标签归档：探针

goryochemical GC301说明书

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goryochemical通过许可和内部增值创造创新荧光探针，方法是扩大细胞生物学的应用，并方便地将其带给学术界、小型生物技术公司和大型制药公司的研究人员。

在invitro和invivo与生命科学仪器公司建立了*的合作关系。

实验阶段创造了理解假设驱动和发现研究的解决方案。与光学探针相关的坚实的化学背景，通过与东京大学(长野教授和乌拉诺教授)和北海道大学(诺贝尔奖获得者铃木教授)的关系，使高阳成为连接invitro和invivo以及人类翻译的荧光试剂的主要供应商。

在临床试验中，我们还开发了新的荧光探针，可以在日本的临床前和临床试验中用于荧光图像引导手术检测癌症。

在不久的将来，我们将为患者提供荧光图像引导手术的新方法。

goryochemical GC301说明书

AcidiFluor™ ORANGE

酸性荧光橙色

Size10μg×10

 

活细胞酸性细胞器的荧光探针(试验尺寸)

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代码号 结果 大小 价格
GC301 酸性荧光橙色 10 μg × 20 680.00美元
GC3011 10 μg × 10 380.00美元
  • 高信噪比
  • 橙色荧光，可用于多色成像
  • *的光稳定性

acid Fluor ORANGE是一种荧光成像探针，可在酸性环境中显著增强荧光。该探针能选择性地染色溶酶体、晚期内体和颗粒等酸性细胞器。其优异的选择性能够检测酸性环境。即，在pH5.0的条件下，与酸性细胞器的环境相同，荧光强度是物理pH 7.4的50倍或更多。acid Fluor ORANGE对照射激发光表现出很强的光稳定性。由于它通过在532纳米或514纳米激发发出橙色荧光，多色成像通过与蓝色荧光(CFP、赫希斯特等)结合成为可能。)，绿色荧光(绿色荧光蛋白、荧光素等。)和近红外荧光。acid Fluor ORANGE可用于检测酸性细胞器、观察颗粒释放、胞吞/胞吐成像等。

酸性荧光橙的特点

λabs 535 nm
λfl 560 nm

pKa 5.1

高信噪比

图1。酸荧光橙的荧光光谱与酸碱度的关系

酸性荧光橙的荧光光谱分别在pH 5.0或pH 7.4的磷酸盐缓冲液中测定。pH 5.0缓冲液对应于酸性细胞器中的条件，pH 7.4对应于生理细胞质条件。酸性荧光橙在pH 5.0时的荧光强度比pH 7.4缓冲液中的荧光强度提高了50倍。(λex 532 nm / λem 568 nm)

发出橙色荧光，可用于多色成像

图2使用HeLa细胞的多色成像的例子

用酸性荧光橙和Hoechst33342对表达线粒体-绿色荧光蛋白的HeLa细胞进行多重染色。溶酶体用酸性荧光橙色染色，细胞核用Hoechst33342染色为蓝色，线粒体用绿色荧光蛋白染色为绿色。如图2所示，酸性荧光橙色可用于多色成像

*的光稳定性

图3通过光浸试验与竞争对手产品的比较

样品被连续照射180秒，并在共焦显微镜下观察。尽管溶血跟踪器绿色DND-26和溶血跟踪器红色DND-99显著变色，但酸性荧光橙色的荧光仍然存在。溶血传感器绿色DND-189不适合连续观察，因为荧光通过激发光照射泄漏到细胞质中。
高阳化学公司在广濑贤三教授(东京大学神经生物学系医学研究生院教授)的指导下，将酸性荧光橙商业化。酸性荧光橙获得东京大学的许可。该产品的开发得到日本科学技术署(JST)项目“测量和分析系统和技术的开发”的支持。

 

酸性荧光橙问答

我能用于固定样品吗？

不。不幸的是，酸性荧光橙色不能用于固定样品。据推测，酸性荧光橙在固定样品中可能不发荧光，因为酸性环境不能通过固定作用保持在酸性细胞器中。酸性细胞器中的酸性环境似乎只有在细胞存活时，才能利用三磷酸腺苷作为能源。

什么样的成像是可能的？

酸性荧光橙可用于溶酶体成像、RBL-2H3脱颗粒成像(如应用笔记所示)和使用中性粒细胞或胰岛素瘤的胞吐成像等。一旦我们准备好，这些应用程序将在应用笔记中发布。

 

除了pH 7.4和pH 5.0外，荧光光谱如何？

在pH 3.0-pH8.0缓冲溶液中测得的酸性荧光橙色的荧光强度光谱如下所示。酸碱值变得越小，荧光发射的强度增加。

 

 

 

 

关于细胞内转运的研究:酸性荧光橙色能标记抗体或蛋白质吗？

使用酸性荧光橙-NHS(GC302)可以使蛋白质进入酸性细胞器时发出荧光。

 

 

荧光强度在小于3的酸碱度下波动吗？

酸性荧光橙的强度在小于3的酸碱度下波动不大。

 

酸性荧光橙-NHS问答

标签产量是如何确定的？

标记产率可以通过使用以下公式来确定。用酸性荧光橙-NHS的浓度除以目标蛋白的浓度，可以估算出与目标蛋白分子结合的酸性荧光橙分子的数量。

A544,280:标记蛋白在544纳米或280纳米的吸光度

CF:校正系数(0.12)

e酸性荧光橙-NHS:酸性荧光橙-NHS的摩尔吸光系数(80，000)

e蛋白质:目标蛋白质的摩尔吸光系数(例如IgG为216，000)

 

有效标记目标蛋白的宜方法是什么？

我们建议使用纯化的抗体或蛋白质。如果您想标记蛋白质混合物，请通过超滤或凝胶过滤去除污染物质。尤其是胺的污染(例如。Tris)导致标记效率降低。

值得注意的是，如果过量的染料结合到目标蛋白上(每个蛋白分子7-8个分子)，就会导致荧光信号饱和或目标蛋白变性。

 

酸性荧光橙色染料可用于固定细胞成像吗？

很抱歉，酸化荧光橙色-NHS仅用于“活”细胞成像。这是因为囊泡中的酸性环境被固定过程破坏了。

CaSiR-1/CaSiR-1AM的问答

什么是调幅酯？

氨基甲烷代表乙酰氧基甲基，氨基甲烷酯由羧酸衍生而来，以增加质膜的渗透性。如下图所示，CaSiR-1AM渗透细胞膜，其乙酰氧基甲基被细胞内酯酶裂解，形成能与钙相互作用的CaSiR-1结构2+。当乙酰氧基甲基被裂解产生CaSiR-1时，水溶性显著增加，这变得难以泄漏胞外液体。

 

CaSiR-1/CaSiR-1调幅对其他阳离子有响应吗？

卡西尔-1和卡西尔-1调幅在高达1毫米毫克的情况下几乎没有发射2+或者高达100毫米纳+或者国王+。

当我用卡西尔-1上午给细胞染色时，有必要添加普朗尼克F-127(清洁剂)吗？

不仅卡西尔-1调幅，而且所有调幅酯探针都具有*的亲脂性。因此，在调幅酯溶解在二甲基亚砜中，然后直接分散在缓冲溶液中的情况下，它们聚集并变得难以进入细胞。因此，有必要通过添加去污剂和在某些情况下，另外对去污剂和氨基甲酸酯的溶液进行超声处理来制备很好地结合到细胞中的染色溶液。

CaSiR-1/CaSiR-1调幅的细胞毒性如何

虽然我们还没有进行细胞毒性试验，但我们计划比较我们的产品和竞争对手的产品的细胞毒性。我们一做实验，就把结果上传到惠普。此外，由于激发光毒性是小波长%3E长波长，与蓝色、绿色或红色钙探针相比，近红外探针CaSiR-1不会对细胞造成太大伤害。

POLARIC问答

为什么颜色会改变？

因为亲和力不同。

POLARIC通过改变溶剂来改变颜色，我们称之为溶剂变色。(左侧图片显示。)

溶剂有一个叫做极性的指数。POLARIC荧光探针对溶剂的亲和力受溶剂极性的影响，如类水或类油。这改变了溶解的POLARIC荧光探针，例如，蓝色代表色拉油，绿色代表酒精，红色代表水。因此，POLARIC荧光探针和溶剂之间的亲和力差异可以表现为颜色的变化。

这一特性使我们能够替代各种现象，如温度变化、压力变化、酸碱度变化和硬度变化等。POLARIC荧光探针的颜色变化。

图1贾布朗斯基图和溶剂重取向的模式图

光吸收激发POLARIC荧光探针后，它们的激发状态通过周围溶剂的重新定向而稳定。

由于处于激发状态的探针分子的电荷很大程度上是局部的，极性溶剂比非极性溶剂更有效地稳定激发状态。稳定性的差异反映在荧光波长的差异上。

ET(30)每种溶剂的值如表所示。如图2所示，当POLARIC溶解在每种溶剂中时，颜色从蓝色(左侧)变为黄色(右侧)。这是因为当ET(30)当ET(30)价值大。

ET(30)每种溶剂的值

溶媒 环己烷 甲苯 二氧六环 THF 乙基
醋酸盐		 CHCl3 CH2Cl2 丙酮 DMF DMSO
东帝汶(30)値 30.9 33.9 36 37.4 38.1 39.1 41.1 42.2 43.2 45.1

 

图2溶解POLARIC的各种溶剂的紫外图像照片

 

 

 

 

 

empiregenomics染色体控制探针

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empiregenomics染色体控制探针

设计对照探针以在染色体的着丝粒区域附近杂交。对照探针可用于染色体计数和验证基因特异性探针已与正确的染色体杂交。控制探针默认情况下以绿色标记，但可以进行定制以满足您的需求。套件以10套为一组，通常在1-3周内寄出。与基因特异性探针或BAC文库探针一起订购时，对照探针单独包装，但可以根据要求进行混合。在正常外周血中，在相间核和中期扩散中均已用FISH证实了探针。这些产品仅用于研究目的（RUO），不可用于诊断程序。

 

 

染色体1控制探针

 

染色体1对照探针与1号染色体的着丝粒区域特异性杂交，并使用绿色，红色，橙色，金色或绿色的荧光原位杂交进行标记。1号染色体对照探针是枚举1号染色体的理想选择，当与基因或区域特异性探针结合使用时，可以作为对照。红色可作为带有CE标志的产品

 

**本产品仅用于体外和研究用途。本产品不用于诊断用途。

<img data-cke-saved-src=”https://www.empiregenomics。。ｃｏｍ/img/ideograms/control_probes/CHR01-10-GR.png” src=”https://www.empiregenomics。。ｃｏｍ/img/ideograms/control_probes/CHR01-10-GR.png” alt=”染色体” 1=”” control=”” probe”=”” class=” col-sm-12″ style=”box-sizing: border-box; vertical-align: middle; border-style: none; max-width: 100%; position: relative; width: 780px; padding-right: 15px; padding-left: 15px; flex: 0 0 100%;”>

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SKU 测试套件 缓冲 染料色
CHR01-10-GR   （标准设计） 10（20微升 100微升 '
CHR01-10-RE 10（20微升） 100微升 '
CHR01-10-AQ 10（20微升） 100微升 '
CHR01-10-OR 10（20微升） 100微升 '
CHR01-10-GO 10（20微升） 100微升 '
CHR01-10-DIG 10（20微升） 100微升 '
CHR01-10-生物 10（20微升） 100微升

abpbio 2024年价格表

发表于由

abpbio2024年价格表

ABP Biosciences 公司是一家专业从事荧光试剂及其试剂盒的研发、生产、销售和技术服务于一体的高新技术企业，致力于为生命科学、医学、农业、环保及司法鉴定等领域提供优质的生物荧光试剂产品和技术服务。

ABP Biosciences 公司主要产品有：核酸、蛋白荧光染料及定量检测试剂盒；核酸标记探针；细胞器荧光探针；荧光标记二抗及链霉亲和素；细胞增殖及细胞活性研究试剂盒；细胞凋亡研究试剂盒；细胞转染试剂；荧光素酶检测试剂；Andy Fluor™ 荧光标记探针；抗体标记试剂盒；离子探针；活性氧检测探针；qPCR及RT-qPCR试剂盒等四百余种产品供客户选择。

ABP Biosciences 公司总部设在美国马里兰州，拥有300平方米的现代化化学合成实验室，及相应的生物分析测试实验室。公司严格按照ISO 9001:2008质量管理体系实行，确保为客户提供高品质的产品和服务。

特别告知：为保证产品质量与良好性能，所以在购买相应产品的同时我司会收取一定量的运输费用！！！本次报价有效时间为2024年1月18日—2024年12月14日。

货号 品名 规格 价格 品牌 货期 价格来源
FP002 NGS™ dsDNA HS Assay Kit 1000assays 1500 abpbio 1-2周 上海金畔
FP005 NGS™ ssDNA Assay Kit 200assays 480 abpbio 1-2周 上海金畔
C405 5-FAM-dUTP, 1 mM in TE buffer 25uL 1680 abpbio 1-2周 上海金畔
FP318 LipoFectMax™ 3000 Transfection Reagent 0.75mL 2400 abpbio 1-2周 上海金畔
L004 Andy Fluor 488 NHS Ester 1umol 2640 abpbio 1-2周 上海金畔
FP312 TRIzol Reagent 100ml 600 abpbio 1-2周 上海金畔
L038 iLink™ Andy Fluor 647 Antibody Labeling Kit 1kit 2400 abpbio 1-2周 上海金畔
L011 Andy Fluor 647 NHS Ester 1umol 2640 abpbio 1-2周 上海金畔
FP007 NGS™ RNA HS Assay Kit 200assays 480 abpbio 1-2周 上海金畔
FP319 LipoFectMax™ 3000 Transfection Reagent 1.5mL 3600 abpbio 1-2周 上海金畔
L160B Cy®3 Streptavidin 500ug 600 abpbio 1-2周 上海金畔
LP007-1 LNP-102 1mL 720 abpbio 1-2周 上海金畔
LP008-1 LNP-0315 1mL 720 abpbio 1-2周 上海金畔
FP302 Super ECL Ultra Western Blotting Detection Kit 100ml 1600 abpbio 1-2周 上海金畔
P005A Phos-Tag™ Phosphoprotein Gel Stain 500ml 1200 abpbio 1-2周 上海金畔
FP012 NGS™ 1X dsDNA HS Assay Kit 500assays 900 abpbio 1-2周 上海金畔
FP011 NGS™ 1X dsDNA HS Assay Kit 200assays 500 abpbio 1-2周 上海金畔
TN501-1 Tn5 Transposase 20units 3360 abpbio 1-2周 上海金畔
TN501-2 Tn5 Transposase 100units 12000 abpbio 1-2周 上海金畔
FP004 NGS™ dsDNA BR Assay Kit 1000assays 1500 abpbio 1-2周 上海金畔
C036 CDCFDA, SE 25mg 1000 abpbio 1-2周 上海金畔
C041 MitoTrack™ Orange CMTMRos 1mg 1200 abpbio 1-2周 上海金畔
C045 JC-1 Dye 5mg 1280 abpbio 1-2周 上海金畔
C402 5-Aminoallyl-UTP, 10 mM in water 100uL 1320 abpbio 1-2周 上海金畔
C407 5-FAM-UTP, 1 mM in TE buffer 25uL 1680 abpbio 1-2周 上海金畔
C422 Cy5-X-UTP, 1 mM in TE buffer 25uL 2880 abpbio 1-2周 上海金畔
D022 ABP Lentivirus Storage Buffer 50ml 800 abpbio 1-2周 上海金畔
FP001 NGS™ dsDNA HS Assay Kit 200assays 480 abpbio 1-2周 上海金畔
FP003 NGS™ dsDNA BR Assay Kit 200assays 480 abpbio 1-2周 上海金畔
FP008 NGS™ RNA HS Assay Kit 1000assays 1500 abpbio 1-2周 上海金畔
FP333 PolyFectRNA™ Transfection Reagent 3mL 4800 abpbio 1-2周 上海金畔
FP332 PolyFectRNA™ Transfection Reagent 1mL 2000 abpbio 1-2周 上海金畔
FP330 PolyFect™ Transfection Reagent 1mL 1600 abpbio 1-2周 上海金畔
P003A eLuminol Protein Gel Stain (1,000X) 500ul 600 abpbio 1-2周 上海金畔
A056 CellCycle™ PI/RNAse Stain Solution 100assays 600 abpbio 1-2周 上海金畔
N100 GreenView DNA Gel Stain 500ul 400 abpbio 1-2周 上海金畔
N101 GreenView Plus DNA Gel Stain 500ul 600 abpbio 1-2周 上海金畔
N103 GreenView Ultra DNA Gel Stain 500ul 800 abpbio 1-2周 上海金畔
N102 RedView DNA Gel Stain 500ul 600 abpbio 1-2周 上海金畔
D012 SafeGreen Loading Dye 1mL 300 abpbio 1-2周 上海金畔
D013 SafeRed Loading Dye 1mL 300 abpbio 1-2周 上海金畔
D016 DNA Loading Buffer (6X) 5mL 70 abpbio 1-2周 上海金畔
D010-01 SYBR Green I (200× DMSO) 1mL 480 abpbio 1-2周 上海金畔
D010-02 SYBR Green I (200× DMSO) 5×1mL 1500 abpbio 1-2周 上海金畔
D011-01 ROX Reference Dye (25 μM) 1mL 480 abpbio 1-2周 上海金畔
D011-02 ROX Reference Dye (25 μM) 5×1mL 1500 abpbio 1-2周 上海金畔
FP006 NGS™ ssDNA Assay Kit 1000assays 1500 abpbio 1-2周 上海金畔
FP009 NGS™ RNA BR Assay Kit 200assays 480 abpbio 1-2周 上海金畔
FP010 NGS™ RNA BR Assay Kit 1000assays 1500 abpbio 1-2周 上海金畔
FP015 NGS™ Assay Tubes 500tubes 600 abpbio 1-2周 上海金畔



关键词：abpbio、蛋白荧光染料、定量检测试剂盒、核酸标记探针、细胞器荧光探针

abpbio2024年价格表

发表于由

abpbio2024年价格表

ABP Biosciences 公司总部设在美国马里兰州，拥有300平方米的现代化化学合成实验室，及相应的生物分析测试实验室。公司严格按照ISO 9001:2008质量管理体系实行，确保为客户提供高品质的产品和服务。

abpbio公司产品线包括：核酸、蛋白荧光染料及定量检测试剂盒；核酸标记探针；细胞器荧光探针；荧光标记二抗及链霉亲和素；细胞增殖及细胞活性研究试剂盒；细胞凋亡研究试剂盒；细胞转染试剂；荧光素酶检测试剂；Andy Fluor™ 荧光标记探针；抗体标记试剂盒；离子探针；活性氧检测探针；qPCR及RT-qPCR试剂盒等。

abpbio公司将秉承“服务科研、造福生命”的宗旨，与您携手为生命科学事业贡献力量！

特别告知：为保证产品质量与良好性能，所以在购买相应产品的同时我司会收取一定量的运输费用！！！本次报价有效时间为2024年1月1日—2024年12月31日。

货号 品名 规格 价格 品牌 货期 价格来源
N100 GreenView DNA Gel Stain 500ul 400 abpbio 1-2周 上海金畔
N101 GreenView Plus DNA Gel Stain 500ul 600 abpbio 1-2周 上海金畔
N103 GreenView Ultra DNA Gel Stain 500ul 800 abpbio 1-2周 上海金畔
N102 RedView DNA Gel Stain 500ul 600 abpbio 1-2周 上海金畔
D012 SafeGreen Loading Dye 1mL 300 abpbio 1-2周 上海金畔
D013 SafeRed Loading Dye 1mL 300 abpbio 1-2周 上海金畔
D016 DNA Loading Buffer (6X) 5mL 70 abpbio 1-2周 上海金畔
D010-01 SYBR Green I (200× DMSO) 1mL 480 abpbio 1-2周 上海金畔
D010-02 SYBR Green I (200× DMSO) 5×1mL 2000 abpbio 1-2周 上海金畔
D011-01 ROX Reference Dye (25 μM) 1mL 320 abpbio 1-2周 上海金畔

关键词：abpbio、蛋白荧光染料、核酸标记探针、细胞器荧光探针、定量检测试剂盒

aatbio 2022年价格表

发表于由

美国AAT Bioquest Inc.(前身是ABD Bioquest，Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术。AAT Bioquest的产品帮助*的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学，免疫学，细胞生物学和分子生物学等领域。AAT Bioquest会不断介绍新产品，快速的丰富各个领域的产品。 1）提供反应荧光探针和发光探针，生物素和端粒酶能够应用于标记药物小分子和生物聚合物，如蛋白、核酸以及其他碳水化合物； 2）研究并生产荧光和发光探针用于检测蛋白，核酸和活细胞。 3）不断推出新型的荧光和发光探针用于检测多种酶，特别是检测水解酶和氧化还原酶类； 4）致力于开发用于信号转导研究的试剂； 5）提供生理和神经探针，特别是钙离子指示剂和膜电位探针。 除了这些标准目录产品，AAT Bioquest还提供常规服务来满足大家特殊研究需要。目前的研究包括常规的色谱合成、荧光和发光探针、常规生化研发、细胞核诊断检测以及高效HTS检测对复合物进行筛选提取目的物质等


PANAGENE FISH（荧光原位杂交）PNA 端粒探针方案

发表于由

 

PANAGENE FISH（荧光原位杂交）PNA 端粒探针方案

PANAGENE F1001

原则上，荧光原位杂交 (FISH) 应该能够提供单个染色体端粒长度的信息。直接标记的寡核苷酸探针由于其体积小（良好的穿透特性）、单链性质（探针无变性）和受控的合成，是此类分析的有吸引力的探针。然而，端粒重复序列的寡核苷酸杂交的效率还不足以将这种方法扩展到各种物种染色体中 TTAGGG 重复序列的定性研究之外。近研究表明，肽核酸 (PNA) 寡核苷酸探针将与互补的寡核苷酸序列杂交，产生的双链比 DNA/DNA 或 DNA/RNA 双链更稳定。在 PNA 中，传统 DNA 和 RNA 寡核苷酸的带电磷酸-（脱氧）核糖骨架被通过肽键连接的重复 N-（2-氨基乙基）-甘氨酸单元的不带电骨架取代。与 DNA 寡核苷酸相比，PNA 寡聚体表现出更高的序列特异性、改善的稳定性、重现性和更低的背景。由于 PNA/DNA 双链的 Tm 较高，短（18 聚体）端粒 PNA (CCCTAA)3 应用广泛。

 

 

开始前要做的事情二、杂交

1. 将载玻片置于 80 °C 预热培养箱中 5 min。

 

I. 端粒 PNA 探针的制备

1. 打开试管前离心试管，以便在试管底部收集冻干 PNA 探针。

2. 向管中加入甲酰胺，得到 PNA 探针的储备液。

3. 在 PNA 杂交缓冲液中将贮备液稀释至终浓度 200 nM。

ü 注：将 PNA 探针溶液在 4 ℃ 下避光储存。

 

II. 溶液制备

1. 杂交缓冲液

20 mM 钠2HPO4, pH 7.4

20 mM Tris，pH 7.4

60% 甲酰胺 2X SSC

0.1µg/ml 鲑鱼精子 DNA

 

2. RNase A 溶液

100µg/ml RNase A（2X SSC 中）

3. 胃蛋白酶 0.005% 溶液

50µl 5% 胃蛋白酶贮备液溶于 50 mL 0.01 MHCl 中。

ü 注：新鲜！使用前加热至 45 ℃。

4. 洗涤液

2X SSC/0.1% 吐温-20

 

杂交和洗涤

I. 预处理

1. 按照特定细胞系推荐的程序制备载玻片，并风干。

2. 将载玻片在 PBS 中浸泡 15 min。

3. 将载玻片在 4% 甲醛的 PBS 中 37 °C 固定 4 min。

4. 37 °C PBS 洗 5 min (X2)。

5. 向一个干净的平板中加入 500µl RNase A 溶液，并将每个载玻片面朝下置于 RNase A 溶液上，在 37 ℃ 下孵育 1 h。

ü 注：注意不要干燥。

6. 在 2X SSC（X3 重复）中清洗，并在 DW 中清洗。

7. 在 37 °C 下，将载玻片在 0.005% 胃蛋白酶中浸泡 4 min。

8. 37 °C PBS 洗 3 min (X2)。

9. 重复步骤 3-4。

10. 室温下在 PBS 中清洗 5 min。

11. 在冷乙醇系列中脱水载玻片（在 70%、85%、100% 中脱水 1 min）。

12. 晾干载玻片。

2. 向每张载玻片的标记区域加入 20µl PNA 探针的杂交缓冲液。

ü 注：使用前 90 °C 加热杂交缓冲液 5 min。

3. 用 18 x 18 mm 盖玻片覆盖载玻片上的标记区域。

ü 注：注意不要干燥。

4. 将载玻片在 85 °C 下变性 10 min。

ü 注：变性应在低 80 ℃ 和高 90 ℃ 之间进行。

仔细检查培养箱的温度。75 °C 以下的变性温度严重损害结果。

5. 将载玻片在室温下避光放置 1 h。

 

III. 洗涤

1. 在室温下将载玻片浸入洗涤液中，以取出盖玻片。

2. 在 55‐60 °C 下用清洗液清洗载玻片 10 min (X2)。

ü 注：应在 55-60 ℃ 下进行清洗。

3. 将载玻片在清洗液中清洗 1 min

室温。

 

IV. 复染

1. 将载玻片在 DAPI/2X SSC 中染色 10 min。

2. 在 2X SSC 中清洗载玻片 2 min。

3. 在 1X SSC 中清洗载玻片 2 min。

4. 在 DW 中清洗载玻片 2 min。

5. 用离心机干燥载玻片。

6. 在载玻片的目标区域滴一滴封片剂。

7. 盖上盖玻片，使溶液均匀分布在盖玻片下。避免产生气泡。

8. 使用带有适当滤光片的荧光显微镜观察染色载玻片。

 

V. 参考文献

1. Kentaro Taemura等人2005,Developmental Biology 281,196‐207.

2. Won‐Woo Lee等人2002,Immunology 105,458‐465.

3. Heather Perry.等人。2001,Journal of Microbiological Methods 47,281‐292.

4. 陈彩福等人。1999，哺乳动物基因组 10，13‐18。

5. M. Hultdin等人。1998,Nucleic Acids Research 26 (16) ,3651‐3656.

6. Peter M. Landsdorp等人。1996,Human Molecular Genetics 5 (5) ,685‐691.

L-012化学发光探针

发表于由

L-012化学发光探针

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L-012化学发光探针L-012化学发光探针

生化学用 for BiochemistryL-012化学发光探针

规格含量 : 90.0+%（HPLC）

制造商 : FUJIFILM Wako Pure Chemical Corporation（富士胶片和光）

储存条件：冷藏（干冰运输）

CAS RN® : 143556-24-5   

分子式 : C13H8ClN4NaO2  

分子量 : 310.67

◆基本信息


L-012 是一种高灵敏度的化学发光（CHL）探针，比鲁米诺（Luminol）试剂更有效。L-012 与多种类型的活性氧反应，这些活性氧来自人血液和口腔中激活的中性粒细胞或者大鼠腹膜腔。该产品可以用于有辣根过氧化物酶的ELISA 试剂盒，可提高反应灵敏度。


L-012化学发光探针

结构式

 

溶解及保存：蒸馏水溶解成20 mM/L（6.23 mg/mL）的水溶液，再用50 mM/L的Tris盐酸缓冲液（pH 7.5）稀释 至最终浓度为500 μM/L（有细胞的反应体系）。另外，在没细胞参与的反应体系中时，建议使用终浓度为5~50 μM/L。母液冷冻保存，使用时再稀释。


◆物性信息

外观

白色~黄色，结晶~粉末

溶解性

可溶于水。

Q： L-012能渗入细胞吗?

A： 由于L-012对脂质高度亲和，它比luminol和lucigenin更能具有细胞渗透性。另一方面，ROS无限制地在胞外释放。因此L-012被认为也能

       检测胞外ROS。

 

Q： L-012的使用浓度如何?

A： 这取决于应用和条件。

       [体外] 培养细胞（EoL-1细胞）： 500 ~ 800 μmol/L.

       全血和分离的中性粒细胞： 400 μmol/L

       多形核中性粒细胞（PMNs）（由小鼠中分离）：  2 mmol/L

       无细胞的样品： 4 μmol/L, 15 μmol/L, and 50 μmol/L

       [体内] Balb/c 小鼠[皮下]： 20 ~ 80 μL of L-012(5mg/mL)

       Balb/c 小鼠[腹膜内]： 100 μL of L-012 (15mg/mL)

       C57BL/10.Q (B10.Q) 小鼠 [腹膜内]： 1 ~ 75 mg/kg

 

Q： 是否可用于动物活体成像？

A： 如果所用的小动物成像仪中有发光检测探头，就可以进行检测。以下是文献报道过的仪器型号：

      ・IVIS 100 imaging systems

      ・Infinite M200 [Tecan]
      ・Luminescence Reader BLR-201 [Aloka]
      ・Beckman-Coulter DTX880 multimode plate reader [Beckman]

 

Q：  是否可用于固定细胞？

A：  目前尚无证据表明，活性氧（ROS）在细胞活性停止后仍然存在。普遍看法是认为在细胞活性停止后（细胞死亡）ROS消失。固定组织或

        细胞会停止细胞活性，因此不建议用于ROS检测。

        本品无需固定检测对象即可检测到ROS，使用方法包括但不限于将其添加到细胞培养上清液中或进行动物腹腔注射。


参考文献


 1.

Time-series transcriptome of Brachypodium distachyon during bacterial flagellin-induced pattern-triggered immunity

Tsubasa Ogasahara, Yusuke Kouzai, Megumi Watanabe, Akihiro Takahashi, Kotaro Takahagi, June-Sik Kim, Hidenori Matsui, Mikihiro Yamamoto, Kazuhiro Toyoda, Yuki Ichinose, Keiichi Mochida, Yoshiteru Noutoshi

Front Plant Sci. 2022; 13: 1004184. Published online 2022 Sep 15. doi: 10.3389/fpls.2022.1004184

PMCID: PMC9521188

 2.

Ruscogenins Improve CD-Like Enteritis by Inhibiting Apoptosis of Intestinal Epithelial Cells and Activating Nrf2/NQO1 Pathway

Hexin Wen, Xiaofeng Zhang, Qingqing Li, Ju Huang, Guangyong Liu, Jingyue Zhao, Yiran Liu, Li Shen, Yuyang Li, Kun Yang, Lugen Zuo, Jing Li, Jing Nian, Ping Xiang, Hao Zhao, Liang Yu, Mulin Liu, Zhijun Geng, Xue Song

Oxid Med Cell Longev. 2022; 2022: 4877275. Published online 2022 Mar 10. doi: 10.1155/2022/4877275

PMCID: PMC8930266

 3.

TOPLESS promotes plant immunity by repressing auxin signaling and is targeted by the fungal effector Naked1

Fernando Navarrete, Michelle Gallei, Aleksandra E. Kornienko, Indira Saado, Mamoona Khan, Khong-Sam Chia, Martin A. Darino, Janos Bindics, Armin Djamei

Plant Commun. 2022 Mar 14; 3(2): 100269. Published online 2021 Dec 17. doi: 10.1016/j.xplc.2021.100269

PMCID: PMC9073326

 4.

Noninvasive imaging of the lung NETosis by anti-Ly6G iron oxide nanoparticles

Jianghong Zhong, Chanyu Zheng, Haiqiang Gao, Wei Tong, Hui Hui, Jie Tian

Heliyon. 2022 Aug; 8(8): e10043. Published online 2022 Aug 3. doi: 10.1016/j.heliyon.2022.e10043

PMCID: PMC9382280

 5.

Glycolysis and the Pentose Phosphate Pathway Promote LPS-Induced NOX2 Oxidase- and IFN-β-Dependent Inflammation in Macrophages

Jonathan R. Erlich, Eunice E. To, Raymond Luong, Felicia Liong, Stella Liong, Osezua Oseghale, Mark A. Miles, Steven Bozinovski, Robert D. Brooks, Ross Vlahos, Stanley Chan, John J. O’Leary, Doug A. Brooks, Stavros Selemidis

Antioxidants (Basel) 2022 Aug; 11(8): 1488. Published online 2022 Jul 29. doi: 10.3390/antiox11081488

PMCID: PMC9405479

 6.

Identification of QTL for Target Leaf Spot resistance in Sorghum bicolor and investigation of relationships between disease resistance and variation in the MAMP response

Jennifer Kimball, Yaya Cui, Dongqin Chen, Pat Brown, William L. Rooney, Gary Stacey, Peter J. Balint-Kurti

Sci Rep. 2019; 9: 18285. Published online 2019 Dec 4. doi: 10.1038/s41598-019-54802-x

PMCID: PMC6893015

 7.

Chemical genetic identification of a lectin receptor kinase that transduces immune responses and interferes with abscisic acid signaling

Jiyoung Park, Tae-Houn Kim, Yohei Takahashi, Rebecca Schwab, Keini Dressano, Aaron B Stephan, Paulo HO Ceciliato, Eduardo Ramirez, Vince Garin, Alisa Huffaker, Julian I Schroeder

Plant J. Author manuscript; available in PMC 2020 May 1.

Published in final edited form as: Plant J. 2019 May; 98(3): 492–510. Published online 2019 Mar 7. doi: 10.1111/tpj.14232

PMCID: PMC6488365

 8.

Intranasal and epicutaneous administration of Toll-like receptor 7 (TLR7) agonists provides protection against influenza A virus-induced morbidity in mice

Eunice E. To, Jonathan Erlich, Felicia Liong, Raymond Luong, Stella Liong, Steven Bozinovski, Huei Jiunn Seow, John J. O’Leary, Doug A. Brooks, Ross Vlahos, Stavros Selemidis

Sci Rep. 2019; 9: 2366. Published online 2019 Feb 20. doi: 10.1038/s41598-019-38864-5

PMCID: PMC6382773

 9.

Mixed Linkage β-1,3/1,4-Glucan Oligosaccharides Induce Defense Responses in Hordeum vulgare and Arabidopsis thaliana

Sina Barghahn, Gregory Arnal, Namrata Jain, Elena Petutschnig, Harry Brumer, Volker Lipka

Front Plant Sci. 2021; 12: 682439. Published online 2021 Jun 17. doi: 10.3389/fpls.2021.682439

PMCID: PMC8247929

10.

The Pleiades are a cluster of fungal effectors that inhibit host defenses

Fernando Navarrete, Nenad Grujic, Alexandra Stirnberg, Indira Saado, David Aleksza, Michelle Gallei, Hazem Adi, André Alcântara, Mamoona Khan, Janos Bindics, Marco Trujillo, Armin Djamei

PLoS Pathog. 2021 Jun; 17(6): e1009641. Published online 2021 Jun 24. doi: 10.1371/journal.ppat.1009641

PMCID: PMC8224859

11.

Genome-wide association analysis of the strength of the MAMP-elicited defense response and resistance to target leaf spot in sorghum

Rozalynne Samira, Jennifer A. Kimball, Luis Fernando Samayoa, James B. Holland, Tiffany M. Jamann, Patrick J. Brown, Gary Stacey, Peter J. Balint-Kurti

Sci Rep. 2020; 10: 20817. Published online 2020 Nov 30. doi: 10.1038/s41598-020-77684-w

PMCID: PMC7704633

12.

Engineering Smut Resistance in Maize by Site-Directed Mutagenesis of LIPOXYGENASE 3

Krishna Mohan Pathi, Philipp Rink, Nagaveni Budhagatapalli, Ruben Betz, Indira Saado, Stefan Hiekel, Martin Becker, Armin Djamei, Jochen Kumlehn

Front Plant Sci. 2020; 11: 543895. Published online 2020 Oct 21. doi: 10.3389/fpls.2020.543895

PMCID: PMC7609844

13.

Rapid repeatable in vivo detection of retinal reactive oxygen species

Ning Fan, Sean M. Silverman, Yang Liu, Xizhen Wang, Byung-Jin Kim, Liping Tang, Abbot F. Clark, Xuyang Liu, Iok-Hou Pang

Exp Eye Res. Author manuscript; available in PMC 2018 Aug 1.

Published in final edited form as: Exp Eye Res. 2017 Aug; 161: 71–81. Published online 2017 Jun 8. doi: 10.1016/j.exer.2017.06.004

PMCID: PMC5554724

14.

A rapid bioluminescence assay for measuring myeloperoxidase activity in human plasma

Reece J. Goiffon, Sara C. Martinez, David Piwnica-Worms

Nat Commun. 2015 Feb 10; 6: 6271. Published online 2015 Feb 10. doi: 10.1038/ncomms7271

PMCID: PMC4347050

15.

CRISPR/Cas9-mediated knockout of p22phox leads to loss of Nox1 and Nox4, but not Nox5 activity

Kim-Kristin Prior, Matthias S. Leisegang, Ivana Josipovic, Oliver Löwe, Ajay M. Shah, Norbert Weissmann, Katrin Schröder, Ralf P. Brandes

Redox Biol. 2016 Oct; 9: 287–295. Published online 2016 Aug 24. doi: 10.1016/j.redox.2016.08.013

PMCID: PMC5021817

产品列表
产品编号 产品名称 产品规格 产品等级 备注
120-04891 L-012
L-012化学发光探针		 100 mg － －
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可检测细胞温度的荧光探针 Thermoprobe®

发表于由

可检测细胞温度的荧光探针
Thermoprobe®

  • 产品特性
  • 相关资料
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可检测细胞温度的荧光探针可检测细胞温度的荧光探针 Thermoprobe®

Thermoprobe® 

 


本产品是一款可检测细胞温度的的荧光探针。根据检测对象、检测方法以及探针导入细胞的方法不同，可分为4类。

 

※本产品经东京大学及Kirin株式会社许可用作研究试剂。

※本产品仅供研究。研究以外不可使用。



◆关于细胞功能与温度


温度是支配细胞内所有化学反应的物理量。执行细胞功能时，若细胞内特定的位置发生伴随发热或吸热反应的化学反应，便会引起局部温度变化。因此，细胞内的温度分布反映了细胞内分子的热力学与功能。另外，从医学层面上看，亦有报告指出癌细胞等病态细胞中发热激烈。综上所述，只要知道细胞内的温度分布，不仅可以加深对细胞功能的理解，还有望为新型诊断、治疗法的开发做出贡献。


可检测细胞温度的荧光探针 Thermoprobe®



◆可检测细胞温度的荧光探针系列


●Ratio型


探针种类

　Ratio型

产品名称

　Cellular Thermoprobe® for Fluorescence Ratio

产品编号

　FDV-0005

检测对象

　细胞内部温度

空间分辨率

　240 nm

检测方法

　2个荧光的荧光强度比

检测装置

　荧光显微镜

检测波长

　（例）激发波长458 nm/荧光波长490~530 nm及570~610 nm

导入细胞的方法

　与5％葡萄糖溶液混合后导入细胞

可导入的细胞类型

　贴壁细胞，悬浮细胞

温度检测范围

　28℃～44℃

检测灵敏度

　仅0.01~0.25°C的温度差亦可检测

荧光发光原理

￥探针由温敏性基团（NNPAM）、亲水性基团（SPA等）、荧光基团（DBD-AA等）组成。

￥探针水溶液在低温时，由于结构内水分子的存在使荧光基团荧光减弱；在高温时，水分子被排除到探针

￥外，使荧光基团荧光增强。


可检测细胞温度的荧光探针 Thermoprobe®

探针的化学结构探针

的化学结构及特点

￥含有根据温度变化改变荧光强度的荧光基团1（DBThD-AA）与不受温度变化影响的荧光基团

￥2（BODIPY-AA）的两种荧光基团。因此，可以从DBThD-AA与BODIPY-AA的荧光强度比中不依赖

￥探针导入浓度准确测量温度。


可检测细胞温度的荧光探针 Thermoprobe®

平均分子量

　28,000



●FLIM型


探针种类

　FLIM型

产品名称

　Cellular Thermoprobe® for Fluorescence Lifetime

产品编号

　FDV-0004

检测对象

　细胞内部温度

空间分辨率

　200 nm

检测方法

　检测荧光寿命

检测装置

　荧光显微镜（附荧光寿命成像系统）

检测波长

　（例）激发波长405 nm/荧光波长560~610 nm

导入细胞的方法

　与5％葡萄糖溶液混合后导入细胞

可导入的细胞类型

　贴壁细胞，悬浮细胞

温度检测范围

　28℃～38℃

检测灵敏度

　仅0.05~0.54°C的温度差亦可检测

荧光发光原理

￥探针由温敏性基团（NNPAM）、亲水性基团（SPA等）、荧光基团（DBD-AA等）组成。

￥探针水溶液在低温时，由于结构内水分子的存在使荧光基团荧光减弱；在高温时，水分子被排除到探针

￥外，使荧光基团荧光增强。


可检测细胞温度的荧光探针 Thermoprobe®

探针的化学结构探针

的化学结构及特点

￥相较于Diffusive型（#FDV-0002），亲水性基团替换为阳离子型（APTMA），探针可在短时间内自动导入细胞。

￥由于检测荧光寿命，因此可以不依赖探￥针导入浓度准确测量温度。


可检测细胞温度的荧光探针 Thermoprobe®

平均分子量

　12,300



●Diffusive型


探针种类

　Diffusive型

产品名称

　Diffusive Thermoprobe®

产品编号

　FDV-0002

检测对象

　细胞内部温度

空间分辨率

　200 nm

检测方法

　检测荧光寿命

检测装置

　荧光显微镜（附荧光寿命成像系统）

检测波长

　（例）激发波长460 nm/荧光波长560 nm

导入细胞的方法

　微注射

可导入的细胞类型

　贴壁细胞

温度检测范围

　28℃～40℃

检测灵敏度

　仅0.18~0.58°C的温度差亦可检测

荧光发光原理

　探针由温敏性基团（NNPAM）、亲水性基团（SPA等）、荧光基团（DBD-AA等）组成。

　探针水溶液在低温时，由于结构内水分子的存在使荧光基团荧光减弱；在高温时，水分子被排除到探针

￥外，使荧光基团荧光增强。


可检测细胞温度的荧光探针 Thermoprobe®

探针的化学结构探针

的化学结构及特点

　亲水性基团采用阴离子型（SPA）。
　由于检测荧光寿命，因此可以不依赖探针导入浓度准确测量温度。


可检测细胞温度的荧光探针 Thermoprobe®

平均分子量

　19,300



●Particulate型


探针种类

　Particulate型

产品名称

　Particulate Thermoprobe®

产品编号

　FDV-0003

检测对象

　单个细胞的平均温度

空间分辨率

　——

检测方法

　检测荧光强度

检测装置

　荧光显微镜

检测波长

　（例）激发波长460 nm/荧光波长560 nm

导入细胞的方法

　微注射

可导入的细胞类型

　贴壁细胞

温度检测范围

　27℃～33℃

检测灵敏度

　仅~0.5°C的温度差亦可检测

荧光发光原理

￥Particulate Thermoprobe® 为纳米凝胶型温度探针，由温敏性基团（polyNIPAM）、水敏感荧光基

￥团（DBThD-AA）、交联器（MBAM）组成。探针水溶液在低温时，由于结构内水分子的存在使荧光

￥基团荧光减弱；在高温时，水分子被排除到探针外，使荧光基团荧光增强。


可检测细胞温度的荧光探针 Thermoprobe®

探针的化学结构探针

的化学结构及特点

平均分子量

　（平均直径：48 nm）



◆温度探针的相关文献


● Uchiyama S., et. al., Chem Commun (Camb). 2017 Oct 5;53(80):10976-10992. doi: 10.1039/c7cc06203f.



 ◆产品列表


Ratio型

产品编号

产品名称

规格

FDV-0005

Cellular Thermoprobe for Fluorescence Ratio
细胞温度检测荧光探针 Ratio型

200 μg

FDV-0005

3×200 μg

FILM型

产品编号

产品名称

规格

FDV-0004

Cellular Thermoprobe for Fluorescence Lifetime
细胞温度检测荧光探针 FILM型

200 μg

FDV-0004

3×200 μg

Diffusive型


产品编号

产品名称

规格

FDV-0002

Diffusive Thermoprobe
细胞温度检测荧光探针 Diffusive型

100 μg

Particulate型


产品编号

产品名称

规格

FDV-0003

Particulate Thermoprobe
细胞温度检测荧光探针 Particulate型

100 μg

※ 本页面产品仅供研究用，研究以外不可使用。



参考文献



◆Ratio型


1. 

Kimura, H., Nagoshi, T., Yoshii, A., Kashiwagi, Y., Tanaka, Y., Ito, K., … & Yoshimura, M. (2017). The thermogenic actions of natriuretic peptide in brown adipocytes: The direct measurement of the intracellular temperature using a fluorescent thermoprobe. Scientific reports, 7(1), 1-10. 全文

【IF=3.998】

2. 

Halip, H., Yoshimura, Y., Inami, W., & Kawata, Y. (2020). Ultrashort laser based two-photon phase-resolved fluorescence lifetime measurement method. Methods and Applications in Fluorescence, 8(2), 025003. 全文

【IF=2.8】

◆FLIM型


1.

Inada, N., Fukuda, N., Hayashi, T., & Uchiyama, S. (2019). Temperature imaging using a cationic linear fluorescent polymeric thermometer and fluorescence lifetime imaging microscopy. Nature protocols, 14(4), 1293-1321. 全文

【IF= 10.419】

2. 

Kato, H., Okabe, K., Miyake, M., Hattori, K., Fukaya, T., Tanimoto, K., … & Ono, M. (2020). ER-resident sensor PERK is essential for mitochondrial thermogenesis in brown adipose tissue. Life science alliance, 3(3) 全文

◆Thermoprobe® 


1. 

Uchiyama, S., Gota, C., Tsuji, T., & Inada, N. (2017). Intracellular temperature measurements with fluorescent polymeric thermometers. Chemical Communications, 53(80), 10976-10992. 全文

【IF= 5.996】

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aatbio代理

发表于由

aatbio代理-上海金畔

aatbio是一家专注从事生物、化学试剂及其试剂盒的高新技术企业；主要以荧光探针，分子探针，核酸/蛋白质标记、细胞检测等技术和产品为研发核心，产品广泛应用于基因合成、细胞检测、活体示踪，抗体标记、新药筛选等领域。

美国AAT Bioquest公司是生物光谱领域全qiu先驱，产品畅销全qiu。长年以来百萤生物与AAT Bioquest互补优势，为国内外广大用户提供光谱检测，底物显色，荧光发光技术等全系列解决方案。近年来，百萤生物已与全球多家zhi名药企、CRO公司、众多高校及科研单位建立了长期稳定的合作关系；我们的服务宗旨：不断创新，为广大科研用户提供优质的服务；主要分为以下几个产品线：

开发和生产荧光标记探针和发光探针。这些荧光标记探针和发光探针是用于标记生物大分子例如，蛋白质，核酸，碳水化合物的主要工具；

检测蛋白质，核酸和活细胞荧光和荧光探针；

新型各种酶活性荧光探针和发光探针(特别是用与研究蛋白酶，蛋白激酶和氧化还原酶荧光标记探针和发光探针)；

开发用于分子信号转导研究试剂和试剂盒；

生物钙膜电位探针和神经生物学荧光标记探针和发光探针；


Dyomics代理

发表于由

Dyomics代理-上海金畔

Dyomics公司是一家专注于生物发光和荧光探针的研发、制造和销售的生物技术公司。我们的产品包括荧光染料、发光酶、荧光探针和相关的实验室设备。Dyomics公司成立于2008年，总部位于德国约翰尼斯堡。我们拥有一支专业的研发团队，不断推出具有创新性和高性能的荧光探针产品。我们的产品广泛应用于分子生物学、细胞生物学、药物研发、生物成像等领域，受到全球客户的广泛赞誉。

Dyomics常卖产品：

货号 品名 规格 品牌
510XL-00-50mg 510XL-carboxylic acid 50mg Dyomics
647P1-01A DY-647P1-NHS-ester, portionized 5×0.2mg Dyomics
681-00 DY-681, Carboxylic acid 1mg Dyomics
DY-431-01 DY431-NHSE 1mg Dyomics
DY-431-5mg DY-431-NHS-Ester 5mg Dyomics
DY-681 Carboxylic acid 1mg Dyomics