样品稀释剂添加/加入相同数量的标准品（这是100％回收率）。确保在测定中运行非标准加标测试样品，以从测试样品中减去任何背景值。准备稀释剂标准加标样品，测试标准加标样品和非标准加标样品与测试稀释剂（即1：2,1：4,1：8,1：16,1）的多个连续稀释液：32等）。当标准加标样品值（减去非标准加标样品背景）为稀释剂标准加标样品结果的80-120％时，*回收率。此外，当校正稀释（线性）时，结果应给出类似的值。 

通常，在DPBS（试剂稀释剂）中用4％BSA进行1：4至1：8稀释足以实现样品的线性并获得*回收率。如果在DPBS中用4％BSA不能获得*结果，则需要使用更高的样品稀释液或不同的样品稀释剂。要尝试的其他稀释剂是DPBS中10-50％的血清（例如胎牛血清或马血清）（只要血清不含可能与ELISA交叉反应的目的蛋白质）。另外，增加DPBS缓冲液中的BSA含量也可以增加线性和恢复。

 产品列表如下：

Bovine IL-5 Primer Set